医院废水中总大肠菌群的测定

医院废水中总大肠菌群的测定 [适用对象] 环境科学专业 [实验学时] 4学时 一、实验目的 通过本实验学会测定医院废水中总大肠菌群的方法，通过本实验把握无菌操作的基本规程，掌握水中总大肠菌群测定的基本原理，利用相关仪器根据既定的步骤测定水中的总大肠菌群。 二、预习与参考 参考实验指导书，结合实验特色查阅相关文献资料进行实验设计。 三、实验内容 1、原理 应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原状成不可逆的甲臜产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生苏圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。 2、水样采集 用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需加1(5,硫代硫酸钠5ml除去余氯。 3、方法和步骤 每份预监测水样，接种水样总量为55(5ml，分别接种大纸片五张，小纸片10张。每张大纸片接种10ml水样，五张小纸片每张接种1ml，另五张小纸片接种1:10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上，用手轻轻压平，作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37??l?培养18,24h观察结果，测粪大肠菌群44(5??l?培养18,24h，观察结果。 4、判定 (1)纸片上出现紫红色菌落，周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。 (2)纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。 (3)纸片呈紫红色或紫色，菌落周围无黄圈者为阴性。 (4)酸性水样接种后纸片变黄，经培养无紫红色菌落者为阴性。 (5)纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者，应作复发酵进行验证。 5(报告结果 根据阳性纸片张数，查MPN值表，报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。 四、主要食品设备功能和材料清单 灭菌的滤纸、选择性培养基、1(5,硫代硫酸钠、采水器、灭菌瓶。 五、实验要求 如水样污染较重可采取适当稀释后接种，乘以稀释倍数，报出结果。 六、实验报告要求 1、根据实验要求，在实验时间内到实验室进行实验时，一边测量，一边实验数据。报告要求准确、美观。 2、 在实验中，如果发生实验测量数据与事先的计算数值不符，甚至相差过大，此时应该找出原因，不能不了了之。同时要把通过实验所测量的数据与计算值加以比较，如果误差一般5,以下。 3、在报告的最后要完成指导书上要求解答的思考题。 七、思考题 1、此种方法还可适用于哪种污水中大肠杆菌的测定, 2、对于生活饮用水测定水中大肠杆菌可采用哪用方法, 八、实验成绩评定办法 本门实验课程考核成绩占课程总成绩的30,，考核分实验预习、实验过程操作、实验报告和实验技能等四个方面，其成绩计算为预习实验(包括资料搜集)占10%、实验过程操作(包括实验、调试过程)占25,、实验报告(包括原理描述、数据记录、实验结果和效果)占25,、实验技能考核(包括解决问题的能力)或考试占40,。凡考核不及格者，应参加补考或重修。