黄金咽喉片中柠檬酸的薄层鉴别及含量测定

黄金咽喉片中柠檬酸的薄层鉴别及含量测定 黄金咽喉片中柠檬酸的薄层鉴别及含量测定 作者: 何兵，冯文宇，田吉，李春红，艾洪兵【摘要】 目的建立黄金咽喉片中柠檬酸的薄层鉴别及含量测定方法。方法采用薄层色谱法对柠檬酸进行定性鉴别，并采用高效液相色谱(HPLC)法测定柠檬酸的含量，色谱柱为: Dikma Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相为，乙腈-0.1,磷酸 0.1,三乙胺溶液(1?99);检测波长: 210 nm;柱温: 25 ?;流速: 0.6 ml?min-1;进样量: 10 μl 。 结果在薄层层析色谱中能检出柠檬酸，柠檬酸在 1.04,10.4 μg范围内具有良好的线性关系(r,0.999 9)，平均回收率为98.85,，RSD 为0.37,。结论该方法简便、快速、有效、灵敏、准确，具有良好的重复性和回收率，可作为该制剂中柠檬酸的定性与定量分析方法。 【关键词】 黄金咽喉片 柠檬酸 薄层鉴别 Abstract: ObjectiveTo establish the method for the TLC identification and content determination of citric acid in Huangjin Yanhou Tablet(MethodsCitric acid in Huangjin Yanhou Tablet was identified by TLC, and the content of citric acid was detected by HPLC(The separation was carried out on a Dikma Kromasil C18 column(250 mm×4.6mm，5 μm)(The mobile phase was acetonitrile-0.1% phosphoric acid 0.1% triethylamine solution(1?99). The detection wavelength was set at 210 nm，the column temperature was 25?，the flow rate was 0.6 ml?min-1 and the sample size was 10 μl(ResultsCitric acid could be detected by TLC， the calibration curve showed good linearity over the range of 1.04-10.4 μg(r,0.999 9). The average recovery was 98.85, with RSD 0.37,。ConclusionThis method is simple，rapid，efficient，sensitive，accurate and with good repeatability and recovery，it can be used as a quantitative analysis method for this preparation( Key words: Huangjin Yanhou Tablet; Citric acid; TLC identification 黄金咽喉片是由青蒿(黄花蒿)、金银花、乌梅、青果、甘草和薄荷 6 味中药提取的有效部位及有效成分组成的复方制剂，具有芳香透邪、清热解毒、生津润燥、利咽止痛等功效。临床上主要用于治疗急慢性咽炎、喉炎、扁桃体炎、口腔黏膜溃疡;亦可辅佐治疗细菌或病毒感染的其他呼吸道疾病。柠檬酸为乌梅中的主要活性成分，为完善其质量控制，本文采用薄层色谱法对乌梅中所含的主要成分柠檬酸进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法对其进行定量测定。 1 仪器与试药1 仪器戴安高效液相色谱仪(P680A四元低压梯度泵，PDA-100二极管阵列检测器，TCC-100柱温箱，Chromeleon色谱工作站);瑞士Precisa电子天平(XR 205SM-DR);CQX25-06超声波清洗器(上海必能信超声有限公司，功率250 W，频率25 kHz)，硅胶G薄层预制板(青岛海洋化工厂)。2 对照品柠檬 酸(111679-201701)，中国药品生物制品检定所提供。在选定色谱条件分离后,未见其他杂质峰，含量以100 %计。3 试药乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。4 样品黄金咽喉片及阴性对照样品，泸州医学院药学院药物研究所提供，规格每片0.5 g，批号 051212，051213，051214。 2 方法与结果 2.1 薄层鉴别 2. 1.1 试液的制备 对照品溶液: 取柠檬酸对照品，加醋酸乙酯制成浓度为2 mg?ml-1 的溶液，作为柠檬酸对照品溶液。 供试品溶液: 取本品 2 片，研细，加入酸性醋酸乙酯溶液(醋酸乙酯-甲酸=95?5)20 ml，超声处理15 min ，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2 ml 使溶解，即得。同法制得3批样品的供试品溶液。 阴性对照液: 取按处方比例及制备工艺制得缺乌梅提取物的阴性对照样品，按供试品溶液制备项下方法制成阴性对照溶液。 2. 1.2 薄层层析照薄层色谱法,1,试验，吸取上述溶液各6 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醚-甲醇-甲酸-水(30?4?4?1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.1,的溴酚蓝乙醇溶液，置日光下检视。供试品色谱中，蓝紫色背景下，在与柠檬酸对照品色谱相应的位置上，显相同黄色的斑点，阴性对照无此斑点。结果见图1。 2.2 含量测定 2.2.1 色谱条件 色谱柱为Dikma Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相为乙腈-0.1,磷酸0.1,三乙胺溶液(1?99);检测波长 210 nm;柱温 25 ?;流速 0.6 ml?min-1;进样量10 μl。 2.2.2 试液的制备对照品溶液: 取经五氧化二磷减压干燥至恒重的柠檬酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加水制成每毫升含柠檬酸0.5 mg的溶液，即得。 供试品溶液: 取重量差异项下的本品20片，精密称定，研细，取约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50 ml，称定重量，超声处理30 min，取出，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。 阴性对照溶液: 取按处方比例及制备工艺制得不含乌梅提取物的阴性对照样品，按供试品溶液制备项下方法制成阴性对照溶液。