深圳正常人糖化血红蛋白测定参考范围的建立

深圳正常人糖化血红蛋白测定参考范围的建立 深圳正常人糖化血红蛋白测定参考范围的 建立 现代检验医学杂志第23卷第2期2008年3月JModLabMed,Vo1.23,No.2,Mar.2008105 深圳正常人糖化血红蛋白测定参考范围的建立 李卫宁,夏勇,杨会林,陈娟,张毅,邓玉奎(北京大学深圳医院检验科,广东深圳518036) 摘要:目的探讨深圳正常人群糖化血红蛋白(HbAle)的参考范围.方法使用日本T0S0H公司HLC一723G7全自动 糖化血红蛋白分析仪检测202名健康体检者的糖化血红蛋白,并同时进行肝功能,血糖,血脂,血常规测定.HbAlc正常参 考值按士1.96s计算.结果HbAlc呈正态分布,不同性别HbAlc的分布未发现明显差异(,=1.443,P一0.152);不同年 龄分组HbAlc的均值存在显着性差异(P一0.043,<0.05),以60Y为分界年龄;HbAle的参考值为:<60Y参考值为4. 35%,5.58,>60y参考值为4.92,5.73;HbAlc与空腹血糖水平(r=0.294,P=0.003) 和年龄(r:0.382,P<0. 001)均相关.结论HbAlc的水平存在年龄差异,不同实验室需要建立各自的参考值. 关键词:糖化血红蛋白;参考值范围;高压液相层析法 中图分类号:R373.13;R446.112文献标志码:A 糖化血红蛋白(HbAlc)是血液葡萄糖通过非 酶作用,经细胞膜与红细胞内血红蛋白f}_链缬氨酸 结合形成的产物,它的形成程度取决于两个因素, 一 为体内葡萄糖浓度,一为血糖持续时间,且与两 者直接成比例[1].蛋白非酶糖化改变了蛋白质的结 构,功能与其代谢,产生自由基,造成组织和血管的 损害,成为糖尿病的眼,心,肾,神经等并发症发生 的重要机制之一.由于HbAlc水平能够较敏感地 反映糖尿病患者体内蛋白非酶糖化的程度,对其定 期检测有助于了解糖尿病患者血糖控制好坏及评 估高血糖导致微血管病变的发生,进展. 近年来,由于HbAlc检测方法的改进及标准 化的推行,高压液相层析法(HPLC)由于其稳定性 好而在临床检测中逐渐得到应用,美国临床化学协 会(AACC)糖化血红蛋白标准化分会和IFCC HbAlc标准化工作组,以DCCT研究中所"指 定的方法"一HPLC方法作为检测HbAlc糖化血红 蛋白的金标准.欧美国家实验室已经建立了自己的 参考值并对其年龄和性别等影响因素进行了探讨, 日本的糖尿病学会也做了其正常参考范围的研究, 目前国内尚未见HbAlc参考值的报告,为此,笔者 对202名健康成年人进行了HbAlc的测定,现报 道如下. 1材料与方法 1.1研究对象202名血标本来源于北京大学深 圳医院体检中心健康体检者,其中男108名,女94 名,年龄20,74Y,血压,心率生理指标,肝功能,血 糖,血脂,血常规等实验室检查均正常.心电图,胸 透,B超无阳性发现,排除糖尿病,肝,肾,心血管疾 病病史. 1.2实验方法采受试者清晨空腹肘静脉血5 m1于无抗凝剂的真空采血管中,30rain内离心(3 000r/min,10min),测定肝肾功能,血糖,血脂.2 ml于EDTA—K抗凝剂的真空采血管中测定血常 文章编号:1671—7414(2008)02—105—02 规和HbAlc.HbAlc使用日本T0SOH公司HLC, 723G7全自动糖化血红蛋白分析仪,并使用配套 的校准品和质控品;肝肾功能,血糖,血脂使用 OlymplusAU1000检测,血常规采用SysmexXT一 1800i全自动血细胞分析仪,几台仪器均有稳定的 室内质量控制和良好的室间质评作为准确度的保 证. 1.3统计学分析运用SPSS10.0统计学软件对 数据进行分析,采用KolmogorovSmirnovD统计 量检验HbAlc的正态性分布;不同性别组间均值 比较用成组样本t检验,两组以上均值比较用单因 素方差分析,并用S,N—K法进行两两比较;相关分 析用双变量Pearson相关分析;P<0.05有统计学 意义. 2结果 2.1研究对象HbAlc总体分布规律202名健 康体检者,HbAlc的分布符合正态分布(尸<0. 01);其均值为4.98,标准差为0.37,以超过? 3s为极端值剔除的标准,分别剔除HbAlc为6. 40和3.70的2个极端值样本(均为男性健康 体检者).剔除HbAlc的2个极端值样本后,总共 200健康体检者,其中男106名,女94名,年龄20 ,74Y,HbAlc呈正态分布(尸<0.01);测量最大 值为5.80,最小值为4.30,HbAlc的均值为 4.98%,标准差为0.32. 2.2不同性别及年龄组HbAlc分布特点按男 女性别及每20Y一个年龄组分别统计,HbAlc的 分布特征见1.不同性别HbAlc的分布未发现 明显差异(f一1.443,P一0.152);3个年龄组之间 HbAlc均值进行比较,结果表明不同年龄分组 HbAlc的均值存在显着性差异(尸=0.043,<0. 05).20~39年龄组与40~59年龄组HbAlc的均 值无明显差异(尸一0.261,>0.05),但与60,79 年龄组存在显着性差异(尸:0.02,d0.05). 作者简介:李卫宁(1959,),女,中专.主管检验师,主要从事临床生化诊断及实验研 究. 1O6现代检验医学杂志第23卷第2期2008年3月 JModLabMed,Vo1.23,No.2,Mar.2008 结合本试验HbAlc的年龄性别分布特点及 世界卫生组织对老年人的定义,笔者以60Y为年 龄分界,以?1.96s为参考值范围,制定了本实验 室不同年龄组别的参考值范围:<60Y参考值为 4.35,5.58;>60Y参考值为4.92,5. 73. 表l不同性别及年龄组HbAlc分布特征(0A) 注:*本年龄组与6O,79y年龄组比较Pd0.05. 2.3HbAlc与空腹血糖的相关性分析对200 名受试者HbAlc的水平与空腹血糖及年龄(20, 79y)进行直线相关分析,结果显示HbAc与空腹 血糖水平(r一0.294,P一0.003)及年龄(r一0. 382,Pd0.001)均呈正相关. 3讨论近年,糖尿病的发病率迅速增加,全国发 病率已达2.5,估计已有4000万以上糖尿病患 者,由于早期诊断率不高,估计尚有6O左右的患 者未获得诊断.即使已诊断的糖尿病患者,因血糖 监测不力,血糖控制也不佳,造成各种糖尿病慢性 并发症的发生率甚高.因此,当前必须重视对糖尿 病的早期诊断,血糖监测及其各种慢性并发症的实 验室监测指标的普及和应用,才能有效及时地控制 糖尿病及其慢性并发症的发生和严重度]. 1996年4月起在日本HbAlc被纳入老年人 保健法中糖尿病筛选的检查项目[3].2002年美国 糖尿病协会(ADA)已将其作为监测糖尿病血糖控 制的金标准,用来反映5,8w血糖的平均水平.对 其应用也做出了明确的规定:即所有糖尿病患者均 应常规测定HbAlc.其初诊时测定结果为基线时 的代谢状况,此后的测定值则作为糖尿病长期治疗 控制中的一部分. 检测HbAlc的方法有很多种,包括比色法,电 泳法,电聚焦法,手工微柱法,高压液相层析法,亲 和层析法等.采用不同的检测方法,同一标本得到 的测定值也不相同.这就涉及到一个常述的标准化 问题,此外HbAlc的定义不统一,其标准物质及标 准测定法也没有明确的确立.本研究运用的G7糖 化血红蛋白分析仪采用的是非多孔阳离子交换柱 的HPLC法,它通过3种不同浓度的缓冲液,能够 分离和测定血红蛋白中包括HbAlc在内的6种组 分,是目前较好的按照美国国家糖化血红蛋白标准 化(NGSP)推荐的DCCT方法进行标准化的 方法. 在本次调查中的人选对象均为空腹血糖水平 ?6.10mmol/L,且排除了血液病及明显肝肾功能 异常的健康体检者,但分析结果显示受试者中仍有 2名超过?3s的极端值,剔除极端值前后HbAlc 均呈明显的正态分布.剔除极端值后,结果显示不 同性别HbAlc的水平男性弱高于女性,但未发现 明显差异,可见HbAlc的水平与性别无关.调查结 果还显示不同年龄分组HbAlc的均值存在显着性 差异(尸=0.043),HbAlc水平随着年龄的增大而 升高,这种变化在2O,39Y和4O,59Y两个年龄 组别并不显着,但对于60Y以上的老年人组,这种 趋势尤为明显.因而笔者以60Y为年龄分界,制定 了本实验室不同年龄组别的参考值范围:<60Y, 参考值为4.35,5.58;>60Y,参考值为4. 92,5.73%.而该仪器生产商仅仅给出不分年龄 的一个建议的参考值水平4.o0,6.50,如果 遵循生产商的建议,会大大降低诊断的灵敏度,使 HbAlc作为血糖的监测达不到理想的水平,因而 不同实验室需要建立各自的参考值.在本调查中, 由于>6OY以上的样本例数仅为24例,样品量较 少,范围较窄,仍需进一步扩大该年龄组别调查样 品量,方更能代表该年龄组水平. 红细胞的平均寿命为120d,在红细胞存活的 过程中,血中葡萄糖浓度会有或多或少的波动,红 细胞越接近死亡,其血红蛋白与葡萄糖的接触时间 也就越长,即HbAlc含量就越高.在红细胞平均寿 命(120d)一半时段中所测得的平均血糖值与 HbAlc最吻合,所以HbAlc值能反映过去1,2 mo间的平均血糖值.但关于血糖的某一时点,或 某一时段与HbAlc相关性最佳的认识并未得到统 一 .DCCT资料L4中列举了HbAlc值与各时期(血 糖均值,上午餐前,上午餐后,午餐前,午餐后,晚餐 前,晚餐后,睡前)血糖值之间的发生和发展关系. 本调查结果表明:HbAlc与空腹血糖水平呈正相 关(r一0.294,P一0.003).关于HbAlc和血糖的 关系仍然是临床上所存在的争论点. 参考文献: [a3朱禧星.现代糖尿病学[M3.上海:复旦大学出版社, 2000:301. [2]罗敏.重视糖尿病实验诊断指标的化应用[J]. 诊断学理论与实践,2003,2(2):89—92. [33后藤由夫.老人保险法手册.关于糖尿病检查[M].东 京:日本医事新报,1996:78 E43王笠,李琳,王达,等.糖化血红蛋白的检测和 临床应用[J].上海医学检验杂志,2003,18(2):119一 收稿日期:2007.05—22