蛇胆川贝液薄层鉴别图谱及含量测定方法学验证

蛇胆川贝液薄层鉴别图谱及含量测定方法学验证 蛇胆川贝液(质量草案) Shedan Chuanbei Ye 【处方】 蛇胆汁 10g 平贝母 75g 【制法】 以上四味，取平贝母，加80,乙醇加热回流提取，提取液滤过，滤液浓缩成流浸膏;另取蔗糖560g和蜂蜜80g，制成糖浆，加入蛇胆汁、平贝母流浸膏和杏仁水30ml及薄荷脑0.08g和防腐剂适量，混匀，加水使成1000ml，即得。 【性状】 本品为浅黄色至浅黄棕色的澄清液体;味甜、微苦，有凉喉感。 【鉴别】 (1)取本品40ml,用10,氢氧化钠溶液调节pH值至l2以上，用三氯甲烷振摇提取2次，每次25ml，调节水溶液的PH值至2，用水饱和的正丁醇强力振摇提取3次(20、20、lOm1)，合并正丁醇液，用水洗涤2次(20、15m1)，分取正丁醇液，置水浴蒸干，残渣加无水乙醇4ml使溶解，作为供试品溶液。另取蛇胆汁对照药材适量，加乙醇制每1ml含5mg的溶液，作为对照药材溶液。再取牛磺胆酸钠对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录? B)试验，吸取上述三种溶液各1,5μl，分别点于同一Merck硅胶G高效板中，以乙酸乙酯-冰乙酸-甲醇-水(13:1.5:3:1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105?中加热5分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点;在与对照药材色谱相应的位置上，显三个或三个以上相同颜色的荧光斑点且牛磺胆酸钠斑点下方应显两个相同颜色的荧光斑点。 (2)取本品20ml，通过D型大孔吸附树脂柱 (内径为1.5cm，柱高为10cm)，用水50ml洗脱，101 弃去洗脱液。再用30,乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取平贝母对照药材1.5g，加甲醇30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(附录? B)试验，吸取供试品溶液10,20μl、对照药材溶液5,10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(6:10:4:1)为展开剂，展开，展距约13cm，取出，晾干，喷以磷酸-高氯酸-乙酸酐(5:20:1)的混合溶液，在105?加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显两个或两个以上相同的黄至黄绿色荧光斑点。 【检查】 相对密度 应为1.21,1.25(25?)(附录VII A)。 pH值 应为3.5,5.5(附录? G)。 其他 应符合糖浆剂项下有关的各项规定(附录I J)。 【含量测定】 杏仁腈 精密量取本品150ml，置500m1凯氏烧瓶中，加水100m1，连接冷凝管，通水蒸气蒸馏。馏出液导入10ml的90,乙醇溶液中，将接收瓶置冰浴中冷却，至馏出液全量达150m1时停止蒸馏，在馏出液中加入碘化钾试液与氨试液各2m1，以硝酸银滴定液(0.01mol,L)缓缓滴定至溶液中所产生的黄白色浑浊不消失时止，将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml硝酸银滴定液(0.01mol,L)相当于0.5405mg的HCN。 本品每支含杏仁腈以氢氰酸(HCN)计，应为0.1,0.3mg。 牛磺胆酸 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录? D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.4%磷酸溶液(30?70)为流动相;检测波长为203nm。理论板数以牛磺胆酸峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备 取牛磺胆酸钠对照品适量，精密称定，加甲醇溶解制成每1ml含牛磺胆酸钠0.35mg的溶液，即得(牛磺胆酸重量,牛磺胆酸钠重量/1.0426)。 供试品溶液的制备 精密量取装量差异项下的本品20ml，用乙醚振摇提取2次(20ml，15ml)，水液备用，合并乙醚液，用水洗涤2次，每次5ml，分别分取水液，与备用水液合并，置水浴上蒸至无乙醚味，通过D101型大孔树脂上(内径为1.5cm，柱高为10cm)，用水200ml洗脱，弃去水液，再用乙醇60ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 精密吸取对照品溶液10μl，供试品溶液10,20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每1ml含蛇胆汁以牛磺胆酸(CHNOS)计，不得少于70μg。 26457 【功能与主治】 祛风止咳，除痰散结。用于风热咳嗽，痰多气喘，胸闷，咳痰不爽或久咳不止。 【用法与用量】 口服。一次10ml，一日2次，小儿酌减。 【规格】 每支10ml 【贮藏】 密封，置阴凉处。 【有效期】 一年半。 1