蛇毒纤溶酶急性毒性试验研究

蛇毒纤溶酶急性毒性试验研究 蛇毒纤溶酶急性毒性试验研究 【摘要】 测定蛇毒纤溶酶的半数致死量(LD50)并研究蛇毒纤溶酶 的急性毒性。方法 小鼠单次静脉注射蛇毒纤溶酶，观察14天内的毒 性反应和死亡情况并计算出LD50。结果 蛇毒纤溶酶的LD50为 24783u/kg，95%可信限为21519,28823u/kg，中毒死亡时间集中在 给药后48h，其毒性靶器官主要是胃、十二指肠、空肠、肺、胰。结 论 蛇毒纤维蛋白溶解酶具有纤溶药相同的毒性症状，有出血倾向。 【关键词】 蛇毒纤溶酶 急性毒性 半数致死量 【Abstract】 Objective To measure the median lethal dose(LD50) of nevin fibrinolytic enzyme and investigate its acute toxicity in mice. Methods After single intravenous dosing, the toxicity reactions and the number of deaths of nevin fibrinolytic enzyme were observed for 14days in mice,then the LD50 was calculated.Results The LD50 of nevin fibrinolytic enzyme was 24783u/kg, and its 95% confident interval was 21519, 28823u/kg.The target organs were stomach, duodenum, jejunum, lung and pancreas. The death focus on 48h after the administration.Conclusion Nevin fibrinolytic enzyme has the same toxicity as the other fibrinolytic enzymes, which has bleeding tendency( 【Key words】 nevin fibrinolytic enzyme; acute toxicity; LD50 蛇毒中含多种具有生物活性的酶、多肽和蛋 白质, 其特殊的功能已在科学研究和医疗实践中获得了广泛应用。 利用蛋白质分离技术从蛇毒中高度纯化而得的蛇毒纤溶酶可直接溶 解纤维蛋白凝块，可用于心脑血栓和心肌梗死的治疗。近年来未见对 蛇毒纤溶酶毒性的研究报道，为此本文对蛇毒纤溶酶急性毒性进行了 初步研究。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物 NIH小鼠，SPF级， 50只，雌雄各半，购自广东省医学实验动物中心,实验动物合格证 号:0026628，实验动物生产许可证号:SCXK(粤)2003-0002，实验 动物监测证号:粤监证字2007A004,。 1.1.2 试剂和药物 蛇毒纤溶 酶(批号:070274，北京博康宁生物医药科技有限公司);0.9,氯化 钠注射液(批号:060626-07，昆明市宇斯药业有限责任公司);甲醛溶液(批号:20061101-11，广州化学试剂厂)。 1.1.3 仪器 全密封自动脱水机(ASP 300，德国Leica公司);平推式切片机(Microm MH400，德国Leica公司);生物组织包埋机(Leica EG 1164，德国Leica公司); 病理图像系统 (广州亿鸣公司)。 1.2 方法,1,2, 选用检疫合格的NIH小鼠50只，将动物按体重、性别随机分为5组，每组10只动物(雌雄各半)，根据预试结果给药剂量设定为38000、30400、24320、19456、15565u/kg，给药容积为0.2ml/10g。给药后连续观察4h，如无异常则终止持续观察，改为每天观察1次，观察至给药后第14天，观察内容包括:动物外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、给药局部、动物死亡数量、死亡时间、濒死前反应等。每组动物分别于给药前及给药后1、2、3、7、14天称体重6次。实验过程中因濒死而处死的动物、死亡的动物以及实验结束时仍存活的动物均进行大体解剖，肉眼观察主要脏器变化，若有异常均应记录并进行组织病理学检查。饲养室温度与湿度:20,26?，40%,70%。 1.3 统计学分析 实验数据采用平均值?标准差(x?s)表示，两组间均数比较用t检验，按Bliss法计算LD50及95%可信限。