02丙氨酸氨基转移酶测定

02丙氨酸氨基转移酶测定 标题:丙氨酸氨基转移酶测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-MY-SOP-002 发布日期:2006年06月06日 生效日期:2006年07月01日 发布部门:管理层 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码: 共 3 页 一、目的 丙氨酸氨基转移酶又称谷丙转氨酶～在肝细胞中含量最为 丰富～在肝内主要分布于细胞质水溶性部分。当肝脏出现实质性 病变时～细胞坏死或通透性增加时～此酶便会大量释放入血～使 血液中该酶活性显著增高。 二、测定方法 速率法 三、原理 测定ALT所用的酶反应如下: ALT L-丙氨酸+а-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸 + LDH + 丙酮酸+NADH+HL-乳酸+NAD NADH在340nm波长有最大吸收峰～NADH的氧化速率与血清中 ALT活性成正比～在340nm波长下测定NADH吸光度下降的速率 即可测出ALT的活性。 四、标本 1、静脉抽取病人空腹血～臵于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。 2、采血后应立即送到检验科生化室。 3、样品收到后立即分离血清～不能及时测定的血清应于2—8?保存。 4、严重溶血或脂血的标本不能测定。 五、设备与试剂 1、 希迈全自动生化仪 2、 上海复星长征ALT试剂。 1 3、 ALT试剂应于2—8?冰箱保存。 六、操作步骤 1、样本的准备:将编好号的样品离心～取血清加入样品杯放到样 品盘的规定位臵～再把样品盘放到仪器中相应位臵。 2、试剂的检查:每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标 等情况～确认无误后方可进行测定。 3、操作方法:详见希迈生化仪操作。 七、质量控制 每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清 至少做一次室内质控～每年定期参加海南省临检中心所组织的室 间质评。 八、干扰因素 1、 正常新生儿ALT水平比成年人约高2倍～出生后3个月降 至成人水平。 2、 宜用血清标本、草酸盐、肝素、枸橼酸盐虽不抑制酶活性～ 但可引起轻度混浊～影响测定结果。 3、 红细胞内ALT含量为血清中的3—5倍～故应避免用溶血标 本。 九、参考区间 0— 40U/l,37?, 十、实验室解释 人体内许多脏器都含ALT～尤以肝脏含量最为丰富～具活性强 度的顺序大致为肝>肾>心>肌肉。ALT主要存在于肝细胞中～由于 整个肝内酶活性比血清中约高100倍～故只要有1/100的肝细胞 坏死～便可使血清内此酶活性升高一倍～因此在除外肝外脏器病 变情况下～ALT升高在一定程度上即反映了肝细胞损害和坏死的情 况。ALT活性增高常见于下列情况:肝胆疾病、心血管疾病、骨骼 2 肌病、多发性肌炎、肌营养不良等,另外某些药物和毒物引起ALT 活性升高～如氯丙嗪、异烟肼、水杨酸制剂及酒精、铅、汞、四 氯化碳或有机磷等。 十一、异常结果处理 当血清ALT活性太高时～应将标本用生理盐水稀释后重新测定。 十二、参考文献 1、 叶应妩、王毓三主编～全国临床检验操作规程～中华人民共和 国卫生部医政司、南京、第二版、1997。 2、 管正大主编～医学检验临床意义手册～人民军医出版社～北京、 第一版、1994。 3、 王淑娟、周惠平、夏铁安主编～现代实验诊断学手册～北京医 科大学、协和医科大学联合出版社～北京、第一版、1995。 3