人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异关系研究

人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异关系研究 人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异 关系研究 ? 2 ,,多 科墨2f!堂(ActaUniversitatisScieU—aeMedicinn.Ch,ongqing) 文章编号:0253?3626(2000)02-0113-02 人巨细胞病毒变异关系研究 /'{7/ 摘薹Ig的:研究孕妇HcMv感染对胚胎染色体着丝粒点(cd1变异的影响,探讨cMV感染引起出生缺陷的原困和机 H 制.方法;用我室改良的cd_NOR同步银染技术对l5例HcMV感染和25例非感染孕妇的胚胎或绒毛组织cd消失,cd变异进打 比较分析.结果:前者cd消失,cd变异频率较后者有显着和极显着的增高.结论:染色体cd的变化可能是HCMV感染引起胚 胎发育异常的重要原因之,对HcMv感染孕妇的胚胎或绒毛组织进行染色体cd分析对评价胚胎进一步发育可能受累的风险 和优生优育具有重要的临床意义. ~till词着丝粒点;巨细胞病毒; 中国圈书分类法分类号:Q343.2 胚胎; R373 产前诊断H 文1吐标识码{A收稿日期;1999?12-14 Astudyontherelationshipbetweentheinfectionofhuman cytomegalovirus(HCMV)andthevariationofkinetochore WENGYa-guan~,etal Laborator5rofGenetics,Dcpa.r~crdofFamilyPlanning AbstractObie~ive:WestudiedtherelationshipbetweentheinfectionofHCMVandthevariationot kinetochore.researchedthemechanismofcausingabnormalgrowthembryo.Methods:Kinetochore (centromericdots,Cd)ofchorionicvillusorembryotissueof15HCMV.DNA(PCR)positiveand25HCMV-DNA (PCR)negativepregnantwomenwerestudiedbyCd-bandingtechniques,Results:ThefrequencyofCdlossand Cdsizevariationinpositivegroupweresignfiflcanflyhi曲 erthanthoseinneg~ivegroup.Conclusion:Thes柚dy indicatedthatCdvariationcausedbyHCMVinfectionplayanimportantroleinformofbirthdefect,Cdbanding analysisinchorionicvillusorembryotissueofHCMV-DNA(PCR)positivepregnantwomencouldevaluatethe riskofabnormalgrowthembryo, KeyWordsKinetochor~;Cytomegalovirus:Embryo:Prenataldiagnosis 人巨细胞病毒01umancytomeg~lovirus,HCMY) 是引起人类先天性畸形和婴幼儿感染的重要病原之 一 ,然而HCMV~『起出生缺陷的原因和机制尚不清 楚.染色体着丝粒点(centromeredots,Cd)是染色体 与纺锤丝连接的部位,主要DNA和cd蛋白组成, 是细胞有丝分裂中保证染色体正常分离的重要结构 .胚胎发育过程中细胞进行着旺盛的有丝分裂, 染色体Cd功能异常会导致细胞分裂过程中染色体数 目异常而引起胚胎发育异常或出生缺陷.本文对 HCMV感染与染色体Cd变异的关系进行了研究,从 细胞遗传学的角度来探讨HCMV感染引起胚胎发育 异常和出生缺陷的机制. 1材料与方法 作者彳r绍:翁亚光(1962-07t~k).男.副救授 1.1对象用PcR方法对妊娠4,20周妇女HCMV?DNA进 行检测(华美公司试剂盒),并对25例HCMV?DNA阴性, 17例HCMV-DNA阳性孕妇胚胎或绒毛组织细胞体外培养制 各染色体标本.其中25例HCMV-DNA阴性孕妇胚胎或绒毛 组织染色体核型全部正常(非感染组),17例HCMV-DNA 阳性孕妇胚胎或绒毛蛆朗中2例为染色体非整倍性异常,15 例染色体棱型正常(感染蛆) 1.2方法 1.2.1采用长期或短期细胞培养法制备绒毛或胚胎的染色体 标本. 1.22对染色体核型正常的标本用我室改良的Cd-NOR同步银 染法制备染色体cd标本, 1.2.3标本分析 cd消失:每条染色体的两条或一条染色单体的Cd区未染 色计Cd消失一次(见图l,图2) CA变异:每条染色体的两条或一条染色单体的Cd染色区 小于正常cd太小的一半计cd变异一次(见图l,图2). 重庆医科大学2000年第25卷第2期 (AclaUnivemRatisScientiaeMedicinaeChongqing) 嗍正常CdCd消失Cd变异 圈1c?变化示意圈 2结果 圈2cd丑t照相圈(16×100倍) 对感染组和非感染比较分析结果表明:HCMV 感染孕妇的胚胎或绒毛组织细胞染色体cd消失频 率,cd变异频率的增高与非感染组比较.经统计学 分析(t检验)差异显着和极显着. 寰HCMVA和非感;组Cd变化比较分析寰(dt譬) 表示与非感染组比较有显着差异(0_05) 幸幸表示与非感染组比较有极显着差异(.p(0.01) 3讨论 HCMV感染目前认为是引起胚胎发育异常的重 要原因之一,孕妇感染后可通过胎盘致胎儿宫内感 染.导致孕妇自然流产,死胎,胎儿先天畸形等 .在自然流产,死胎中染色体数目异常胚胎约占 50~,4.我们曾对自然流产的胚胎绒毛染色体cd研究 中发现cd的变异与正常胚胎比较有显着的增高, 这可能是引起染色体数目异常的重要原因之一,然 而引起染色体cd变异的原因尚不清楚.HCMV侵入 人体细胞后,病毒DNA将会破坏细胞原有的遗传平 衡或通过病毒DNA整合到人类DNA上,导致部分基 因结构或功能的异常.我们认为这种整合可能涉及 到:1,Cd区DNA,改变其原有的结构和特性,将 阻碍Cd蛋白与该DNA区的正常结合:2,Cd蛋白相 关的基因,可造成Cd蛋白合成缺陷或结构和功能异 常.这些变化将会使整个cd的组成,结构和功能直 接受到影响. cd消失可由cd蛋白缺乏所致,表明Cd活性的 丧失.cd消失频率感染组与非感染组比较.统计 学分析有显着的增加,Cd的消失会严重影响纺锤丝 与cd的正常附着.最终导致染色体分裂异常.因此 HCMV感染造成cd消失很可能是HCMV感染引起自 然流产,死胎甚至胎儿先天畸形的一个重要原因. cd变异表现为Cd区变小.这种变化会导致纺锤丝微 管与Cd连接的数量减少.从而影响其连接的稳定 性,引起染色体移动的滞后或延迟,使部分染色体 丢失或不分离.经统计学分析.Cd变异频率感染组 与非感染组比较有极显着的差异,表明HCMV感染 引起Cd变异频率的变化程度高于Cd消失频率,即 HCMV感染对Cd的影响表现出Cd严重受损的比例较 低.轻度受损的比例较高的特点. 由此可见,HCMV感染是引起Cd异常的一个重 要原因,Cd异常又可导致染色体数目异常.引起 胚胎发育异常或出生缺陷.目前,对感染HcMV孕 妇的胎儿宫内感染的临床诊断尚有一定难度.而通 过绒毛或胎儿染色体Cd分析,可以评价尚未发生 染色体异常胚胎今后发育过程中可能受累的程度和 风险.因此对于早期产前诊断中发现HCMV感染的 孕妇的胚胎,辅以染色体cd分析,对防止出生缺陷 和优生优育具有一定的临床意义和重要的参考价 值. 参考文献 [1】Stag~S,PassRF,Dwo,~cyME,c.ta1.Congeraal cytomegaloviusinfection:therelativeimportanceofprimaryand un伽maternalinfectionL玎.NEI1g1JM.d,1982;306:945 【2】PlutaAF.M~kayAAinsztcinAM,eca1.The ccBtl~l~l~:hubofchromosomalactivities[J].Scieaze,1995; 270:l591 [3】付群-闰玉梅.自然流产妇女人巨细胞病毒感染的调 查【J】.实用妇科杂志,1999;15(1):41-42 【4】翁亚光,王应雄,刘学庆.等.自然流产次数与染色体 着丝粒点变化程度关系探讨L玎.中国优生与遗传杂志, 19983):40.--41 [5】BaldevVigandKeithL_Sterne&Cmaomo-~without klaetochoreprt~einsanothermcchaaismfororiginofam't~loidy inneoplasia啊.C?GermC~gmct,1991;51:269