HPLC测定复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水中达克罗宁的含量

HPLC测定复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水中达克罗宁的含量 HPLC测定复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒 水中达克罗宁的含量 HAINANMEDICALJOURNAL《海南医学)2olo年第21卷第l4期 ? 药物与临床? HPLC测定复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水中达克罗宁的含量 李成,颜晗,罗意文,曾繁涛,路伟,陈连剑 (1.深圳市福田人民医院,广东深圳518033; 2.深圳市药检所,广东深圳518057) 【摘要】目的建立复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水中达克罗宁的含量测定方法.方法采用高效 液相色谱法,色谱柱为Phenomenexlune(4.6mmx250mm,5Ixm),流动相为乙睛一水一三乙胺一冰醋酸(55 :43.5:1.0:0.5),流速为0.5ml/min,检测波长为279nm,柱温30?.结果盐酸达克罗宁的检测线性范围 为20.13—120.780.g/ml,r=0.9995,平均回收率为99.6%,RSD为0.43%(n=6).结论本法简便,准 确,灵敏度高,重复性好,可作为复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水中达克罗宁的含量测定方法. 【关键词】复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水;盐酸达克罗宁;高效液相色谱法;含量测定 【中图分类号】PO86【文献标识码】A【文章编号】1003-----6350(2010)l4—125—03 DycloninecontentinthecompounddycloninementholantipruriticemollientswaterwithHP LC.L/Cheng. YANHan,LUOYi—wen,ela1.FutianPeople'SHospital,Shenzhen518033,Guangdong,CHINA 【Abstract】 0bjectiveTodeterminethedycloninecontentinthecompounddyeloninementholantipruriti c emollientswater.MethodsTheanalyticalcolumnwasphenomenexlune(4.6× 250mnl,5trm),themobile phaseWasacetonitrile—water—glacialaceticacid— triethylamine(55:43.5:1.0:0.5)withtheflowrateof1.0 ml?min,.thedetectionwavelengthWas279nlnandthecolumntemperaturewas30?.ResultsThecalibration curvewaslinearwithintheconcentrationrangeof20.13— 120.78Ixg?ml,.r=0.9995.Theaveragerecovery was99.6%,RSD=0.43%(n=6).ConclusionHPLCissimple,rapidandaccurate,andsuitable forthedeter- minationofcompounddycloninementholantiprufiticemollientswater. 【Keywords】 Compounddyeloninementholantipruritieemollientswater;dycloninehydrochloride;HPL C; Contentdetermination 盐酸达克罗宁为局部麻醉药,对皮肤有止痛,止 痒及杀菌作用.复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水是 我院制剂室自行研制的一种外用溶液剂,以达克罗 宁和薄荷脑为主药,酒精和甘油为辅药,用于治疗我 院皮肤科门诊日益增多的秋冬季节的皮肤干燥,瘙 痒患者,尤其是日益增多的中老年患者.《复方达克 罗宁薄荷脑润肤止痒水的研制》被列为2009年深圳 市科技项目.2010年4—5月,本研究参考国内 外有关文献J,并根据盐酸达克罗宁的理化性质, 建立了高效液相色谱法测定复方达克罗宁薄荷脑润 肤止痒水中达克罗宁的含量,该方法灵敏,准确,重 现性好,可作为本品的质量控制方法. 1药物与仪器 1.1仪器岛津LC一20ADHPLC仪(SPD一 20AuV检测器,CTO一10ASVP柱温箱,phenomenex lune色谱柱(4.6mill×250mm,5m),SIL一20AL (自动进样器),uV一2201紫外分光光度计(日本岛 津),KQ5200DB数控超声清洗器(昆山市超声仪器 有限公司),AG285电子天平(瑞士梅里达). 1.2药物盐酸达克罗宁(杭州良金生物科 技,批号:2091203,含量:99.9%),复方达克罗宁薄 荷脑润肤止痒水(本院自制),乙腈(色谱纯,天津四 友).其他试剂均为分析纯.所有试剂和溶液使用 前均经0.45Ixm微孔滤膜过滤. 2方法 2.1溶液制备 2.1.1对照品溶液制备精密秤取盐酸达克 罗宁20.13mg,置100rnl量瓶中,用流动相溶解并 稀释至刻度,摇匀,得浓度为0.2013mg/ml的 品溶液. 2.1.2样品溶液制备精密量取样品1rnl,置 100ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得供 试品溶液. 2.1.3空白样品溶液制备按处方比例秤取 作者简介:李成(197O一),男,广东省深圳市人,副主任药师,学士. 通讯作者:陈连剑,主任约师,主要研究方向:医院药学.E—mail:ftdsfy@qq.coin ? 125? 《海南医学)2mo年第2l卷第14期 HAINANMEDICALJoURNALVo1.21NO.14July2010 除盐酸达克罗宁外的其他的药品和辅料,按该制剂 制备工艺制成空白制剂,其余按样品溶液的制备项 下方法进行. 2.2检测波长精密量取对照品溶液3ml至 10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,以流动相 为空白,在400—190llrll波长范围内扫描,结果盐酸 达克罗宁在279nm处有最大吸收(见图1),薄荷脑 及辅料无干扰,故选择279rim作为检测波长. ? 厂., \ ,\ 圈l盐酸达克罗于紫外吸收光谱 2.3色谱条件及系统适用性实验色谱柱: Phenomenexlune(4.6mmX250mm,5m);流动相: 乙睛一水一三乙胺一冰醋酸(55:43.5:1.0:0.5);流 速:0.5ml/min;检测波长:279/112'1;进样量:101;柱 温30%.理论塔板数不低于3000,主峰与相邻色谱 峰的分离度不小于1.5.色谱图见图2. 图2空臼洗剂与盐酸达克罗宁对照品及样品色谱图 A空白洗剂B盐酸达克罗宁对照品C样品 2.4标准曲线精密量盐酸达克罗宁对照品 溶液1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml,分别置10ITIl 量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀.分别取10i 进样,各浓度进样3次,以浓度(C)对峰面积(A)进 . 126. 行线性回归.得回归方程:A=65692.96C一 40105.4,r=0.9995(n=6).结果表明,盐酸达克 罗宁浓度在20.13—120.78ml范围内与吸收度 呈现良好的线性关系. 2.5精密度试验取同一对照品溶液,连续进 样5次,每次10,峰面积,计算RSD=1.4% (n=5)表明方法精密度良好. 2.6稳定性试验取含量测定项下的样品溶 液,在12h内每2h测定一次,峰面积分别为3239 821,3108705,3219240,3192567,3157254,3109 251,平均为3171140,RSD为1.8%,结果表明该方 法在I2h内稳定. 2.7加样回收率试验精密量取已知含量的 同一批供试品溶液5ml各6份,置1Oml量瓶中,分 别加入60%,100%,140%的盐酸达克罗宁,加流动 相稀释至刻度(相当于80%,100%,120%),按"含 量测定"项下的方法,依法测定,按上述回归方程计 算含量,计算加样回收率,结果见表1. 表l回收率试验结果(II=6) 2.8样品测定精密量取1ml,置100ml量瓶 中,用流动相溶解并稀释至刻度,取稀释液10l注 入高效液相色谱仪,记录色谱图;另精密秤取盐酸达 克罗宁对照品适量,用流动相溶解并稀释成约50 g/m1,同法测定.按外标法以峰面积计算出样品中 盐酸达克罗宁的含量,结果见表2. 表2含量测定结果(n=2J 2.9空白试验按处方秤取除达克罗宁外的 其他成份,依法制成空白洗剂,按"含量测定"项下的 方法,依法测定,结果峰面积为0,表明其他成份不会 对试验结果产生干扰. 3讨论 本实验色谱条件设定流速为0.5ml/min,保留 时间可达到7.363rain,如设定为(下转第l34页) 《海南医学)2010年第2l卷第l4期 ItAINANMEDICALJOURNALVOI.21No.14July2010 究. 高血压与糖尿病到底是伴随关系还是因果关 系,仍有许多争议.李光伟等对140例原发性高 血压者和328例非高血压者进行为期6年的前瞻性 研究,结果发现,高血压组糖尿病患病率(44.6%)显 着高于非高血压组(19.7%),表明原发性高血压是 2型糖尿病的独立预测危险因素.本研究认为,高 血压组糖尿病患病率是非高血压组的1.56倍,提示 高血压是2型糖尿病的独立危险因素. 本研究显示高血脂者患糖尿病的危险性是非高 血脂者的1.598倍,与方顺源等的研究结果相似. 杨文英等对432例非糖尿病人群6年前瞻性研究 发现,空腹血浆甘油三酯(FI'G)水平的升高伴随了 BMI和血糖水平的升高.在调整年龄,性别,空腹血 糖(FBG)和体重指数诸多影响因素后,FTG水平仍 与6年后口服葡萄糖耐量试验(0Gqq')2h血糖水平 呈正相关,表明FTG水平升高是糖尿病的独立危险 因素.刘尊永等的研究结果提示,血清总胆固醇 (TC),甘油三酯(TG)水平与血糖值呈正相关.随 着TC,TG水平的升高,2型糖尿病患病率明显增加; 而高密度脂蛋白胆固醇(HDL—ch)水平与血糖呈负 相关,随着HDL—ch水平的升高,2型糖尿病患病率 明显降低. 众多的研究证实进食肥肉等高脂肪饮食是2型 糖尿病的危险因素J.VanDamRM等.前瞻性 研究证实进食高脂饮食为主的所谓"西方饮食模式 (Westerndietarypattern)"会显着增加2型糖尿病的 发病危险.本研究从单因素分析中可看出,进食过 多,口味,偏甜与糖尿病的发生显示没有相关性,但 单因素和多因素分析均显示高脂肪低纤维饮食与糖 尿病的发生有关,有高脂肪低纤维饮食的人患糖尿 病的危险性是无高脂肪低纤维饮食者的1.504倍. 其主要机制可能是摄入过量的饱和脂肪酸及胆固 醇,导致血清TC,TG升高.高脂肪,低碳水化合物 膳食可降低胰岛素的敏感性,增加胰岛素抵抗,造成 脂代谢紊乱,引起血糖升高. 总之,2型糖尿病及其并发症给患者和社会带 来极大的痛苦和经济负担,由于其病因复杂,目前尚 无根治的方法.本研究认为2型糖尿病的发生是以 年龄和家族史为主要病因基础,加上高血压,高血 脂,饮食等多种因素共同作用的结果.除遗传因素 外,其他因素是可干预的.在糖尿病的一,二级预防 中应加强健康教育,增强保健意识,倡导合理膳食, 适量运动,保持理想体形,对高危人群加强筛查,做 到早预防,早诊断,早治疗. 参考文献 [1]孙宏,袁重胜,隋虹,等.?型糖尿病危险因素的非条件 Logistic回归分析[J].中国医院统计,2005,12(1):20—22. [2]TattersallRB,F~ansSS,AnnArbor.Prev~enceofdiabetesand glucoseintolerancein199offspringofthirty—-sevenconjugaldia?- beticparents[J].Diabetes,1975,24:452. [3]黎健,陈敏,叶杰,等.非胰岛素依赖型糖尿病危险因素 的病例对照研究[J].中国公共卫生,2002,18(5):559—560. [4]李光伟,张辉,潘孝仁,等.原发性高血压为2型糖尿病发病 的独立预测因素[J].中华内科学杂志,1994,33(10):654. [5]方顺源,朱晓霞,刘庆敏,等.杭州市城乡居民2型糖尿病危险 因素调查[J].中国公共卫生,2005,21(2):144—145. [6]杨文英,邢小燕,林红,等.高甘油三酯血症是非胰岛素依赖 型糖尿病的危险因素[J].中华内科杂志,1995,34(9):583. f7]刘尊永,程锦泉,彭吉,等.深圳市居民糖尿病危险因子与? 型糖尿病关系的分析[J].中华预防医学杂志,2000,34(4): 232—234. [8]MeyerKA,KushiLH,JacobsDR,eta1.Dietaryfatandincidenceof type2diabetesinolderIowawomen[J].DiabetesCare,2001,24 (9):1528—1535. [9]吴祚国,陈大方,李琼芳,等.?型糖尿病多发性家族的发病危 险因素探讨[J].疾病控制杂志,1999,3(1):42—44. [1O]VanDamRM,RimmEB,WillettWC,eta1.Dietarypottemsand riskfortype2diabetesmellitusinU.S.men[J].AnnInternMed, 2002,136(3):201—209. (收稿日期:2010—04—14) (上接第126页)1.0mL/min,则保留时间小于5 min;进样量如为20l,则样品峰太高,进样量为l0 l,峰高适宜.在本实验条件下,理论塔板数为 9305,拖尾因子为1.2(采用峰面积法),满足分析要 求.实验表明,采用高效液相色谱法测定复方达克 罗宁薄荷脑润肤止痒水中达克罗宁的含量,方法简 便,快速,准确,适用于制剂盼陕速分析. 参考文献 『11杨跃龙.RP—HPIC法测定复南'达克罗宁软膏中主药的含鼍 ? 134? [J].中国药房,2008,19(4):294. [2郭字鹏,赵青.HPIC法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达克 罗宁的含量[J].齐鲁药事,2007,26(10):597—599. [3]龚士学,壬勇,周琳.达克罗宁氯己定硫软膏中盐酸达克罗 宁的含量测定[J].中国药业,2007,16(17):20—21. [4]郭珉,李珠华,赵远征,等.反相高效液相色谱法测定复方达 克罗宁搽剂中二组分的含量[J].医药导报,2006,25(5):469. [5]王泽明.当代结卡句药物全集M].北京:科学技术出版社,1993: 1777—1778. (收稿日期:2010—05—13)