【doc】胸腹腔积液检测指标的临床运用

【doc】胸腹腔积液检测指标的临床运用 胸腹腔积液检测指标的临床运用 354现代医药卫生2006年22卷第3期 胸腹腔积液检测指标的临床运用 程大林.白盘张济 (1.重庆医科大学附一院检验科,重庆400016;2.重庆市肺科医院检验科,重庆400020) 文章编号:1009—5519(2006)03—0354--02中图分类号:R446文献标识码:A 人体的浆膜腔(如胸腔,腹腔,心包腔等)在i常情况下.仅 有少量液体,在病理情况下则可有大量液体潴留而形成浆膜腔 积液.这些积液随部位不同可分为胸腔积液,腹腔积液,心包积 液等.近年来,不少学者对胸腹腔积液的实验室检测进行了更 加深入的探讨.除不断拓展常规项目外.同时还在生化检测,免 疫检测,肿瘤标志物检测,细胞学检测等方面也取得了不少成 就.本文主要就是胸腹腔积液实验室检测进展报道如下. 1生化指标 1.1纤维结合蛋白(Fn):Fn是一种存在于液体.结缔组织及细 胞表面的o【,槠蛋白,国外Sehomefch报告l】1.恶性腹腔积液Fn明 显高于良性腹腔积液,判断良性腹腔积液的准确性为100%.国 内熊碧芳等l发现.Fn是鉴别良恶性胸腹腔积液的最好指标之 一 .其诊断敏感性,特异性和准确性分别为76%,78.6%和77.8%. 1.2B一葡萄糖苷酸酶(B—G)和B一葡萄糖醛酸酶(B—GCD):B— G具有葡萄糖醛酸转酶作用.据报道结核性胸膜炎和细菌性脓 胸患者胸腔积液B—G活力高于非结核性胸腔积液,且其活力 高低与胸腔积液的陈旧性和浑浊度相平行.B—GCD是一种酸 性水解酶,主要存在于溶酶体,内质网及高尔基复合体中.能够 水解结合的葡萄糖醛酸,参与胆红素代谢及细胞增生等生理病 病过程.正常人血液及体液中存在少量的13-GCD.在恶性肿瘤 中B—GCD颗粒数多于正常细胞;恶性肿瘤患者血清,尿液,胃 液,唾液,脑脊液(细菌性脑炎除外)中B—GCD含量均高于正常 人.渗出液中的B—GCD少量来源于正常体液,大多由增生浸润 的肿瘤细胞,炎症细胞代谢产生,恶性渗出液中的B—GCD含量 显着高于良性渗出液,漏出液.因此,B—GCD对于鉴别恶性胸 腹腔积液及恶性肿瘤疗效观察有重要意义. 2免疫指标 2.1抗核抗体(ANA):Gnon~1等在13例SLE狼疮性胸腔积液 中检出11例ANA滴度>1:160,9例胸腔积液ANM血清ANA 比值>l,而67例由恶性肿瘤,肺炎,结核等病所致的胸腔积液 中ANA均呈阴性.因此.当ANA浓度>1:160或胸腔积液AN 血清ANA比值>1时,可支持红斑狼疮胸膜炎的诊断. 2.2抗结核抗体(TB—Ab):采用间接ELISA法对结核性与非 结核性胸膜炎患者胸腔积液进行TB—Ab测定,结果表明:结 核性胸膜炎患者胸腔积液及血清TB,Ab的阳性例数分别为 34/41(82,93%),32,41(78,O5%),而非结核性的阳性数为3/40 (7.5%),2/40(5%).所以,TB—Ab测定有,定鉴别诊断价值. 2.3免疫球蛋白和补体测定:有人对43例肝硬化腹腔积液作了 I,IgA,IgM和补体C3的检查.结果中均值分别为(1.65~0.7o), (O.47~0.35)(0,30~0.24)和(O.13~0.06)g/L,皆低于对照组(结核, 肝癌,胃痛性腹腔积液)的相应值,有显着差异.腹腔积液并发感 染组腹腔积液C比单纯肝硬化组和腹腔积液中自细胞增高组 都低,提示c可作为预测是否是感染性腹腔积液的指标旧. 2-4凝血酶调节蛋白和蛋白C(TM.PC):TM和PC都是抗凝 因子.TM在血管内皮表面作为凝血酶受体加速凝血酶激活 PC.被激活的PC则对激活的因子V和V?起灭活作用.由于 TM合成于内皮细胞,又是血管内皮因子,故检测体液中TM浓 度能反映内皮受损状况.实验表明『71,由于局部炎症和(或)癌瘤 细胞的浸润等,导致不同程度的组织(血管)损伤和血液凝固, 纤溶系统的紊乱,以及浆液性渗出液中的问皮细胞和浸润的癌 细胞均可表达TM抗原,均可引起胸腹腔积液中TM和PC的 异常变化..在胸腹腔积液中TM水平最高者为化脓性疾病,其 次为恶性肿瘤,最低为漏出液.渗出液(包括结核性和化脓性) 与漏出液,恶性肿瘤与漏出液之间.它们的TM浓度差异有显 着性.临床上最不容易鉴别的恶性肿瘤和结核性胸腹腔积液. 在TM量上差异也非常显着.因此检测胸腹腔积液TM可作为 胸腹腔积液疾病鉴别诊断的辅助手段. 2.5触珠蛋白(H):H主要是由肝脏合成,当炎症或损伤 时.内毒索刺激白细胞产生自细胞介索一1(IL一1)和白细胞介 素一6(IL一6),IL一1使胰高血糖素和糖皮质激素升高,而胰高血 糖索能增加细胞的环腺苷酸(cAMP)水平,从而促进肝脏合成 和分泌HPT的量增加,IL一6是HPT合成的一种主要刺激因 子.IL一6促进肝脏合成HPI1可能是直接作用于肝细胞膜上的 IL-6受体而实现的.有实验证明嗍炎症组HP,r明显高于其他组 (漏出液组和恶性肿瘤组). 3肿瘤标志物 phenethylesterin4ratmodelofvascularinjurym.13rJPharmaeol, 2O02,136(3):353, I11】lalentiA,lanaroA,MagiaP,eta1.Roleofnuclearfactor-kappaBin aratmodelofv&~eularinjury[J]NaunynSchmiede——bergsArch Pharmaco1.20o1,364(4):343. 【l21胡新华,杨军,张强,等.核转录因子KBdecoy寡核苷酸对移植 静脉内膜增生的影响【J】.中华外科杂志,2003,9,41(9):684. 【13】ForteA,GalderisiU,DeFeoM,eta1C-mycAmiscnscOligonu— cleotidesPreserveSmoothMuscleDifferentiationandReduceNeg- afireRemodellingfollowingRatCarotidArteriotomy[J].JVa.scRes, 2005,42(3):214. 【l41曲乐丰'憬在平,曹贵松.等.反义C—myc寡核苷酸抑制血管吻合口 狭窄的实验研究[J】.解放军医学杂志,2001,9,26(9):687. 【151张强,t新文,刁彦鹏,等.抑制C—myc基因表达对移植血管狭窄 的影响[J].中国医科大学,2001,4,30(2):81. 【161VeIkk0laT,KarkkainenM,Claesson-wclsh,eta1.RegulationofBXt-- giogencsisviavascularendothelialgowthfactorreeeptor[J】.Cancer Res.20oO.60:202. f171OhtaniKishoMD.EgashiraKensukeMDPhD,HiasaKen-iehiMD, eta1BlockadeofVascularEndothelialGrowthFaetarSuppresses ExperimentalRestenoslsAfterlntralmninalInjurybyInhibitingRe- cruitmerttofMonocyteHneageCells[Jl,Circulation,2004,l10(161: 2444. 收稿日]胡:20o5—09—22 现代医药卫生2006年22卷第3期355 3.1血清细胞角蛋白l9片段(Cy/ra2l一1.叉称CK一19): Cyfra21—1是指细胞角蛋白19的片段.CK一19为一种酸性多脂, 主要分布于单层上皮细胞,如肺泡上皮细胞,肠上皮细胞,胰 管,胆管,子宫内膜及输卵管等.上述细胞发生癌变时,即町释 放CK一19片段.一部分进入血液循环,一部分随漏出液进入胸 腹腔.可用于监测胸腹积液转移肺癌,肠癌,子宫癌等的疗效. 3.2恶性肿瘤生长因子(I.sGF):TSGF是恶性肿瘤形成及生长时 促进肿瘤及周边毛细血管大量增殖的因子,在恶性肿瘤形成时释 放人血,对恶性肿瘤的鉴别诊断具有特异性.恶性肿瘤患者与对照 组(非急性炎症和非结核类患者)之间有显着差异,是罄别良性肿 瘤和恶性肿瘤的较可靠指标.但是与炎症和结核患者无显着差异, 则临床判断应排除这类疾病[91.测定胸腹腔积液中的I'sGF含量对 于恶性肿瘤的早期诊断,疗效观察有重要意义. 3.4.酸性糖蛋白(AAG):AAG是急性时相反应物之一,由肝 脏合成.癌细胞也可合成.AAG被认为是一种非特异性肿瘤标 志物.最近发现很多短期培养的肿瘤组织及其细胞系,可以合 成AAG类似的或与其有交叉抗原的糖蛋白,提示AAG可能是 一 种与肿瘤有关的血清成分.AAG存在于组织细胞中,细菌及 其毒素对组织细胞的破坏,白细胞吞噬时的分解,可使AAG释 放人血.在感染或损伤情况下,1l刺激吞噬细胞释放脂多聚 糖.可促进AAG的合成使血中水平升高.有资料显示t'~AAG在 炎症和恶性肿瘤胸腹腔积液中明显增高,可能是胸腹腔积液中 含有脱落的癌细胞,分秘AAG增加.再加上血管通透性增加, 使血中AAG渗入胸腹腔积液中.AAG是鉴别漏出液,炎症渗 出液和恶性肿瘤渗出液的敏感指标,在炎症渗出液和恶性肿瘤 渗出液中升高明显. 4细胞染色显微镜检测 4.1沉渣涂片瑞吉氏染色:瑞吉氏染色能清楚地显示细胞浆 成份和细胞核染色质结构.易于良,恶性细胞的判别. 作者通过对胸腔积液标本(5,1OmJ)两次离心浓集细胞涂 片瑞吉氏染色,先低倍镜扫描全片,遇有可疑细胞时再转油镜 鉴定细胞性质,见到典型恶性瘤细胞即可确诊为恶性胸腔积 液.由于肿瘤细胞在胸腹腔积液中失去了原肿瘤细胞的形态特 征.呈无限制的自主性生长,可表现多种形态.根据细胞的形态 学特点,部分病例可以区分细胞性质,比如腺癌或鳞癌,个别的 可以推测其组织来源,比如卵巢癌引起的腹腔积液,其瘤细胞 体积巨大.胞浆丰富,充满囊性空泡.采用此种方法检测恶性细 胞其检出率达78%,特异性为94.3%ru1. 4.2沉渣涂片细胞化学染色:王应等【l21对胸腔积液中的瘤细胞 进行多种化学染色.结果显示瘤细胞的过氧化物酶染色 (SB)均呈阴性,其原因可能与其分化程 (pox),苏丹黑B染色 度及癌细胞内过氧化物酶含量极少或缺乏有关;而精原染色 (PAS),碱性磷酸酶染色(ALP),特异性脂酶染色(ASD—CE),非 特异性脂酶染色(n—NAE),酸性磷酸酶染色(ACP)等呈不同程 度的阳性反应,其原因可能是与分化程度有关. 4.3荧光染色:吖啶橙(AO)是一种荧光铬黄染料,具有高度的 异染性.AO与核酸分子相结合,染料中的衣地酸可将RNA分 子分解成单股,并借助静电吸附作用,可与单股RNA分子相连 接,使逐渐堆积.由于DNA和RNA的吸收方式不同,所以各有 小l百J的荧光反应.由于肿瘤细胞增生旺盛.细胞浆及核仁内有 大量的RNA.用吖啶橙染色后胞浆呈桔红色,核仁呈火焰色荧 光;而细胞核中有大量的DNA则垡黄绿色荧光,该法检测恶性 胸腔积液阳性率达78-3%.假阳性率14.3%因此在癌细胞稀少 时,AO染色是一种查癌细胞较好的方法I31. 4.4免疫细胞化学染色:可采用ABC法.即亲和素一生物素复 合物法(Avidin—BiotinCom—plex,ABC).根据细胞的显色反应判 断细胞表面或胞浆内是否有相应的瘤细胞抗原,如用癌胚抗原 (CEA)抗体检测腺癌细胞的CEA表达,用甲胎蛋白(AFP)抗体 检测肝癌细胞的AFP表达等.本法特异性高,可确定癌瘤细胞 的来源及类型.但影响因索多.Spehn报道l41用BerEP4抗体进 行细胞免疫化学染色.59例细胞学阴性的胸液中.有34例染 色阳性.16例被确诊;而良性细胞无假阳性反应.作者认为该 染色为一高敏感性,高特异性的检测恶性瘤细胞的方法. 综上所述,浆膜腔积液的检测指标对于一些引起胸腹腔积 液的疾病诊断,病情评估有着极其重要的价值.相信随着仪器 学和方法学的发展,将会有更多,更准确的胸腔积液检测指标 运用于临床.为病人的临床诊断提供更可靠的,更有价值的实 验室依据. 参考文献: …1SchomlrichJ'VolkHA,KottyenE,eta1.Fibroncationconcentrtionin nscitesdifferentiatesbetweennlalighartandnonmaliganntascites[J]. 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