尿畅舒胶囊质量标准研究

尿畅舒胶囊质量标准研究 2008年6月 第30卷第6期 中成药 ChineseTraditionalPatentMedicine June2008 V01.30No.6 值,计算妇女养血丸中丹酚酸B的含量.见2. 表23批样品测定结果(n=3) 3讨论 3.1本实验建立的薄层色谱方法专属性较强,重现 性较好,灵敏度较高,可作为该制剂的定性依据. 3.2我们在含量测定试验中考察了采用75%甲醇 超声提取,75%甲醇加热回流,甲醇超声提取及 0.1mol/L盐酸超声提取4种方法对样品中丹酚 酸B的提取效果,结果用75%甲醇加热回流测得样 品中丹酚酸B含量最高且加热回流提取1h即可提 尿畅舒胶囊质量标准研究 盛蓉,王江林,呼梅,张永华,刘宁 (成都中医药大学附属医院,四川成都610072) 取完全.故本实验采用75%甲醇加热回流1h的提 取方法. 参考文献: [1]WS一B一1934~5,卫生部药品标准(中药成方制剂第十册)[s]. [2]中国药典2005年版一部[s].2005:89,181,59,52. [3]王怀明,孙启文,曲桂武,等.丹参药材中丹参酮?A和丹酚酸 B的HPLC法测定[J].中国药师,2005,8(6):472474. [4]刘海清,吕东,陈岳蓉,等.全国中药材市场商品丹参中4种 丹参酮成分的HPLC法测定[J].药物分析杂志,2005,25(2): 229—232. [5]肖风霞,王风云,符惠燕.高效液相色谱法测定益心片中阿魏 酸和丹酚酸B的含量[J].广州中医药大学学报,2005,22(4): 304—306. 关键词:尿畅舒胶囊;质量标准;葛根素;TLC;HPLC 摘要:目的:建立尿畅舒胶囊的质量标准.方法:用薄层色谱法鉴别处方中的粉葛,三七和黄芪;用高效液相色谱法测定 粉葛中葛根素的含量.葛根素的含量测定采用C色谱柱(4.6nlnl×150mm,5m),流动相为甲醇一水(25:75),检测波 长:250Dnl,流速:0.8mL/min,柱温:25?.结果:薄层色谱鉴别特征斑点明显.含量测定中葛根素进样量在0.0848, 1.2720g的范围内呈良好的线性关系,R=1.0000.平均加样回收率为 102.03%,RSD=1,59%.结论:所建立的薄层 色谱鉴别和含量测定方法专属性强,重复性好,可用于尿畅舒胶囊的质量控制. 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1001—1528(2008)064)8754)3 尿畅舒胶囊是由粉葛,三七,黄芪等5味组成的 中药制剂.具有益气补肾,活血通淋的功效.用于 绝经后女性雌激素水平下降所致的尿道综合征,症 见尿频,尿急,尿道灼热疼痛,排尿不畅,小腹隐痛不 适等.方中粉葛为君药,主要有效成分为葛根素,其 含量测定方法’有高效液相色谱法和薄层色谱扫 描法.《中国药典}2005年版一部采用高效液相色 谱法测定粉葛药材中葛根素的含量.尿畅舒胶囊为 我院泌尿外科经验方,经改剂而成,为了对本品进行 更好的质量控制,本实验除了建立粉葛,三七,黄芪 的薄层鉴别方法外,还建立了本品中粉葛药材 葛根素的高效液相色谱测定法],试验结果表明, 所建立的方法可靠,准确,专属性强. 1仪器与试药 1.1仪器HP一1100型高效液相色谱仪.色谱柱: 依利特C(4.6mm×150mm,5m),塞多利斯 BP211D1/10万电子分析天平(德国Sartorius公 司). 1.2对照品与对照药材葛根素对照品(供含量 测定),人参皂苷Rgl,人参皂苷Re,三七皂苷R1, 收稿日期:2007~8—10 基金项目:四川省教育厅资助课题(2003A041) 作者简介:盛蓉(1967,),女,副主任药师,硕士研究生,研究方向:中药制剂与新药 研发,电话:028—81997969,E-mml:sheng6710@126 西南交通大学生物学院2006级硕士研究生. 875 2008年6月 第3O卷第6期 中成药 ChineseTz.aditionaJPatentMedieine June20o8 V01.30No.6 人参皂苷Rbl,黄芪甲苷对照品,三七,黄芪对照药 材均由中国药品生物制品检定所提供.粉葛药材为 实验中所用药材. 1.3薄层层析用硅胶G(青岛海洋化工厂);甲醇 为色谱纯;水为双蒸水;其余试剂均为分析纯. 1.4尿畅舒胶囊样品批号:061105,061106, 061107(成都中医药大学附属医院药剂科提供). 2薄层鉴别 2.1粉葛的鉴别取本品内容物1g,加30%乙醇 20mL,超声提取30min,离心,取上清液水浴蒸干, 加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液.取粉葛药材 0.8g,加甲醇10mL,放置2h,滤过,滤液蒸干,残渣 加甲醇0.5mL使溶解,作为药材溶液.取不含粉葛 的阴性样品1g,同供试品溶液的制备方法制备阴性 对照溶液.另取葛根素对照品,加30%乙醇制成每 1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色 谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验, 吸取上述4种溶液各10,分别点于同一以0.2% 羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋 酸乙酯一丙酮一水一甲苯(13:11:2.4:1.4)的上层溶液 为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm) 下检视.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位 置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照无干扰,见 图1 ?图1粉葛的薄层色谱图 1.葛根素对照品2.粉葛药材3.空白对照4,6.不同批号供试品 2.2三七的鉴别取本品内容物1g,加甲醇15 mL,超声提取20min,滤过,滤液水浴蒸干,残渣加 水10mL使溶解,移至分液漏斗中,加15mL乙醚提 取,弃去乙醚层,母液挥尽乙醚,用水饱和的正丁醇 提取两次,每次20mL,合并正丁醇液,用水洗涤两 次,每次10mL,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇lmL使 溶解,作为供试品溶液.取三七对照药材1g,加水 5滴,搅匀,再加以水饱和的正丁醇5mL,密塞,振摇 10min,放置2h,离心,取上清液,加3倍量以正丁 醇饱和的水,摇匀,放置使分层,取正丁醇层,蒸干, 残渣加甲醇1mL使溶解,作为对照药材溶液.取不 876 含三七的阴性样品1g,同供试品溶液的制备方法制 备阴性对照溶液.另取人参皂苷Rg.,Re,Rb,三七 皂苷R.,加甲醇制成每1mL中各含1mg的混合溶 液,作为对照品溶液.照薄层色谱法(《中国药典》 2005版一部附录VIB)试验,吸取上述4种溶液各 10L,分别点于同一以0.2%羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上,以三氯甲烷一甲醇一水(13:7 :2)10cC以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取 出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,105cC加热至 斑点显色清晰,置日光下检示.供试品色谱中,在与 对照品色谱相应的位置上,显相同的紫红色斑点,阴 性对照无干扰,见图2. 图2三七的薄层色谱图 1.人参皂苷I,Re,RbI,三七皂苷RI对照品2.三七对照药材 3.空白对照4,6.不同批号供试品 2.3黄芪的鉴别取本品内容物6g,加甲醇20 mL超声提取10min,滤过,滤液挥干,残渣加水20 mL溶解,用水饱和的正丁醇萃取3次,每次20mL, 合并正丁醇液,用氨试液25mL洗涤1次,弃去氨试 液,正丁醇液挥干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供 试品溶液.取黄芪对照药材3g,加甲醇30mL,回 流提取1h,余下同供试品溶液制备方法制备对照药 材溶液.取不含黄芪的阴性样品6g,同供试品溶液 的制备方法制备阴性对照溶液.另取黄芪甲苷对照 品,加甲醇制成每1mL含1mg的对照品溶液.照 薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录rIB)试 验,吸取上述4种溶液,分别点于同一以0.2%羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以三氯甲 烷一醋酸乙酯一甲醇一水(10:20:11:5)为展开剂,展 开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,105?加 热至斑点显色清晰,置日光下检示.供试品色谱中, 在与对照品及对照药材色谱相应的位置上,显相同 颜色的斑点,见图3. 3含量测定 3.1对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品 2.12mg,置25mL量瓶中,加30%乙醇溶解并稀释 至刻度,摇匀,即得(0.0848mg/mL). 2008年6月 第30卷第6期 中成药 ChineseTraditionalPatentMedicine June2008 Vo1.30No.6 图3黄芪的薄层色谱图 1.黄芪甲苷对照品2.黄芪对照药材3.空白对照4,6.供试品 3.2供试品溶液的制备取本品内容物约0.25g, 精密称定,置25mL量瓶中,加30%乙醇20mL,超 声提取15min,放至室温,加30%乙醇补足至刻度, 摇匀,离心,上清液微孔滤膜(0.45m)滤过,取续 滤液作为供试品溶液. 3.3阴性样品溶液的制备取缺粉葛的阴性样品 约0.25g,精密称定,置25mL量瓶中,余下同”3.2 项供试品溶液的制备”,得阴性样品溶液. 3.4色谱条件色谱柱:依利特C(4.6IIlII1×150 IllII1,5m);流动相:甲醇一水(25:75);流速:0.8 mL/min:检测波长:250nnl;柱温:25c(=;理论塔板数 按葛根素峰计应不低于4000. 3.5线性关系考察精密吸取葛根素对照品溶液 (0.0848rag/mL)1,3,5,10,15L,分别进样,按上 述色谱条件测定峰面积,并以峰面积积分值为纵坐 标,进样量为横坐标,计算回归方程,得回归方程y =4247.5556X+0.272148.r=1.00000.结果表 明,葛根素含量在0.0848至1.2720g的范围内, 葛根素峰面积值与进样量呈良好的线性关系. 3.6阴性干扰的考察分别取葛根素对照品,阴性 样品溶液,供试品溶液各10进样,记录色谱图, 由色谱图可知,在对照品溶液相同的保留时间,供试 品溶液有相同的峰,而阴性样品溶液无峰,说明在此 条件下,阴性样品溶液没有干扰,见图4. mAU 250 200 150 lO0 50 O 图4葛根素对照品,阴性样品,供试品高效液相色谱图 A葛根素对照品B阴性样品C供试品1葛根素 3.7精密度实验精密吸取样品溶液10,按上 述色谱条件,重复进样6次,测定每次进样峰面积 值,结果葛根素峰面积的RSD=0.08%(n=6),精 密度良好. 3.8稳定性实验取供试品溶液于0,2,4,6,8,10 h分别进样10,测定样品中葛根素的峰面积值, 结果葛根素峰面积的RSD=0.52%(n=6),表明供 试品溶液在10h内基本稳定. 3.9重复性实验取同一样品5份,按前述方法制 备供试品溶液,分别进样10,测定峰面积值,计 算含量及相对标准偏差,结果葛根素含量的RSD= 1.6%(n=5),相对标准偏差小于2.0%,重现性良 好. 3.10加样回收率试验取已知含量的样品约 0.125g(葛根素含量9.627mg/g),精密称定,共6 份,分别添加葛根素对照品溶液(1.4155rag/mL) 各1mL,按前述方法制备供试品溶液,测定,计算回 收率,结果见表1. 表1加样回收率实验 样品量样品中葛根对照品加实测葛根回收率平均回RSD /g素含量/mg入量/mg素含量/mg/%收率/%/% O.135O O.1359 O.1346 O.1283 0.1294 O.127O 2.713 2.734 2.735 2.712 2702 2.676 结果平均回收率为102.03%,回收率在95%, 105%之间,RSD值为1.59%,表明本法回收率良 好. 3.11样品测定取本品内容物约0.25g,共3批, 每批2份,精密称定,分别置25mL量瓶中,余下同 “3.3项下供试品溶液的制备”.分别精密吸取葛根 素对照品溶液,供试品溶液各10,按上述色谱条 件测定,结果见表2. 877 o0 n 6m / ,C 4 2 ?如.铷 ?如. 9 5 3 O 2 O 船 555555 555555甜甜甜甜甜 }} 738172 985552如 }} 2008年6月 第30卷第6期 中成药 ChineseTraditionalPatentMedieine June2008 Vo1.30No.6 表2样品中葛根素含量测定 3.12粉葛药材的含量测定取粉葛药材约0.8g, 精密称定,加30%乙醇50mL,称定重量,加热回流 30min,放至室温,用30%乙醇补足减失的重量,摇 匀,离心,取上清液微孔滤膜(0.45m)滤过,取续 滤液作为供试品溶液.分别精密吸取葛根素对照品 溶液,供试品溶液各10L,按上述色谱条件测定, 结果见表3. 表3药材测定结果(n=2) 批号含量/ing/g 药材1 药材2 药材3 3.68 657 5.74 4讨论 4.1在三七的薄层鉴别中,其对照品溶液由人参皂 苷Rg,,Re,Rb,,三七皂苷R混合而成,色谱图上对 照品应显现4个斑点.但本实验中考察了3种色谱 系统(含药典系统),在薄层展开时对环境进行了温 度以及湿度的控制,对照品,药材及样品对应处均只 有3个斑点.文献资料报道?_J,三七薄层色谱图在 药典及有关文献规定的色谱条件下,有3个斑点的 原因是人参皂苷Re与三七皂苷Rl不能分开,故只 有3个斑点,这也是本实验的不足之处. 4.2在含量测定中,分别对供试品制备中的提取溶 媒,提取方法和提取时间进行了考察.提取溶媒考 察中,分别采用10%,30%,50%,70%,90%的乙醇 以及无水甲醇和50%甲醇提取,结果表明采用30% 乙醇提取效果好.提取方法考察中分别采用了超 声,回流和冷浸提取,结果以超声,回流较好,因超声 提取简便,故采用超声的提取方法.提取时间考察 中,分别考察了提取l5,30,45,60,80min对葛根素 含量的影响,结果提取15min即可,故确定供试品 的制备方法为:加30%乙醇,超声提取15min. 4.3由样品及粉葛药材的含量测定可知,因粉葛药 材中葛根素含量差别较大,致样品中葛根素含量差 异较大,但粉葛药材中葛根素含量均符合2005版 《中国药典》一部”粉葛’’项下的规定(葛根素含量大 于0.3%),故应在生产中制订内部标准,控制粉葛 药材中葛根素含量,以保证样品疗效的稳定. 参考文献: .木竭胶囊中葛根素的含量测定[J].黑龙江医药, [1]谭黎明 2004,17(6):405407. [2]贾永艳,曹漫征,周继武,等.薄层扫描法测定头痛灵胶囊中葛 根素的含量[J],河南中医药学刊,2001,16(2):19—20. [3]中国药典2005年版一部[s].2005:10—11,203,233-234. [4]陈黎,郦宏岩,杨佩文.心安宁胶囊质量标准研究[J].江苏 药学与临床研究,2003,11(3):26—27. [5]南善姬,郑美善,韩映晨.扶胃平胶囊的薄层鉴别方法[J].药 物鉴定,2006,15(11):40. [6]曹妹芳,李世芳.复方补肾颗粒的质量标准研究[J.中成药, 2003,25(3):194. [7]中华人民共和国卫生部药典委员会.中药薄层色谱彩色图集 [Mj.广州:广东科技出版社,1993,20,69. 方面保障食品药品政府信息公开 国家药监局从5 国家食品药品监管局新闻发言人颜江瑛8日说,国家食品药品监管局将从5方面保障食品药品政府信息的公开. 首先是保障,制定网站,新闻发布制度等,保障政府信息发布. 二是机构保障,成立国家局政务公开工作领导小组办公室作为局政府信息公开工作机构. 三是发布平台保障,国家食品药品监督管理局网站是政府信息公开发布的第一平台,为促进政府信息公开,制定《网站政 府信息公开考评暂行办法》,定期对各司室负责的网站信息保障工作进行考核评价. 四是基础工作保障,编制了《国家食品药品监督管理局政府信息公开指南》和《国家食品药品监督管理局政府信息公开目 录》,方便公众依法获取政府信息. 五是新闻发布保障,建立新闻发布机制和新闻发言人制度,并根据发布需要实行专题新闻发布会,新闻通气会和即时新 闻发布等多种形式发布,实现政府信息快捷发布,畅通信息发布渠道. 颜江瑛介绍,国家食品药品监管局政府信息公开的内容主要包括:依据有关规定应当主动公开的政府信息;根据公民,法 人和其他组织申请提供的政府信息.主动公开的政府信息内容包括9大类:机构职能,人事信息,法规文件,公告通告,规划计 划,综合管理,基础数据,行政许可以及最新动态. 《中华人民共和国政府信息公开条例》已于2008年5月1日正式实施.(信息由新华社提供) 878