白细胞分类计数
一、血片制作:
(1)良好涂片标准:
,) 呈头、体、尾舌形
,) 血膜厚薄适宜
,) 两边留有空隙
二、染色
(1)染色方法:
1、在新鲜干燥玻片上,加瑞氏一液半滴管(以可以覆盖血膜为准),放置10,后,再加缓冲液1-2滴管(以可以覆盖染液为准),轻轻吹匀,染色20min。
2、流水冲洗后,将背景擦干净,待干,镜检。
(2)染色结果判断:
1)正常:外观呈粉红色;镜下红细胞染粉红色,可见有碟状感白细胞浆中的颗粒能显
示各种细胞的特有色彩;核染紫红色,染色质清楚,粗细松紧可辨。
2)偏酸:红细胞和嗜酸性颗粒偏红,白细胞核呈浅兰色或不着色。太酸则只见一片红染,白细胞除嗜酸性颗粒外,均不着色。
3)偏碱:细胞呈灰兰色,白细胞颗粒深暗,嗜酸性颗粒变成暗褐色,甚至黑色。中性颗粒也偏粗偏碱(紫黑色),血片过厚的地方呈绿色。
三、分类方法:
(1)低倍镜观察:选择细胞分布均匀、染色好的部位 转油镜下计数100,200 个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。
(2)细胞分布:
头体部以淋巴细胞较多
尾部和两侧以中性粒、单核细胞较多,片尾部,异常、大的细胞较
多
一般选择片头至片尾的2/3 区域计数较好,即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野。
【注意事项】
(1)未干透血膜,染色时易脱落,故血膜应干透再染色。
(2)冲洗前,先在低倍镜下观察有核细胞是否着色,否则适当延长染色时间 。
(3)染液不能过少,以防 蒸发,染料沉着在血膜上不易冲掉,影响观察。
(4)以流水冲去染液,防染料沉着。
(5)染色应注意保存血片尾部,不能用蜡笔划去,因体积大的细胞常在此出现。
(6)有时病人白细胞极少(一张片<100 个WBC),可数50个细胞,再算出百分数,同时应注明,或数2 张片子,并注明。
(7)发现幼稚或异常白细胞,应分类报告,包括在分类百分率中。
(8)如遇到不能确认的细胞,应另列入分类不明一项,如实报告,并保留血片。
(9)发现有核红细胞,应报告分类100个白细胞所见有核红细胞数。
(10)按一定顺序移动视野 。
(11)白细胞总数×各种白细胞的百分率,即得各种白细胞的绝对值。 【参考值】
嗜中性杆状核粒细胞(Nst) 1,,5,
嗜中性分叶核粒细胞(Nsg) 50,,70,
嗜酸性粒细胞(E) 0.5,,5,
嗜碱性粒细胞(B) 0,,1,
淋巴细胞(L) 成人:20,,45,
儿童:30%,56%
单核细胞(M) 成人:2,,6,
儿童:2,,8,