果蔬中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法 摘要 由于氨基甲酸酯类农药的诸多优点，使其在农业生产过程中得到广泛地应用。但其若进入人体可生成具有致癌作用的亚硝基化合物。所以在果蔬中其残留量的检测有非常重要的意义。只有测定其残留量在允许的范围内，我们的饮食安全才能得到保证。本文简单介绍了几种最常见的检测氨基甲酸酯类农药残留量的方法。 氨基甲酸酯类农药因其杀虫谱广、用药量少但药效快、持效期长、选择性高、低残留、低毒等优点在农业生产中得到广泛大量地应用。但若其进入人体，可生成具有致癌作用的亚硝基化合物，可抑制人体内胆碱酯酶，从而影响人体内神经冲动的传递。所以用正确的方法检测果蔬中氨基甲酸酯类农药的残留量非常重要。下面就分别论述几种最常用最高效的检测氨基甲酸酯类农药残留量的分析方法。简单介绍其原理和优缺点等内容。 高效液相色谱法 高效液相色谱法又称作高压液相色谱法，是近年来迅速发展起来的一项分离技术，应用于食品安全指标快速检测取得了良好效果。高效液相色谱法是在高压条件下溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换的过程。它借溶质在两相间分配系数“亲和力”吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差别使不同溶质得以分离。它可以分离检测极性强、分子量大及离子型农药，尤其对不易气化或受热易分解的化合物更能显示出它的突出优点。较常用的色谱柱有C8柱、c18柱、氨基柱、硅胶柱等，检测器有紫外检测器、荧光检测器等。一般来说，高效液相色谱法的检出限比气相色谱的要高。高效液相色谱法对于气相色谱法不能分析的高沸点或热不稳定的农药可以进行有效的分离检测?。 气相色谱法 氨基甲酸酯类农药在高温条件容易分解，这给用GC对氨基甲酸酯类农药残 留量进行测定带来了不便。在实际工作中，常常考虑将氨基甲酸酯类农药水解， 生成稳定的氨基甲酸酯类农药的水解产物一甲胺或酚，或通过衍生化反应提高氨 基甲酸酯类农药的热稳定性，从而实现用GC对氨基甲酸酯类农药的测定。若希 望将GC应用于氨基甲酸酯类农药残留量的测定，采用冷柱头进样(OCI)也是较 好的选择，这样可以较大限度地保证样品在进样过程中不分解。Grcgory等 采用毛细管GC、OCI进样技术和化学电离离子阱检测器，对植物组织中的西维 因、呋哺丹以及其他的农药进行了分析，获得了较好的结果。张艳等采用毛细 管GC-NPD测定了枸杞中有机磷和氨基甲酸酯类农药;?杨大进等采用毛细管 GC-NPD测定大米中6种氨基甲酸酯类农药，其准确度和精密度均较好?。虽然将氨基甲酸酯类农药衍生化后进行GC分析具有较高的稳定性，较好的分离效果和较高的灵敏度，但操作复杂，耗时长，具有局限性。 高效液相色谱法-分光检测 目前大多数NMCs的HPLC检测都是采用反相c18或c8柱，常用的流动相为甲醇-水或乙腈-水。甲醇-水具有较低的紫外截止点，比较便宜，但黏度大:乙腈-水的黏度仅为相应比例的甲醇-水混合物的一半，在较高流速下使用不会产生严重的反压，但价格较高且毒性大。在NMCs测定中，早期常用的检测手段就是紫外吸收。复杂基质中NMCs多残留分析常用的检测波长是254nm，而在分析测定克百威及其代谢产物残留时多采用280nm。样品经SFE处理后，再用LC-UV检测，结果优于GC-氢火焰离子化检测或HPLC-S-化学发光检测。近年采用二极管矩阵检测器，经用sFE净化后，测定马铃薯中涕灭威及其代谢产物，其检测限达15 u g,kg。近20年来，柱后水解和衍生后进行荧光检测复杂基质中NMCs的方法已经越来越普遍。这是一个两步系统，NMCs在90?下柱后水解生成甲胺，甲胺在有2-巯蒸乙醇存在的碱溶液中与邻苯醛酸反应，生成强烈的荧光物质。有人用该方法测定了26个样品中的24种NMCs，回收率为70,-100,。柱后衍生需在柱后安两个试剂运送泵，一个输送NaOH，另一个输送OPA,2-ME，并有可能产生混合和流动脉冲。此外流动相中分析物的稀释导致谱带扩展，为此，很多人做了改进工作，包括固相反应器、UV-发光反应器等。Simon等提出了一个以NaOH、邻苯醛磷和N，N-二甲 巯基乙胺盐酸盐作为一步柱后衍生反应系统。thiofluor的应用使得衍生此基-2- 样品比在其它溶剂系统中更稳定。 色谱与质谱连用检测技术 气相色谱一质谱(GC-MS)连用技术是将气相色谱仪和质谱仪串联起来，成为一个整机使用的分析检测技术。气相色谱仪是质谱法的理想“进样器”，质谱仪是气相色谱法的理想“检测器”。它既具有气相色谱的高分离性能，又具有质谱准确鉴定化台物结构的特点，可达到同时定性、定量检测的目的，多用于农药代谢物、降解物的检测和多残留检测。农残检测过程中，即使样品经过了净化，其本底对检测造成的干扰也是不容忽视的。仅依靠保留时间进行定性分析是很困难的，必须有质谱数据即化合物结构信息才能进行准确判断。欧盟和美国农残的确认必须要有质谱数据。气相色谱(质谱联用可对样品中不同种类的上百种农药残留同时进行快速定性以及定量，使得它在农残检测中显的尤其重要。 液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用法可用于易挥发、热不稳定、分子量较大、难以用气相色谱分析的化合物的检测。样品经过前处理，如称量、离心等处理后再用乙酸乙酯、丙酮、乙酸乙酯-正已烷、乙腈、乙醚-正已烷等作为提取液，采用涡旋和超声波等提取方法。接着用C18柱、中性氧化铝柱和活性炭柱净化再用甲醇、乙酸乙酯、乙酸乙酯-正已烷、甲醇-二氯甲烷、乙醚-正已烷等洗脱剂进行洗脱，最后进行标准曲线和方法的检测低限，根据各离子对的峰面积对浓度绘制标准曲线以得出结果。?它具有检测灵敏度高、选择性好、定性定量同时进行、结果可靠等优点。将液相色谱和质谱联接起来的是一种内喷射式和粒子流式接口技术。样品从HPLC出来不被破坏，使得HPLC和可以联用其它先进的结构鉴定技术，如HPLC-NMR(高效液相色谱-核磁共振)、HPLC—NMR-MS。后者检测灵敏度可以达到ng级，可以测定未知化合物的准确结构。由于LC-MS仪器价格昂贵，液相色谱 和质谱技术尚不十分成熟。 酶联免疫吸附技 酶联免疫吸附技术是基于抗原、抗体的免疫反应和酶的催化作用有机结合的一种分析检测技术。它的基本原理是首先将酶与抗体或抗原偶联，形成酶标记物;或将酶与酶的抗体结合起来，形成免疫复合物。然后用酶标记物或免疫复合物检测相应的抗原或抗体，使与酶标记物或免疫复合物反应的抗原或抗体带上酶标记，称之为免疫复合物。随后，加入标记酶的相应底物，酶会发挥催化作用，催化底物发生水解，产生可用仪器检测的信号，如颜色或荧光等，依据这些信号进行残留物的定性、定量分析。?ELISA法所需仪器设备简单，可同时检测几十个样品，检测结果快速、灵敏，检测成本低。此外，该方法还不需复杂的样品前处理步骤，液体食品，如牛奶、果汁、菜汁等经简单的前处理即可检测或不经前处理直接取样检测;固体食品，如谷物等需经抽提、浓缩等步骤，再重新溶于水溶液中，才可检测。ELISA法既可用来进行定性检测以判定残留量是否超标的，也可用来进行农药残留的定量分析，对有些农药的检测水平可达10r9甚至10。12克。正因为ELISA法具有如此多的优点，相对复杂且昂贵的仪器分析来说，更适合于实地应用检测。自ELISA开始应用于食品农药残留检测以来，国内外均进行了大量的研究。已建立了多种农药残留的ELISA检测技术，有很多已制成了商品化的试剂盒。 酶抑制法 酶抑制法检测氨基甲酸酯类农药残留量的主要原理是:在一定的条件下，氨基甲酸酯类农药可抑制胆碱酯酶的催化水解，其抑制率与农药的浓度呈正相关。利用这一特性，可通过检测酶活性被抑制的程度来间接检测农产品中氨基甲酸酯类农药残留量的大小。检测的大致过程为在待检的样本提取液中加入胆碱酯酶，通过检测手段(颜色变化或其他物理化学信号)检测酶的抑制程度。通过检测数据计算出农药对胆碱酯酶的抑制率，依据抑制率的大小来判断蔬菜中氨基甲酸酯类农药的残留状况。?电化学检测是针对具有电化学活性的农药分子，在电极面发生氧化或还原时，失去或得到电子，产生与待检测农药浓度成正比的电极电流，通过检测电极电流的变化，计算出待检测农药含量的一种分析方法。电化学检测有三种基本类型，分别为电导法、电位法和安培法。安培法是电化学检测中应用最普遍的一种方法，故人们常直接将将安培检测称为电化学检测。电化学检测具有很多优点，如检出限低、选择性好、设备简单、成本低、快速、检测范围广等优点，是最常用的农药残留快速检测技术之一。 氨基甲酸酯类农药的优良杀虫效果使其得到广泛应用，尽管它不是绝对地安全我们也不能将其取缔。因为只要用正确的方法检测其在水果蔬菜中的残留量，确定其在允许的范围内就能保证其安全性，让消费者放心食用。故其检测方法的研究和改进才是关键所在。食品的安全是与我们的健康息息相关的，只有认真对待检测工作才能维护好食品行业的整体形象，才能保障消费者的权益。 参考文献 [1] 张艳，苟金萍，程淑华，王晓菁(枸杞中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的测定(西北农业大学学报 2005年14期 [2] 杨大进，张莹，方从容(大米中有机磷和氨基甲酸酯农药残留毛细管气相色谱测定法(卫生研究 1994年23期 [3] 杨莉萍(氨基甲酸酯类农药残留分析方法的研究进展(二)【J】(甘肃农业科技，2005年08期 [4] 罗惠明 《蔬菜、水果中氨基甲酸酯类农药残留量液相色谱—串联质谱检验方法》 《检验检疫科学》 2008年05期 [5] 武中平，徐春祥，高巍，等(酶联免疫分析法及其在食品农药残留检测中的应用(江苏农业科学，2007年01期 [6] 管健，盛静(农药残留检测技术及研究进展田(中国卫生检验杂志，2008年18期 《测量学》模拟试卷 一、单项选择题(每小题1 分，共20 分) 得分 评卷人 复查人 在下列每小题的四个备选答案中选出一个正确的答 案，并将其字母标号填入题干的括号内。 1(经纬仪测量水平角时，正倒镜瞄准同一方向所读的水平方向值理论上应相差(A )。 A 180? B 0? C 90? D 270? 2. 1:5000地形图的比例尺精度是( D )。 A 5 m B 0.1 mm C 5 cm D 50 cm 3. 以下不属于基本测量工作范畴的一项是( C)。 A 高差测量 B 距离测量 C 导线测量 D 角度测量 4. 已知某直线的坐标方位角为220?，则其象限角为(D )。 A 220? B 40? C 南西50? D 南西40? 5. 由一条线段的边长、方位角和一点坐标计算另一点坐标的计算称为(A )。 A 坐标正算 B 坐标反算 C 导线计算 D 水准计算 6. 闭合导线在X轴上的坐标增量闭合差( A )。 A为一不等于0的常数 B 与导线形状有关 C总为0 D 由路线中两点确定 7. 在地形图中，表示测量控制点的符号属于(D )。 A 比例符号 B 半依比例符号 C 地貌符号 D 非比例符号 8. 在未知点上设站对三个已知点进行测角交会的方法称为(A )。 A 后方交会 B 前方交会 C 侧方交会 D 无法确定 9. 两井定向中不需要进行的一项工作是(C )。 A 投点 B 地面连接 C 测量井筒中钢丝长度 D 井下连接 10. 绝对高程是地面点到( C )的铅垂距离。 A 坐标原点 B任意水准面 C 大地水准面 D 赤道面 11(下列关于等高线的叙述是错误的是:(A ) A( 高程相等的点在同一等高线上 B( 等高线必定是闭合曲线，即使本幅图没闭合，则在相邻的图幅闭合 C( 等高线不能分叉、相交或合并 测量学试卷 第 5 页(共 7 页) D( 等高线经过山脊与山脊线正交 12(下面关于非比例符号中定位点位置的叙述错误的是(B ) A(几何图形符号，定位点在符号图形中心 B(符号图形中有一个点，则该点即为定位点 C(宽底符号，符号定位点在符号底部中心 D(底部为直角形符号，其符号定位点位于最右边顶点处 13(下面关于控制网的叙述错误的是(D ) A( 国家控制网从高级到低级布设 B( 国家控制网按精度可分为A、B、C、D、E五等 C( 国家控制网分为平面控制网和高程控制网 D( 直接为测图目的建立的控制网，称为图根控制网 14(下图为某地形图的一部分，各等高线高程如图所视，A点位于线段MN上，点A到点 M和点N的图上水平距离为MA=3mm，NA=2mm，则A点高程为(A ) A( 36.4m M B( 36.6m A C( 37.4m 37 N D( 37.6m 35 36 ,15(如图所示支导线，AB边的坐标方位角为，转折角如图，则CD边,,12530'30''AB A D 的坐标方位角,为( B ) CD100?100? 30 30 130?C B 30 ,,,,7530'30''1530'30''4530'30''2529'30''A( B( C( D( 16(三角高程测量要求对向观测垂直角，计算往返高差，主要目的是(D ) A( 有效地抵偿或消除球差和气差的影响 B( 有效地抵偿或消除仪器高和觇标高测量误差的影响 C( 有效地抵偿或消除垂直角读数误差的影响 D(有效地抵偿或消除读盘分划误差的影响 17(下面测量读数的做法正确的是( C ) A( 用经纬仪测水平角，用横丝照准目标读数 测量学试卷 第 6 页(共 7 页) B( 用水准仪测高差，用竖丝切准水准尺读数 C( 水准测量时，每次读数前都要使水准管气泡居中 D( 经纬仪测竖直角时，尽量照准目标的底部 18(水准测量时对一端水准尺进行测量的正确操作步骤是( D )。 A 对中----整平-----瞄准----读数 A 整平----瞄准----读数----精平 C 粗平----精平----瞄准----读数 D粗平----瞄准----精平----读数 19(矿井平面联系测量的主要任务是( D ) A 实现井上下平面坐标系统的统一 B 实现井上下高程的统一 C 作为井下基本平面控制 D 提高井下导线测量的精度 20( 井口水准基点一般位于( A )。 A 地面工业广场井筒附近 B 井下井筒附近 C 地面任意位置的水准点 D 井下任意位置的水准点 得分 评卷人 复查人 二、填空题(每空2分，共20分) 21水准测量中，为了进行测站检核，在一个测站要测量两个高差值进行比较，通常采用的测量检核方法是双面尺法和 。 22直线定向常用的标准方向有真子午线方向、_____磁北方向____________和坐标纵线方向。 23地形图符号一般分为比例符号、_半依比例符号_________________和不依比例符号。 24 井下巷道掘进过程中，为了保证巷道的方向和坡度，通常要进行中线和____________的标定工作。 25 测量误差按其对测量结果的影响性质，可分为系统误差和_偶然误差______________。 26 地物注记的形式有文字注记、 ______ 和符号注记三种。 27 象限角的取值范围是: 0-90 。 28 经纬仪安置通常包括整平和 对中 。 29 为了便于计算和分析，对大地水准面采用一个规则的数学曲面进行表示，这个数学曲面称为 参考托球面 。 测量学试卷 第 7 页(共 7 页) 。 30 光电测距仪按照测量时间的方式可以分为相位式测距仪和 差分 三、名词解释(每小题5分，共20分) 得分 评卷人 复查人 31(竖盘指标差 竖盘分划误差 32(水准测量 利用水准仪测定两点间的高差 33(系统误差 由客观原因造成的具有统计规律性的误差 34(视准轴 仪器望远镜物镜和目镜中心的连线 四、简答题(每小题5分，共20分) 得分 评卷人 复查人 35(简述测回法测量水平角时一个测站上的工作步骤和角度计算方法。 对中，整平，定向，测角。观测角度值减去定向角度值 测量学试卷 第 8 页(共 7 页) 36(什么叫比例尺精度,它在实际测量工作中有何意义, 图上0.1毫米在实地的距离。可以影响地物取舍 37(简述用极坐标法在实地测设图纸上某点平面位置的要素计算和测设过程。 38(高斯投影具有哪些基本规律。 测量学试卷 第 9 页(共 7 页) 得分 评卷人 复查人 五、计算题(每小题10分，共20分) 39(在1:2000图幅坐标方格网上，量测出ab = 2.0cm, ac = 1.6cm, ad = 3.9cm, ae = 及其坐标方位角α。 5.2cm。试计算AB长度DABAB 1800 A d b B a 1600 c e 1200 1400 40(从图上量得点M的坐标X=14.22m, Y=86.71m;点A的坐标为X=42.34m, MMAY=85.00m。试计算M、A两点的水平距离和坐标方位角。 A 测量学试卷 第 10 页(共 7 页) 测量学 标准答案与评分说明 一、 一、 单项选择题(每题1分) 1 A; 2 D; 3 C; 4 D; 5 A; 6 C; 7 D; 8 A; 9 C; 10 C; 11 A;12 D;13 B;14 A; 15 B;16 A;17 C;18 D; 19 A;20 A 二、 二、 填空题 (每空2分，共20分) 21 变更仪器高法 22 磁北方向 23 半依比例符号(或线状符号) 24(腰线 25(偶然误差 26(数字注记 27 大于等于0度且小于等于90度(或[0?, 90?]) 28 对中 29 旋转椭球体面 30 脉冲式测距仪 三、 三、 名词解释(每题5分，共20分) 31竖盘指标差:在垂直角测量中，当竖盘指标水准管气泡居中时，指标并不恰好指向其正 确位置90度或270度，而是与正确位置相差一个小角度x, x即为竖盘指标差。 32 水准测量:利用一条水平视线并借助于水准尺，测量地面两点间的高差，进而由已知点 的高程推算出未知点的高程的测量工作。 33 系统误差:在相同的观测条件下，对某量进行了n次观测，如果误差出现的大小和符号 均相同或按一定的规律变化，这种误差称为系统误差。 34视准轴:望远镜物镜光心与十字丝中心(或交叉点)的连线。 四、 四、 简答题(每题5分，共20分) 35 (1)在测站点O上安置经纬仪，对中，整平 (1分) (2)盘左瞄准A点，读数L，顺时针旋转照准部到B点，读数L，计算上半测回AB角度O=L-L; 1BA (2分) (3)旋转望远镜和照准部，变为盘右方向，瞄准B点读数R，逆时针旋转到A点，B读数R，计算下半测回角度O=R-R; A2BA (3分) (4)比较O和O的差，若超过限差则不符合要求，需要重新测量，若小于限差，则12 取平均值为最终测量结果 O = (O+O)/2 12 (5分) 36 图上0.1mm对应的实地距离叫做比例尺精度。 (3分) 测量学试卷 第 11 页(共 7 页) 其作用主要在于:一是根据地形图比例尺确定实地量测精度;二是根据地形图上需要表示地物地貌的详细程度，确定所选用地形图的比例尺。 (5分) 37 要素计算:从图纸上量算待测设点的坐标，然后结合已有控制点计算该点与控制点连线之间的方位角，进而确定与已知方向之间所夹的水平角，计算待测设点到设站控制点之间的水平距离。 (3分) 测设过程:在设站控制点安置经纬仪，后视另一控制点，置度盘为0度，根据待定方向与该方向夹角确定方向线，根据距离确定点的位置。 (5分) 38 高斯投影的基本规律是: 中央子午线的投影为一直线，且投影之后的长度无变形;其余子午线的投(1) (1) 影均为凹向中央子午线的曲线，且以中央子午线为对称轴，离对称轴越远，其长度变形也就越大; (2) (2) 赤道的投影为直线，其余纬线的投影为凸向赤道的曲线，并以赤道为对称轴; (3) (3) 经纬线投影后仍保持相互正交的关系，即投影后无角度变形; (4) (4) 中央子午线和赤道的投影相互垂直。 评分说明:答对一条得2分，答对三条即可得满分。 五、 五、 计算题(每题10分，共20分) 39 bd = ad – ab = 1.9cm， 因此?X = -38m; ce = ae – ac = 3.6cm, 因此?Y = -72m; (3分) (或由图根据比例尺和距离计算A、B两点的坐标) 因此距离为:81.413m (6分) AB的方位角为:242?10′33″ (10分) (方位角计算应说明具体过程，过程对结果错扣2分) 40 ?X = X – X = 28.12m, ?Y = Y – Y = -1.71m (2分) AMAM221/2 距离d = (?X + ?Y)= 28.17m (5分) 方位角为:356 ?31′12″ (应说明计算过程与主要公式) (10分) 可通过不同方法计算，如先计算象限角，再计算方位角。 说明:在距离与方位角计算中，算法公式对但结果错各1分 测量学试卷 第 12 页(共 7 页)