高效液相色谱法测定联苯苄唑凝胶的含量

高效液相色谱法测定联苯苄唑凝胶的含量 药物鉴定2005年第l4卷第5期 高效液相色谱法测定联苯苄唑凝胶的含量 江生,张晓松 (重庆市药品检验所,重庆400015) 中图分类号:R927.2;R986文献标识码:A文章编号:1006—4931(2005)05—0034— 01 摘要目的:建立测定联苯苄唑凝胶(必伏)中联苯苄唑含量的A-法方法:采用高效液 相色谱法(HPLC法),以甲酸一水一四氢呋喃 (79:20:1)为流动相,检测波长为254nm结果:联苯苄唑在0.1,5g范围内,峰面积与 进样量呈良好线性关系,平均加样回收率为 快速,准确,能有效控制联苯苄唑凝胶100.3%(RSD:0.58%.n=9).结论:HPLC法简便, 的质量 关键词联苯苄唑;高效液相色谱法;含量测定 DeterminationofBifonazoleinBifubyHPLC JiangSheng,ZhangXiaosong rChongqingInstituteforDrugControl,Chongqing,China400015) AbstractObjective:TodeterminethecontentsofbifonazoleinBifu.Methods:Theanalysisw ascarried()nacolumnofYMC—ODS (4.6mm×150mm,5m)withamobileofmethanol—water—tetrahydmfl】 ran(79:20:1).Thedetectionwavelengthwasat254nm.Results: Thelinearrangewas0.1, 5g(r:0.9999,n=6)forbifonazole,Theaveragerecoveryofbifonazolewas100.3%(RSD=0.5 8%,=9) Conclusion:Thismethodisrapid,simple,accurateandgoodforeontrolingthequalityofthem edicine, Keywordsbifonazole;HPLC;determination 联苯苄唑凝胶是一种高效,安全,无毒,无刺激性的广谱杀真 菌药,主要用于治疗各种皮肤真菌病.联苯苄唑凝胶为地方药品标 准收载品种,其质量采用阴离子表面活性剂滴定法,测定联苯 苄唑的含量,反应速度慢,操作烦琐,滴定终点不易把握.笔者参照 2000年版《中国药典(二部)》联苯苄唑乳膏的质量标准…,采用高 效液相色谱法(HPLC法)测定联苯苄唑凝胶的有效药物含量,现报 道如下. 1仪器与试药 岛津LC一10AT高效液相色谱仪及SAGEl[作站;联苯苄唑对 照品(含量按100%计),联苯苄唑凝胶(l%,批号:20021105) 均由重庆华邦制药有限公司提供;甲醇和四氧呋喃均为色谱纯,水 为重蒸馏水. 2方法与结果 2.1色谱条件 YMC—ODS色谱柱(4.6mm×150mm,5m),流动相为甲 醇一水一四氢呋喃(79:20:1)llI,检测波长为254nm,流速 为10mL/min.分别取供试品溶液和辅料溶液各20注入液相 色谱仪,色谱图(见图1). ———Jl———一 ABC A.辅料溶液B.供试品溶液C.对照品溶液 图1高效液相色谱图 2.2线性关系考察 精密称定经105%干燥至恒重的联苯苄唑对照品适量,用甲醇 溶解制成每1mL中约含联苯苄唑500g的溶液,作为对照品贮备 溶液.精密量取对照品贮备溶液适量,用甲醇定量稀释制成浓度为 5.0,12.5,25,50,125,250~g/mL的系列标准溶液,摇匀,分别精 密量取20L,注人液相色谱仪,记录色谱图.以峰面积为纵坐 标,进样量C(mg)为横坐标,进行线性回归计算.结果进样量在 0.1,5g的范围内与色谱峰面积线性关系良好,回归方程为= 2156.6C+32618.48,r=0.9999(n=6). ? 34 23最小检出量 取联苯苄唑对照品适量,用甲醇溶解制成每1mL中含联苯苄 唑0.025g的溶液,取20L注人液相色潜仪,记录色谱图.按信 噪比等于3计算,测得最小检出量为0.32ng 24加样回收率试验 精密称定已知含量的供试品9份,每份1.25g,分别置200mL 量瓶中,分成3组,每组各精密加人对照品贮备液2,5,l0mL,加甲 醇溶解并稀释至刻度,摇匀,离心,精密节取20L注入液相色谱 仪,记录色谱图,按回归方程计算网收率,结果几尢表1. 表1加样回收率测定结果(n=9) 25精密度试验 连续进样6次测定.结果其峰面积的 取同一份对照品溶液, RSD为0.57%,显示精密度良好. 26稳定性试验 取同一份供试品溶液,分别于0,l,2,4,8h进样测定.结果其 峰面积的RSD为0.83%,显示供试品溶液在8h内稳定. 2.7样品含量测定 取本品适量,精密称定,以甲醇溶解并稀释成每lmL中含联苯 苄唑25g的溶液,摇匀,离 心,精密量取上清液20L注 人液相色谱仪,记录色谱图, 按外标法以峰面积计算.另取 本品适量,精密称定,用阴离 子表面活性剂滴定法测定联 表2样品含量测定结果(n=5) 批号令量_()一 HPIC法滴定法 20021001l01.0ll02.16 20021002l00.93l02.42 20021003100.49102.32 中国药业ChinaPharmaceuticals 2005年第14卷第5期 克拉维酸钾及其复方制剂的有关物质测定药物鉴定 支立娟,王连水,高燕霞 (1.河北省儿童医院药房,河北石家庄050051;2.河北省药品检验所,河北石家庄050011) 中图分类号:R927.12;R978.11文献标识码:A文章编号:1006—4931(2005)05—0035—02 摘要目的:采用高效液相色谱法(HPIC法)控制克拉维酸钾及其复方制剂的有关物质.方法:使用ChromasilCrs柱(150Himx4.6mm, 5um)克拉维酸钾采用线性梯度洗脱,流动相A为0.05mol/L的磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值=4.0),B为0.05mol/L的磷酸二 氢钠溶液(用磷酸调节pH值=4.0)一甲醇(50:50),检测波长为230nm,柱温为40?.阿莫西林/克拉维酸钾的流动相为磷酸盐缓冲液一 甲醇(95:5),检测波长为220nm结果:HP[C法可有效控制克拉维酸钾及其复方制剂有关物质的质量.结论:HPLC法准确,灵敏度高,建 议可进入药典. 关键词克拉维酸钾;阿莫西林/克拉维酸钾;高效液相色谱法 DeterminationofRelatedSubstancesofClavulanatePotassiumandItsCompoundPreparati on ZhLiiuan.ngLianshui.GaoYanxia rJ.DepartmentofPharmat'y,ChildrenHospitalHebei,ShOiazhuang,Hebei,China050051; 2.HebeiProvincialInstituteforDrugControl,Sh~iazhuang,HebeiChina050011) AbstractObjectlve:Tocontroltherelate(1substancesofclavulanatepotassiumanditscompo undpreparationbyHPLC,Methods:The HPLCwiththeChromasilCl8column(150mmx4.6mm.5txm)wasused.Clavulanatepotass iumused:MobilephaseAwas0.05nol/L sodiumdihydrogenphosphate(adjustedpHto4.0withphosphoricacid),MobilephaseBwas 0.05mol/Lsodiumdihydrogenphosphate (adjustedpHto4.0withphospho~cacid)一 methanol(50:50),detectedat230nm,thecolumntemperaturewas40?.Amoxicillin/clavulanate potassiumused:Mobilephasewasphosphatesolution— methanol(95:5),detectedat220nm.Conelution:Themethodsisaccurate.sensitive andcanbeusedtomonitnrtherelatedsu1)stancesofthemedicines. Keywordsclavulanatepotassium;amoxicillin/clavulanatepotassium;HPLC 克拉维酸钾是一类吖逆性竞争型13一内酰胺酶抑制剂,单独 应用无效,常与青霉素类药物联合应用以提高疗效,最常用的是阿 莫西林/克拉维酸钾.无论是克拉维酸钾还是其复方制剂,由于克 拉维酸钾本身的不稳定性,都必须对它们进行有关物质的监测,而 《中国药典》尚未收载..笔者探讨并试验了一些方法,能有效地对产 品中有关物质进行准确监控 1仪器与试药 仪器:岛津LC—l0A色谱系统,色谱柱为ChromasilC柱 (150mm×4.6inn,5txmJ, 酞药:克拉维酸钾对照品(中国药品牛物制品检定所,批号为 l30429—200203,含量为95.0%);阿莫西林对照品(中国药品生物 制品检定所,批号为0409—9907,含量为84.5%);克拉维酸钾原 料(石药集团中润药业有限公司,批号为03l202);克拉维酸钾一二 氧化硅,克拉维酸钾一微晶纤维素(张家口制药集团有限公司,批 号分别为0309l2,030706);注射用阿萸西林钠/克拉维酸钾及阿 莫西林/克拉维酸钾片(华北制药集团有限公司,批号分别为 03l005,03l2l2);磷酸二氧钠,磷酸均为国产分析纯;甲醇,乙腈为 色谱纯. 2克拉维酸钾的有关物质测定 21试验条件… 苯苄唑的含量,结果见表2. 3讨论 31流动相的选择:若提高流动相中有机相比例,则出峰较快,杂 质与主峰未完全分开;若提高流动相中水相比例,则出峰较晚,柱 效降低,故选择本试验的流动相. 32溶剂的选择:曾选用流动相溶解样品,但不能完全溶解,故选 择用甲醇溶解样品. 中国药业ChinaPharmaceuticals 系统ll1I:流动相A为0.05mol/1的磷酸二氢钠溶液(用磷酸 调节pH值=4.0),流动相B为0.05mol/L的磷酸二氢钠溶液(用 磷酸调节pH值=4.0)一甲醇(50:50);检测波长为230nm,柱温 为40?;流速:1.0mL/min.进样量:20uI. 22溶液的制备 采用系统l,用 对照品溶液:精密称取克拉维酸钾对照品适量, 流动相A溶解并制成浓度为0.1mg/ml,的溶液,作为对照品溶 液,配制后立即进样. 供试品溶液:精密称取供试品适节,用流动相A溶解并制成浓 度约为l0mg/mL克拉维酸钾的溶液,作为供试品溶液,配制后立 即进样. 23系统适用性试验 取阿莫西林和克拉维酸钾对照品适量,制成浓度各为0.1mg/mL 的混合溶液,注入液相色谱仪,记录色谱,克拉维酸钾和阿莫西 林的相对保留时间分别为1.0和2.5min,理论板数按克拉维酸钾 峰计算为6892,克拉维酸钾色谱峰和阿莫西林色谱峰的分离度为 13,见图l,3.最低检出限为l0ng. 24样品测定结果 取克拉维酸钾原料,克拉维酸钾一二氧化硅,克拉维酸钾一微 晶纤维素各3批,按上述方法进行试验,结果见表l. 33在阴离子表面活性剂滴定法操作过程中,由于振摇和滴定终 点的控制不易把握,反应速度较慢,使测定结果出现了偏差.而高 效液相色谱法分离效果好,准确度高,便于控制本品的质量. 参考文献: [1】国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M】.北京:化学工业出 版社.2OO0:283. (收稿日期:2004—04—30;修回日期:2004—08—12) ?35?