HPLC法测定小儿智力糖浆中细叶远志皂苷的含量

HPLC法测定小儿智力糖浆中细叶远志皂苷的含量 [摘要] 目的:建立小儿智力糖浆中细叶远志皂苷的含量测定。方法: 采用HPLC法测 定。色谱柱: E2111646Z C18柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm)，流动相:甲醇-0.05,磷酸溶 液(70?30)，流速:1.0 ml/min，检测波长:210 nm，理论板数按细叶远志皂苷峰计算不应 低于3 000。结果:细叶远志皂苷在30.4,608 μg/ml范围内呈良好的线性关系;平均加样回 收率为99.20%，RSD=0.95%(n=5)。结论:该方法简便，结果准确，重现性好，可作为小 儿智力糖浆质量控制方法。 [关键词] 小儿智力糖浆;远志;细叶远志皂苷;HPLC;含量测定 [中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)07(a)-060-02 Determination of Tenuifolin in the children intelligence syrup by HPLC LI Xin′e1, SHI Yaohui2 1.Pharmacy Department Office, the First People’s Hospital, Xiangtan 411100, China; 2.Hu’nan Xinhui Pharmaceutical Co. Ltd., Changsha 410200, China [Abstract] Objective: To establish a method for determination of the tenuifolin in the children intelligence syrup by HPLC. Methods: E2111646Z C18 column (4.6 mm ×250 mm, 5 μm) was used, the mobile phase consisted of methanol-0.05% phosphoric acid solution(70?30, V/V), flow rate was 1.0 ml/min, and the detective wavelength was 210 nm, theoretical tower number calculated by tenuifloin peak should not under the level of 3 000. Results: There were good straightness performance when the concentration of tenuifolin between 30.4 to 608 μg/ml. The average recovery of tenuifolin was 99.20% and the RSD was 0.95%(n=5). Conclusion: This method is simple and convenient. The accurate result and reappearing feature will be regarded as the quality control method of children intelligence syrup. [Key words] Children intelligence syrup; Radix Polygalae; Tenuifolin; HPLC; Determination 小儿智力糖浆是由远志、龙骨、石菖蒲、雄鸡、龟板等药味经提取加工而制成，收载 于卫生部药品中药成方制剂第八册(WS3-B-1496-93)，具有调补阴阳，开窍益智之功 效。用于小儿轻微脑功能障碍综合征(又称多动症)。远志具有安神益智的功效[1-2]，在本 品中是主要药材，皂苷类成分是远志的主要活性成分，细叶远志皂苷是远志总皂苷碱水解生 成的次级皂苷，远志总皂苷经碱水解均能转化为细叶远志皂苷[3-6]。因此，以细叶远志皂苷 为指标成分来检测远志总皂苷的含量，采用HPLC法，建立专属性含量测定方法，可作为 本品质量控制指标。 1 仪器与 德国诺尔K-1001高效液相色谱仪(PUMP泵、2501紫外检测仪、2000数据处理机， 进样器);细叶远志皂苷对照品(批号:111849-201001，由中国药品生物制品检定所提供， 纯度为98.1%);甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯;小儿智力糖浆样品(湖南新汇制药 有限公司，批号:100102、100201、100501、100602、100603)。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱: E2111646Z C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm); 流动相:甲醇-0.05,磷酸 溶液(70?30)，流速:1 ml/min;检测波长:210 nm。理论塔板数(n)为3 000以上，进 样量为10 μl。在以上色谱条件下，细叶远志皂苷峰保留时间约为18 min。 2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品10 ml，蒸干，加10,NaOH溶液50 ml，加热回流2 h，冷却，用盐酸调节pH值为4~5，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次50 ml，合并正丁醇液，回收溶剂至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至50 ml容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.3对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的细叶远志皂苷对照品15.2 mg，置25 ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，制成对照品储备液。再精密量取1.5 ml上述对照品储备液，置25 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成对照品溶液。 2.4线性关系考察 精密量取对照品储备液0.25，0.5，1，2，3，4，5 ml，分别置5 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀(n=7)。精密吸取上述溶液各10 μl，注入液相色谱仪，峰面积。以对照品浓度X(μg/ml)为横坐标，峰面积均值Y为纵坐标，进行线性回归，结果细叶远志皂苷浓度在30.4~608 μg/ml范围内呈良好的线性关系。回归方回程为:Y=4.968 ×106X-5.865×105(r=0.999 1)。 2.5 精密度试验 精密量取同一份细叶远志皂苷对照品溶液，连续测定5次，记录色谱图，结果其细叶远志皂苷的RSD为0.70%，明仪器精密度良好。 2.6 重复性试验 精密量取同一批样品5份，按供试品溶液制备方法制备，依法测定，记录细叶远志皂苷色谱峰面积值，计算细叶远志皂苷的含量，RSD=0.65%。表明本法的重复性好。 2.7 稳定性试验 对同一供试品溶液，每隔2 h测定一次，共测定5次，记录细叶远志皂苷色谱峰面积值，RSD为1.35%，表明供试品溶液稳定性良好。 2.8 干扰试验 按处方比例，取缺远志的其余药材，制成空白制剂，按供试品溶液制备项下的方法制成阴性对照品溶液。分别取对照品溶液，阴性对照品溶液，供试品溶液各10 μl按上述色谱条件测定。结果在细叶远志皂苷相应的保留时间无色谱峰，表明处方中其他成分对测定无干扰(图1)。 2.9加样回收率测定 精密量取已知细叶远志皂苷含量的小儿智力糖浆6份，分别精密添加细叶远志皂苷对照品，按供试品溶液制备项下的方法制备，测得平均回收率为99.20%，RSD=0.95%。见表1。 2.10样品含量测定 取5批小儿智力糖浆样品，按供试品溶液制备方法制备，精密吸取供试品溶液及对照品溶液，按上述色谱条件测定峰面积，计算含量，结果见表2。 3 讨论 小儿智力糖浆为小儿常用中成药，但是质量标准中无含量测定，无法控制产品的质量，本实验以细叶远志皂苷含量为主要指标，参照《中国药典》2010年版远志中细叶远志皂苷含量测定项下的提取方法，以10%NaOH处理，用水饱和的正丁醇为溶剂，采用高效液相色谱法，制定了小儿智力糖浆的含量测定标准，以更好地控制产品的质量，保证临床疗效。 [参考文献] [1] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:146. [2] 董晓兵,李军.测定天王补心丸和归脾丸中细叶远志皂苷的含量[J].中国中药杂志,2007,32(16):1647-1649. [3] 唐波,徐海波.HPLC测定脑力宝颗粒中远志皂苷元的含量[J].中国现代中药,2007,9(7):20-21. [4] 董晓兵,李军.远志皂苷对照品细叶远志皂苷的制备[J].中药新药与临床药理,2007,18(1):56. [5] 李军,董晓兵.HPLC测定远志中总皂苷的含量[J].药物分析杂志,2007,27(9):1329-1332. [6] 杨国红,孙晓飞.反相高效液相色普法测定远志中远志皂苷元的含量[J].药物分析杂志,2001,21(4):260-263. (收稿日期:2011-05-13) [作者简介] 李新娥，女，副主任药师;主要研究方向:医院药学与中药质量标准。 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文