恶性肿瘤T细胞亚群检测的临床意义探讨

恶性肿瘤T细胞亚群检测的临床意义探讨 医学临床研究2006年7月第23卷— 7~JClinRes,Ju— 1.2006,Vol23,No7 恶性肿瘤T细胞亚群检测的I临床意义探讨 黄华健'朱建军 (湖南省邵阳市中心医院,湖南邵阳422000) [摘要]【目的】分析恶性肿瘤患者的CD3,CD4,CD8T细胞及CD4/CD8比值水平, 探讨检测T细 胞亚群与恶性肿瘤发展及预后的关系.【方法】采用APAAP法检测研究组223例 恶性肿瘤治疗前,后T细 胞亚群水平,设正常对照组220例进行对比分析.【结果】研究组恶性肿瘤患者 CD3,CD4T细胞,CD4/ CD8比值明显低于正常对照组(P<O.01),而CD8水平两组之间差异无显着性 (P>0.05).恶性肿瘤各 疾病组患者治疗后CD3+,CD4T细胞及CD4/CD8比值均比治疗前明显增高(均 P<O.01).【结论】T细 胞亚群活性检测能反映恶性肿瘤患者的机体免疫状况,对其观察疾病的发展及预 后有一定的临床意义. [关键词]肿瘤/免疫学;T淋巴细胞亚群 TheValueofDetectingTLymphocyteSubpopulationinPatientswithMalignantCarcinoma HUANGHua—jlan.ZHUJian—iun(ShaoyangCentralHospital,Hunan,422000China) [Abstract][()bjective]ToassaytheexpressionofCD3,CD4,CD8onTlymphocytesinpatient swith malignantcarcinomaandinvestigatetherelationshipbetweenTlymphocytesubsetandthed evelopmentand prognosisofmalignanttumor.[Methods]APAAPmethodswereperformedtOdetecttheleve lofTlymphocyte subpopulationof223caseswithmalignanttumorand220casesofcontrolgroupatthesametime.[Results] TheCD3,CD4,CD8TcellandtheratioofCD4/cD8weresignificantlylowerinpatientsthanthosein thecontrolgroup(P<0.01),whilenosignificantdifferenceofthenumberofCD8Tcellwasfound(P>0. 05).However,aftertreatment,theCD3,CD4,CD4/cD8increaseddramatically.[ConclusionlSotOde— tectthevalueofCD3,CD4,CD8TcellandtheratioofCD4/cD8canreflecttheimmunologicalstateof malignanttumorpatientsandalsothereissomeclinicalvalueinestimatingtheprognosisofthosepatients. [Keywords3neoplasms/IM;T—lymphocytesubsets. [中图分类号]R73o[文献标识码]A[文章编号]167卜7171(2006)07—1043—02 机体的免疫受抑在肿瘤的发生与发展中起重要 作用,为了解恶性肿瘤患者治疗前后的免疫状况,探 讨其与肿瘤的发生与发展及预后的关系,作者对自 2002年1月至2005年12月期间本院住院恶性肿瘤 患者治疗前后的CD3,CD4,CD8T细胞水平及 CD4/CD8比值进行检测,以期指导进一步治疗及 估计预后提供参考.现将结果报道如下. l临床 1.1一般资料标本来自本院经I临床确诊的住院 恶性肿瘤患者223例,包括食道癌16例,肺癌28 例,胃癌29例,肝癌25例,肠癌28例,卵巢癌18 例,乳腺癌32例,多发性骨髓瘤(Multiplemyelo— ma,MM)19例,淋巴瘤28例.其中男性132例,女 性91例;平均年龄56(19,88)岁.全部患者在治 疗前和治疗后(包括手术,放化疗)两周采血,按常规 ? 论着? 方法分离外周血单个核细胞.正常对照组220例, 均为健康体检者,其中男性118例,女性102例;平 均年龄52.5(16,78)岁. 1.2试剂及方法淋巴细胞亚群采用碱性磷酸酶 一 alkaline 抗碱性磷酸酶(Alkalinephosphataseanti— phosphatase,APAAP)法检测.?主要试剂:淋巴 细胞分离液(聚蔗糖一泛影葡胺分层液,Ficoll— Hypague液).上海试剂二厂提供;抗人外周血T 淋巴细胞及亚群单觅隆抗体检测试剂盒,上海太阳 生物技术公司提供.试剂盒组成:单克隆一抗CD3, CD4,CD8;二抗及显色液A,B.?操作步骤:取被 检者外周静脉血3ml,加入含肝素的抗凝瓶中混匀, 用Ficoll—Hypaque液分离.提取淋巴细胞悬液,再用 无Ca,Mg的Hanks液离心2次,取沉淀并涂 片;用分隔笔分隔成3,4个区域,并作相应记号,置 纯丙酮固定5,10min后即刻置于洗涤液内洗3 医学临床研究2006年7月第23卷第7期JClinRes,Ju1.2006.Vol23.?7 min/次,共3次;经底物显色液作用后用显微镜计数 阳性细胞的百分数,细胞膜有鲜红沉淀物者判为阳 性细胞. 1.3统计学方法数据以?s表示,以SPSS10.0 统计软件处理.采用t检验. 2结果 研究组中各种恶性肿瘤CD3,CD4T细胞水 平及CD4/CD8比值均较对照组明显减少(P< 0.01),尤以MM及淋巴瘤减少最为明显.恶性肿 瘤治疗前后CD4T细胞及CD4/CD8比值较对 照组明显减少(Pd0.01).见表1,2. 表1研究组治疗前,后与对照组T细胞 亚群活性比较 与对照组相比:1)P<O.01,2)P>O.05 表2各种恶性肿瘤T细胞亚群活性及治疗前后CD4/CD8比值() 与治疗前相比:1)P<O.01;2)P<O.05;3)P>O.05 3讨论 在机体抗肿瘤免疫效应中,细胞免疫起着重要 的作用.而细胞免疫又以T淋巴细胞亚群起主导 作用.T淋巴细胞亚群分CD4辅助亚群和CD8 抑制亚群.而CD3表面标志存在于所有T细胞表 面,可反映CD4和CD8T细胞的总体水平.在正常情况下,CD4/CD8比值基本恒定在1.5,2.0之 间…,以维持体内环境的平衡. 本研究结果显示恶性肿瘤患者CD3,CD4T 细胞及CD4/CD8比值均明显低于正常对照组,而 尤以血液系统恶性肿瘤(MM和淋巴瘤)为甚;CD8T 细胞与正常对照组差异无显着性.说明患者免疫功 能出现不同程度的抑制?],而机体的免疫受抑在肿 瘤的发生与发展中起重要作用.主要原因可能是许 多类型的肿瘤都能产生转化生长因子一p(TGF_p)在体 外能强烈抑制CD4T细胞应答和活性细胞毒性T 细胞的产生【3].而MM和淋巴瘤较其他恶性肿瘤与 细胞免疫有更为直接的关系,所以CD3,CD4T细 胞及CD4/CD8比值下降更为明显. 检测结果还表明食道癌,肺癌,胃癌,肝癌,肠 癌,卵巢癌,乳腺癌,MM,淋巴瘤等多种肿瘤患者体 内CD4T细胞及CD4/CD8比值均明显低于正 常对照组,CD8T细胞与正常对照组差异无差异 性,说明肿瘤发生时是因为CD4T细胞的明显受 抑而导致的CD4/CD8比值降低.同时对恶性肿 瘤患者在手术或放,化疗(包括胸腺肽等免疫治疗) 的治疗后CD3,CD4T细胞及CD4/CD8比值 均明显高于治疗前,提示患者在进行手术或放,化疗 为监 及免疫治疗后细胞免疫功能得以逐步恢复,认 测以上指标有利于患者的疗效观察. 因此,检测T淋巴细胞亚群活性对了解患者机 体的免疫状况,判断肿瘤发展及预后有一定的临床 意义. [参考文献] [1]何球藻.吴厚生.曹雪涛.细胞与分子免疫学[M].上海:上海科 学技术文献出版社.1997.146. [2]秦建国.韩本立.潘世春.原发性肝癌患者T淋巴细胞亚群及 功能变化在肿瘤复发中的临床意义[J].中华实验外科杂志. 1998t15(1):11. [3]卢香兰.李霞.王萍萍等.恶性肿瘤患者T细胞亚群和Sll一IR 的变化及意义[J].中国医科大学.2004.33(3):243—244. (本文编辑}葛志庆)[收稿日期]2006—02—21