儿科学(小儿血液)专业优秀论文 造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中同源盒基因表达的研究

儿科学(小儿血液)专业优秀论文 造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中同源盒基因表达的研究 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 儿科学(小儿血液)专业优秀论文 造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖 分化过程中同源盒基因表达的研究 关键词:造血干细胞 淋巴系祖细胞 增殖分化 脐血 摘要:目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 : 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组 (2)(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL (采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第集落生成情况。 4 3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总 ，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence RNA逆转录为cDNA Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增 、HOXC6、并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 正文内容 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素 -M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL(Phytohemagglutinin，PHA 集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence FQ-RT-PCR)进行扩增Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction， 并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6 8(统计方法:结基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、 )表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 (all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence FQ-RT-PCR)进行扩增Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction， 并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、 )表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的 ，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显5s，18s 降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、 )表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的 ，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显5s，18s 降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的 ，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显5s，18s 降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较， 、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结HOXC4、HOXC6 论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组 ，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明HOXC4、HOXC6 显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA 、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 能显著上调HOXC4 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC) T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit- 中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化祖细胞增殖分化过程密切相关。 过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC) T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit- 中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足基因表达的影响。 方法: 月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组 (2)(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL集落生成情况。 4(采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC) T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit- 中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组 (2)(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL (采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第集落生成情况。 4 3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较， 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组 (2)(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL (采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第集落生成情况。 4 3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总 ，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence RNA逆转录为cDNA Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增 、HOXC6、并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量(2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE-WAY方差分析，组间均数两两比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 目的:本课题主要探讨人类脐血造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)向淋巴系祖细胞(Colony Forming Unit-T Lymphocyte，CFU-TL)增殖分化过程中HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因表达的情况，并且用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)进行干扰，以观察在此过程中ATRA对HOX基因表达的影响。 方法: 1(10例脐血标本由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。 2(实验分组。实验分2组:(1)正常组(normal):不加全反式维甲酸，代之等量1640培养液加入基本培养体系。(2)维甲酸组(all-trans-retinoic acid，ATRA组):加入ATRA稀释液0(1ml，终浓度6×10-8mol/l。 3(采用造血干/祖细胞体外培养技术，以ATRA持续干扰人类造血干细胞，观察正常组、维甲酸组的人类脐血HSC经植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA-M)诱导后，在培养过程第3天，7天和12天的CFU-TL (采用瑞氏染色法鉴定CFU-TL集落细胞成分。 5(在第集落生成情况。 4 3天、第7天、第12天分别提取各组细胞总RNA，用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA分子的完整性。 6(通过随机引物将各时间点提取到的两组细胞总RNA逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence Quantitative Real Time Polymerize Chain Reaction，FQ-RT-PCR)进行扩增 、HOXC6、并检测脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中两组HOXC4HOXB4、HOXB6基因的表达水平。 7(随机抽取HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因通过电泳实验分别获得其在3天、7天、12天电泳图。 8(统计方法:结 2-??Ct)表示HOX4、HOXC6、HOXB4、果用DNA相对拷贝数和RNA表达相对量( HOXB6基因相对表达量，采用均数加减标准差(X?S)表示HOXC4、HOXC6、HOXB4、 -WAY方差分析，组间均数两两HOXB6基因的变化情况。进行方差齐性检验，ONE 比较用LSD法。两组间基因相对表达量比较采用配对设计t检验。由统计学软件SPSS15(0完成。 结果: 1(集落细胞的形态学鉴定，瑞(氏染色法证明所培养的是淋巴系细胞。 2(1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示RNA电泳图的5s，18s，28s三条带型整齐，无明显拖尾及弥散，说明RNA结构完整，无明显降解。 3(逆转录PCR扩增目的基因HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6和内参照GAPDH基因的cDNA的产物，与DNA分子Marker相比示扩增产物大小分别为:HOXC4为254个碱基(bp)，HOXC6212bp，HOXB4138bp，HOXB6119bp，GAPDH基因为141bp，与预定理论值大小符合。 4(人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，两组细胞的HOX基因均有规律的表达，随培养时间推移，正常组、ATRA组HOXC4、HOXC6，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显降低，而HOXB4基因表达却随培养时间推移逐渐降低。 5(与正常组比较，HOXC4、HOXC6、 HOXB4、HOXB6基因均受ATRA(6×10-8mol/l)的上调。 结论: 1(HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因在人脐血造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中均呈现规律表达，提示HOX基因与人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程密切相关。 2(人类造血干细胞向淋巴系祖细胞增殖分化过程中，HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达呈现时间上的规律性。 3(ATRA能显著上调HOXC4、HOXC6、HOXB4、HOXB6基因的表达。 《《《特别提醒》》》:正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码， 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 。如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。 " 垐垯櫃换烫梯葺铑 endstream endobj 2 x滌甸??*U躆? 跦??ǜ?l, 墀VGi?o嫅#^4K錶c&伣嘰呐q 虻U節鉡c姥 ? ?BL偤7.X 哖?]驳疗" g讍蔍`7sQ\I vs疖 ?S [J%J 鑥伍妰遠Y 魥 靤 /W鐼E v I雓1傀 霯q聊湝 ECu?knb?.:?澍羈 7?坋:;俐hEan[2 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 P6?!八帊/=櫕貵`Wp?U脞姦%?qj ?颬 儼噃壂 G邊??Vг忣鏕裚?靈模慞 擭昄X?;萕屄P,' 枍U霩R嚵蝆RC`珵墂锬襵")焟滫?ob#噡滴覇羘幥d Peブt?Pf臕?m稅盠?恁 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 v_關lm ,OMK?^'vOp牯V睟艶頛4. ?鮠4l 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 O??鼎濔%滷?腵鳐 #C?另 v|j'珬 i|葙K 羇胞Tt?"1鱳忞1? ?#1? ?# 谺? 豣? 豅? [Fb癳$ [Fb癳$ [Fb懊U虶: }獊 {u餕n梕-炯鈝羡 n馴弁?裦$k~琽腌羨鯞x8dz阞睩飫 諥蛨)傣Nc鐓 婤嬬 踋D铅,j豃杮? 03o 膰澴饿垱,3cL Y 尧3?搮4kKh費Q C幎鲟f ? 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 洭孺V饞? \囝鮶}量躞蔋/熁疆??6??a瘄伮幨?.寒癧,拲梡ф?貃'毽?狎裦&癿??紣 兩D??孧璞?*讅A ~?G哊翞漷獔苐眄\^? 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 A+y鯱\ 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 h'Q伛R濵崇@~練谰澠蕱劜(頓r )g?雴s ?l7g缣t1@苬? h蚫芦窼???? 媢J?|`兊欨^y镩飃袩?lN1囁9廥Z,薩j屻 猆??5 郜?呁%8赻 誵?揃^ 6査9?? 狥U?噶8??l抔'瓫湾?摽郒i 鯦 捶摭螨?鶶 呁菸?%`毎 磆* ?R閁b太?.?• 6柧靘発 蕯?俔刔 彟2Z皙{,笜'?D 剧>珞H鏋K x時k,褝仆稀?i攸'闥-) 荮 vJ釔絓|?殢D蘰厣?籶(柶胊?0 7姻 R?l遜ee醳B?苒?甊袝t弟l?%G趓毘N蒖與叚繜羇坯嵎憛? >U?Xd*蛥?-.臟兄+鮶嵸/@ E 厤 U閄r,塎偨匰忓綹抔搉ok怊J?l? 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 庮蔘?唍@*舶裤爞K誵?X r 蛈 翏磾寚缳nE駔殞梕 壦e櫫蹴友搇]6碪近躍邀8顪??z'?Fi ?U钮嬧撯暼坻•7/??W?3RQ碚螅T憚磴炬B- 垥n國0fw丮"eI?a揦(?^7鳁?H?弋睟 栴?霽N濎嬄盯 鼴蝔4 sxr?溣?檝皞咃 hi#?攊(?v擗谂馿鏤刊x? 偨棆鯍抰}Lyy^|y箲丽膈淢m7汍衂法瀶?鴫C??,Q貖澔?wC( 腅•僼}碓 靔奲? D|疑維d[袣箈榉,慓採紤婏(鞄-h-蜪`7I冑?'匨+蘮.- 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 懸6鶚?蚧?铒 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 鷈?叛牪?蹾 檸?? 籕