[doc格式] HPLC测定双黄连口服液中连翘苷的含量实例
HPLC测定双黄连口服液中连翘苷的含量
实例
齐齐哈尔医学院20O9年第3O卷第8期
HPLC测定双黄连口服液中连翘苷的含量实例
刘军刘哲丞孙辑凯
【摘要】目的验证双黄连口服液中连翘苷的测定方法方法采用HPIC法测定双黄连口服
液中连翘苷的含量.结果分别连续进样(10.0?1)5次,测得连翘苷色谱峰峰面积336756,336672,
337035,336062,336750,平均值336655,RSD0.1.结论所建立的方法简便,准确,可靠,可作为双
黄连口服液的质量控制方法.
【关键词】双黄连口服液连翘苷HPIC含量测定
双黄连口服液主要成分为金银花,黄芩,连翘,为中医常
用的清热解毒药,具有疏风解表,清热解毒功效.用于外感风
热所致的感冒,症见发热,咳嗽,咽痛.为了有效控制双黄连
口服液的内在质量,本研究建立了双黄连口服液中连翘苷的
HPIC含量测定方法,主要针对其中的连翘成分进行测定,即
每1ml双黄连口服液以连翘苷(C.H.Oj)计,并对3批样品
进行了含量测定.
1仪器与试药
岛津sHIMADzuIc一1OA高效液相色谱仪(浙大N一
3000工作站,紫外检测器);梅特勒?托利多天平METTLER
XS205DU0.01mg/200g;KQ一800KDE超声波清洗器(昆
山).连翘苷对照品购自中国药品生物制品检定所(批号为
0821,200607),甲醇(色谱纯),水为蒸馏水.
2方法与结果
2.1色谱条件Ultimate一C18色谱柱(4.6mm×
250mm,5”m),流动相乙腈一水(25:75),流速1.0ml/min,
检测波长277nm,柱温为室温,理论塔板数以连翘苷峰计应
不低于3500.
2.2对照品溶液的制备取连翘苷对照品适量,精密称定,
加5O甲醇制成每1ml含300g的对照品溶液.
2.3样品溶液的制备精密量取本品1ml,置中性氧化铝柱
(1O0,12O目,6g,内径1cm)上,用70乙醇40ml洗脱,收
集洗脱液,浓缩至于,残渣加50甲醇适量,温热使溶解,转
移至1Oml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀即得.
2.4线性关系的考察精密称取连翘苷12.8mg,稀释200
倍,分别精密吸取连翘苷对照品溶液2.0,4.0,6.0,8.0,
10.0m1分别置1Om1的容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,按上述
连翘苷色谱条件测定峰面积.对照品浓度(X)为横坐标,以
色谱峰峰面积(Y)为纵坐标,绘制
曲线并进行线性回归
计算.连翘苷:Y一5243501X+1057,r一0.998,线性范围
0.014,O.072mg/ml范围内线性关系良好.
2.5精密度试验精密吸取样品溶液10.0l,分别连续进
样5次,测得连翘苷色谱峰峰面积336756,336672,337035,
336062,336750,平均值为336655,RSD0.1.
2.6稳定性试验精密吸取样品溶液10.0l,分别在制备
后0,4,8,12,24,24h进样,测定连翘苷色谱峰峰面积,计算
峰面积相对标准偏差RSD分别为1.67,表明样品溶液在
48h内稳定性均良好.
作者单位:齐齐哈尔医学院
邮编161006收稿日期2009—03—04
?977?
2.7重复性试验分别取同一批双黄连口服液,按样品测定
项下方法,各连续测定5次,得连翘苷平均含量为0.042mg/
ml,RSD0.56(n一5).
2.8样品测定分别精密称取3批双黄连口服液,按样品溶
液的制备项下方法分别制备样品溶液;精密吸取样品溶液
10.01,连翘苷对照品溶液10.0l,注入液相色谱仪,依法测
定,计算连翘苷的含量.图1为样品溶液谱图,图2为对照品
溶液谱图.
嚣
薰
让
嚣
:
三
_’
Ol23’66re
时一7.280(.in).电压52.037)
圈I样晶溶液谱圈之一
0I23455T89101I12131415l6
时?8.948(Iin).电压52.037()对一(sain)
图2对照品溶液谱图
3讨论
3.1在连翘成分分析方面前人已打下坚实的基础,本研究在
此基础上侧重学生实验,适合于医学院校药学相关专业药物
分析课,也同样适用于连翘药材中连翘苷含量的测定.
3.2连翘中除连翘苷外还含有桦木酸(betulinicacid),连翘
甙(phillyrin),牛蒡子甙(aretiin),松脂素(pinoresino1),罗汉
松脂甙(matairesinosinoside)等成分.连翘苷很不稳定,在制备
过程中条件偏酸或偏碱以及温度过高,都易引起分解.使用时溶
液配制后应立即用黑纸包裹,放于冰箱内储存,试样在冰箱内储
存不易超过7天,否则峰型严重拖尾,其时连翘苷已分解.
昌宝;;??啦?埔”00?O吨’r
一童嘲叠