【doc】 牛初乳多肽的功能性研究

【doc】 牛初乳多肽的功能性研究 牛初乳多肽的功能性研究 wwwchinadairy.net rpgy@chinajournalnet.cn 中国乳品工业 dairyINDUSTRY 牛初乳多肽的功能性研究 秦兰霞,郑新民,王占东,焦发道,贾新庄. (1.哈尔滨工业大学食品学院,黑龙江哈尔滨150086; 2.黑龙江省完达山乳业股份有限公司,黑龙江哈尔滨150090;3.丹尼斯克(中国)有限公司,江苏苏州215300) 摘要:对牛初乳生物学功能进行了研究. 关键词:牛初乳;多肽;功能性 中图分类号:Q516文献标识码:A 结果明.牛初乳多肽具有显着的抗体力疲劳和增强免疫力的作用. 文章编号:1001—2230(2005l09—0014-03 Studyonthefunctionofbovinecolostrumspolypeptide QINLan—xia,ZHENGXin—min,WANGZhan—dong2,JIAOFa—dao,JIAXin—zhuang3 (1.HarbinInstituteofTechnologyFoodCollege,Harbin150086,China;2.He ilongjiangProvinceWondersunCo.,Ltd, Harbin150090;3.Danisco(China)Co.,Ltd,Suzhou215300,China) Abstract:Bovinecolostrumshashighconcentrationandvarioussortsprotein s.Howeversomepolypeptidesholdimportantbiologicfunction. Thispaperstudiesthebiologicfunctionandeducesthatbovinecolostrumspol ypeptideholdremarkablefunctionofresistingfatigueandboost— ingupimmunitythroughexpefimen~. Keywords:bovinecolostrums;polypeptide;function 0引言 初乳是一种非常特别的乳,它是所有雌性哺乳动 物产后2-3d内所分泌乳汁的总称,较普通的乳汁含有 更高的蛋白质l1I.目前,对其含有的具有生物活性的肽 段的研究越来越多,特别是降血压肽l2l,抗血栓肽,免 疫调节活性肽【.本文对其功能特性进行研究,得出 牛~-T’L多肽确实具有显着的功能特性. 1材料与方法 1.1初乳肽氨基酸的测定 (1)实验材料与设备:初乳肽;日立835--50型氨 基酸自动分析仪. (2)样品水解后氨基酸处理:样品预先溶解在浓 度为5.7mol/L的HC1中,经110oC,24h的热酸水解处 理 收稿日期:2005—08一侣 基金项目:黑龙江省杰出青年科学基金资助(J01—13). 作者简介:秦兰霞(1970一),女,在读博士研究生,研究方向为乳品新产 品开发. (3)样品游离氨基酸处理:以磺基水杨酸液将样 品稀释,高速离心(16000r/min,5min),吸收上清液 待测. (4)仪器分析条件:树脂代号2619,分离柱 2.6cmX150cm,缓冲液流速0.225nlL/min,柱压力80-- 130kg/cm,柱温53?,分析时间70min,图谱用日立 835仪绘制. 1.2抗疲劳实验 (1)样品处理:以水调成不同的剂量,本品人体 的推荐量为40mg/kg,本研究按低,中,高3个剂 量,R]1200,400,1200mg/kg,再加上空白组. (2)实验动物:昆明种小白鼠,雄性,18--22g. (3)仪器与试剂:动物天平,电子天平,离心机, 水浴锅,振荡器,722分光光度计,游泳箱(50cmX 50cmX40cm),铅皮,计时器,血色素吸管,加样器, 离心管.半自动生化分析仪,尿素氮测定试剂盒,蛋白 沉淀剂,1%的NaF,4%的CuSO,乳酸液(质量浓 度为0,01g/L),11.5%对羟基联苯,5%--~氯醋酸,葡 萄糖标准液(100mg/dL),72%的HSO,蒽酮试剂(含 0.05%的蒽酮,1%的硫脲,用72%的HSO配制) (4)实验方法:参照卫生部《保健食品检验与 4. ResearchPapers研究 评价技术规范》,功能学平加程序中缓解体力疲劳功 能部分. 取昆明种小白鼠40只,随机分为4组,每组10只, 按剂量连续喂养28d,于末次灌胃侯30min,将小 鼠放入水中游泳,水深30cm,水温(25?0.5)?,鼠尾根 部负荷5%体重的铅皮. 血清尿素氮测定采用二乙酰一肟法;肝糖原测定 采用蒽酮法:乳酸测定. 1.3免疫调节实验 (1)样品处理.初乳肽以水调制成不同的剂量, 人体推荐量为40mg/kg,分低,中,高3个剂量组,分别 为200,400,1200mg/kg,再加上空白实验. (2)实验动物.昆明种小白鼠,雄性,18,22g.随机 分组,每组13只.进行碳廓清.实验及动物肝/体比值 测定(免疫2组);半数溶血值(HC50)测定和抗体生成 细胞检测(免疫3组);ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转 化和NK细胞活性测定(免疫4组). (3)仪器与试剂.动物天平,分析天平,离心机. 显微镜,二氧化碳培养箱等,无菌手术器械,微量注射 器,24孔培养板等,绵羊红细胞,补体sA缓冲液,1640 培养液,小牛血清等. (4)实验方法.参见卫生部《保健食品检验与评 价技术规范》,功能学平加程序中缓解体力疲劳功能 部分. 2结果与分析 2.1初乳肽氨基酸的分析 初乳肽氨基酸的结果如表1所示. 表1初乳肽氨基酸的分析% 注:为人体必需氨基酸. 从表1中能够得出,蛋白质氨基酸组分与原牛初 乳的相一致,显示出具有很高的营养价值. 2.2抗疲劳实验结果 负重游泳实验结果如表2所示.从表2可以看出, 随着剂量的增加,小鼠负重游泳的时间延长,说明一 定剂量的初乳肽对小鼠负重游泳时间的延长有一定 的帮助作用. 表2样品对小鼠负重游泳时间的影响 肝糖元测定结果如表3所示.由表3可以看出,服 用初*L~30d,随着剂量的增加,肝糖元的含量明显增 加,均高于对照组.表明小鼠服用初乳肽后,能减少肝 糖元的消耗量. 表3样品对小鼠肝糖元的影响 血乳酸测定结果如表4所示.从表4可以看 出,对于实验前,血乳糖含量没有明显的变化,运动 后血乳酸的含量明显增加,运动后0min血乳酸的 含量高于运动后20min血乳酸的含量.说明运动 20rnjn后初-*L肽发挥了作用,对血乳酸的升高有明 显的抑制作用.而且随着剂量的增加抑制作用更加 明显 表4样品对小鼠运动后血乳酸的影响 2.3免疫调解作用实验 对小鼠迟发型变态型反应(DTH)的影响结果如 表5所示.由表5可以看出,经过注射后,初乳肽能够增 强小鼠迟发型变态反应.对小鼠抗体生成的影响如表 6所示.由表6能够得出,服用初乳肽后,从低剂量到高 剂量,空斑数明显增加.说明初乳肽能够提高小鼠抗 体生成细胞功能. Vol33.92005(tota,178)15 究报告ResearchPapers 表5对小鼠迟发型变态型反应(DTH)的影响结果 组别动物数/只空斑数(10脾细胞) 对小鼠碳廓清能力的影响如表7所示,由表7能够 得出,随着初乳肽剂量的增加,吞噬指数也逐渐增加, 说明初乳肽能增强小鼠的碳廓清能力. 表7对小鼠碳廓清能力的影响 xq4,鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响如表8 专业奥奇爱心科技 所示.由表8能够得出,随着初乳肽剂量的增加,吞噬 率和吞噬指数-rE明显的增加,表明初乳肽能够增羟小 鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能. 表8对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响 3结论 从小鼠的负重游泳实验,肝糖元和血乳酸的测定 结果.初乳肽确实增加了的小鼠抗疲劳作用.从小鼠 迟发型变态反应,抗体生成,碳廓清能力和腹腔巨噬 细胞吞噬鸡红细胞的影响,初乳肽确实增加了小鼠的 免疫调解作用. 参考文献 [1]曹劲松.初乳功能性食品[MI.北京:中国轻工业出版社,2000:1—2 【2】YAMANOTON,AKINOA,TAIC&NOTAntihypertensiveeffect ofpepfidesderivedfromcaseinbyanextraceUuarproteinasefromhc- tobaciUushelveticusCP790U1.DairyScience,1994,77:919—922. 【3】李妍,迟玉杰.初乳的免疫作用及免异牛初乳的开发研究进展U1.食 品研究与开发,2002,23(2). 【4】赵岩初乳素免疫调节作用….草食家畜,2001,112(2):55—57. 提供系列多不饱和脂肪酸: DHA,从微胶囊:DHA/1三pA一5/1,更接近母乳,更安全. EPA鱼油微胶囊:采用药品级原料多烯酸乙酯精制而成,适用于中老年食品的营养强化. 月见草油微胶囊:源至长白山月见草籽,富含一亚麻酸,适用于婴幼儿,女士食品的营养强化. DHA,从乳液:适合于湿法生产的配方奶粉,固体饮料,稳定安全,添加方便,更有成本优势. ?中国有影响力的原料鱼油供应商?DHA行业的倡导者 ?江苏省民营科技企业,国家科技创新基金支持企业 “ ~IS09001:2000标准认证企业(认证注册号:04303Q10614ROM) ?食品,药品GMP双认证企业(证书编号:苏F0166—2,苏GMP[2004】第033号) 畿攀_} . . ..黛’ 163fqt奈{苍焉if1