拟黑多刺蚁乙醇提取物中降低小鼠血清尿酸水平活性部位的筛选与化学成分分析

拟黑多刺蚁乙醇提取物中降低小鼠血清尿酸水平活性部位的筛选与化学成分分析 拟黑多刺蚁乙醇提取物中降低小鼠血清尿酸水平活性 部位的筛选与化学成分分析 中 国 药 理 学 与 毒 理 学 杂 志 2 0 1 3 年 8 月 第 2 7 卷 第 4 期 C h i n J P h a r m a c o l T o x i c o l , V o l 2 7 , N o 4 , A u g 2 0 1 3 ? 6 7 3 ? 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 中 降 低 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 活 性 部 位 的 筛 选 与 化 学 成 分 分 析 1 2 1 1 1 1 1 ? ? 韦 桂 宁 , 苏 启 表 , 何 飞 , 曾 宪 彪 , 牙 启 康 , 吕 纪 华 , 苏 华 , 1 1 1 卢 文 杰 , 何 开 家 , 韦 宝 伟 ( 1 . 广 西 中 医 药 研 究 院 药 理 学 研 究 所 , 广 西 南 宁 5 3 0 0 2 2 ; 2 . 广 东 药 学 院 健 康 学 院 , 广 东 广 州 5 1 0 0 0 6 ) 摘 要 : 目 的 研 究 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 ( E E P R ) 中 降 低 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 的 活 性 部 - 1 位 及 其 主 要 化 学 成 分 。 方 法 昆 明 小 鼠 分 别 i g 给 予 别 嘌 醇 0 . 0 4 g ? k g ( 阳 性 对 照 ) , E E P R 0 . 1 2 8 , 0 . 2 5 6 - 1 - 1 - 1 和 0 . 5 1 2 g ? k g , E E P R 的 石 油 醚 部 位 0 . 0 7 9 和 0 . 1 5 8 g ? k g , 乙 酸 乙 酯 部 位 0 . 0 5 1 和 0 . 1 0 2 g ? k g , 正 - 1 - 1 丁 醇 部 位 0 . 0 5 2 和 0 . 1 0 4 g ? k g 和 水 部 位 0 . 0 4 2 和 0 . 0 8 4 g ? k g , 每 天 1 次 , 连 续 1 2 d 。 正 常 对 照 组 和 模 型 对 照 组 i g 给 予 等 体 积 含 0 . 3 % 吐 温 ? 8 0 的 水 溶 液 。 末 次 给 药 1 h 后 除 正 常 对 照 组 外 , 其 余 各 组 小 鼠 均 i p - 1 给 予 次 黄 嘌 呤 0 . 6 g ? k g 。 1 h 后 眼 眶 静 脉 丛 取 血 , 用 磷 钨 酸 比 色 法 测 定 血 清 尿 酸 水 平 , 酶 比 色 法 测 定 黄 嘌 呤 氧 化 酶 活 性 。 对 降 低 血 清 尿 酸 水 平 的 活 性 部 位 进 行 G C ? M S 分 析 , 鉴 定 其 主 要 化 学 成 分 。 结 果 高 尿 酸 - 1 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 与 正 常 对 照 组 比 较 明 显 升 高 ( P < 0 . 0 1 ) , 别 嘌 醇 0 . 0 4 g ? k g , E E P R 0 . 2 5 6 和 - 1 - 1 0 . 5 1 2 g ? k g 可 明 显 降 低 该 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 ( P < 0 . 0 5 ) , 分 别 由 模 型 组 的 ( 4 6 4 ? 1 4 3 ) μ m o l ? L 下 降 到 - 1 - 1 2 7 3 ? 8 0 , 3 4 6 ? 8 5 和 ( 3 0 2 ? 7 2 ) m o ? l L ( P < 0 . 0 5 ) 。 E E P R 中 石 油 醚 部 位 0 . 0 7 9 和 0 . 1 5 8 g ? k g 可 显 著 降 μ - 1 - 1 低 该 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 , 分 别 由 模 型 组 的 ( 4 4 6 ? 1 3 9 ) m o ? l L 下 降 到 3 2 8 ? 1 0 0 和 ( 3 1 4 ? 1 1 2 ) m o l ? L μ μ - 1 ( P < 0 . 0 5 ) , 其 他 部 位 各 剂 量 组 对 血 清 尿 酸 水 平 均 无 明 显 影 响 。 石 油 醚 部 位 0 . 1 5 8 g ? k g 可 明 显 抑 制 黄 嘌 呤 氧 - 1 - 1 化 酶 活 性 , 由 模 型 对 照 组 的 ( 1 8 ? 8 ) U ? L 下 降 到 ( 1 1 ? 5 ) U ? L ( P < 0 . 0 5 ) 。 G C ? M S 分 析 结 果 表 明 , 石 油 醚 部 位 的 脂 肪 酸 中 , 反 式 十 八 碳 烯 酸 甲 酯 占 6 0 . 7 7 % , 十 六 烷 酸 甲 酯 占 1 8 . 9 9 % , 十 六 碳 烯 酸 甲 酯 占 9 . 3 1 % 。 结 论 E E P R 中 石 油 醚 部 位 可 降 低 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 , 不 饱 和 脂 肪 酸 为 石 油 醚 部 位 脂 肪 酸 的 主 要 成 分 。 关 键 词 : 拟 黑 多 刺 蚁 ; 高 尿 酸 血 症 ; 尿 酸 ; 黄 嘌 呤 氧 化 酶 中 图 分 类 号 : R 2 8 5 文 献 标 志 码 : A 文 章 编 号 : 1 0 0 0 ? 3 0 0 2 ( 2 0 1 3 ) 0 4 ? 0 6 7 3 ? 0 5 D O I : 1 0 . 3 8 6 7 / j . i s s n . 1 0 0 0 ? 3 0 0 2 . 2 0 1 3 . 0 4 . 0 1 2 痛 风 是 以 嘌 呤 代 谢 或 排 泄 失 常 而 导 致 血 尿 酸 升 高 归 肝 、 肾 经 。 具 补 肾 益 精 、 通 经 活 络 和 解 毒 消 肿 的 功 并 伴 有 结 缔 组 织 内 尿 酸 钠 结 晶 沉 着 为 特 征 的 代 谢 性 疾 效 , 主 治 肾 虚 头 晕 耳 鸣 、 失 眠 多 梦 、 阳 痿 遗 精 、 风 湿 痹 [ 1 ] 病 。 痛 风 不 仅 会 引 起 痛 风 性 关 节 炎 、 生 活 质 量 下 降 痛 、 中 风 偏 瘫 、 手 足 麻 木 、 红 斑 狼 疮 和 毒 蛇 咬 伤 等 症 。 前 期 研 究 结 果 表 明 , 拟 黑 多 刺 蚁 具 有 良 好 的 抗 痛 风 甚 至 残 疾 , 而 且 还 是 引 起 肾 病 变 、 糖 尿 病 、 心 血 管 疾 病 [ 2 - 4 ] 作 用 , 其 醇 提 物 可 显 著 降 低 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 的 和 恶 性 肿 瘤 等 的 危 险 因 素 。尿 酸 升 高 , 是 痛 风 的 [ 5 ] 血 尿 酸 水 平 。 为 进 一 步 研 究 拟 黑 多 刺 蚁 抗 痛 风 基 础 病 因 。 因 此 , 控 制 尿 酸 水 平 是 防 治 痛 风 的 关 键 。 作 用 的 机 制 及 其 物 质 基 础 , 本 研 究 通 过 i p 给 予 小 鼠 拟 黑 多 刺 蚁 或 拟 黑 多 翅 蚁 ( P o l y r h a c h i s v i c i n a 次 黄 嘌 呤 制 备 高 尿 酸 血 症 模 型 , 观 察 拟 黑 多 刺 蚁 乙 R o g e r ) , 为 蚁 科 昆 虫 的 干 燥 全 体 , 味 咸 、 酸 , 性 平 , 醇 提 取 物 的 石 油 醚 部 位 、 乙 酸 乙 酯 部 位 、 正 丁 醇 部 位 和 水 部 位 对 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 的 影 基 金 项 目 : 广 西 壮 族 自 治 区 卫 生 厅 中 医 药 科 技 专 项 响 , 并 对 降 低 血 清 尿 酸 水 平 的 活 性 部 位 的 脂 肪 酸 成 ( G Z P T 1 3 ? 2 9 ) ; 广 西 自 然 科 学 基 金 ( 2 0 1 1 G X N S F A 0 1 8 2 5 8 ) ; 广 西 卫 生 厅 重 点 项 目 ( 重 2 0 1 1 0 4 9 ) 分 进 行 G C ? M S 分 析 , 了 解 其 主 要 化 学 成 分 。 作 者 简 介 : 韦 桂 宁 ( 1 9 7 3 - ) , 男 , 副 主 任 药 师 , 硕 士 , 主 要 从 事 中 药 药 理 学 研 究 ; 苏 启 表 ( 1 9 7 4 - ) , 男 , 讲 师 , 1 材 料 与 方 法 博 士 , 主 要 从 事 药 代 动 力 学 和 药 物 基 因 组 学 研 究 。 1 . 1 动 物 、 药 物 、 试 剂 和 主 要 仪 器 通 讯 作 者 : 韦 桂 宁 , E ? m a i l : w e i g u i n i n g 2 0 0 4 @ 1 6 3 . c o m , T e l : ( 0 7 7 1 ) 5 8 6 9 1 0 2 昆 明 种 小 鼠 , 雄 性 , 体 质 量 1 8 ~ 2 2 g , S P F 级 , ? 共 同 第 一 作 者 。 由 广 西 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心 提 供 , 动 物 许 可 证 号 : 书 书 书? 6 7 4 ? 中 国 药 理 学 与 毒 理 学 杂 志 2 0 1 3 年 8 月 第 2 7 卷 第 4 期 C h i n J P h a r m a c o l T o x i c o l , V o l 2 7 , N o 4 , A u g 2 0 1 3 S C X K ( 桂 ) 2 0 0 9 ? 0 0 0 2 。 拟 黑 多 刺 蚁 粉 , 购 自 广 西 南 1 0 m l , 振 荡 混 匀 , 在 4 0 ? 下 恒 温 水 浴 3 0 m i n 加 入 超 宁 市 三 乐 滋 补 保 健 品 开 发 中 心 , 经 广 西 中 医 药 研 究 院 纯 水 2 0 m l , 静 置 , 待 分 层 清 晰 后 取 上 清 液 , 用 丙 酮 何 开 家 教 授 鉴定 , 品种为 P . v i c i n a R o g e r 。 次 黄 嘌 呤 稀 释 1 0 倍 作 为 色 谱 分 析 样 品 。 G C 条 件 : H P ? 5 M S ( h y p o x a n t h i n e ) , S i g m a 公 司 ; 别 嘌 醇 ( a l l o p u r i n o l ) 石 英 毛 细 管 柱 ( 3 0 m m × 0 . 2 5 m m × 0 . 2 5 μ m ) ; 柱 - 1 片 , 重 庆 科 瑞 制 药 有 限 责 任 公 司 , 批 号 3 1 9 0 0 2 ; 尿 温 1 5 0 ~ 2 6 0 ? , 程 序 升 温 3 ? ? m i n ; 柱 流 量 为 - 1 酸 测 定 试 剂 盒 , 长 春 汇 力 生 物 技 术 有 限 公 司 ; 黄 嘌 呤 1 . 0 m ? l m i n ; 进 样 口 温 度 2 5 0 ? ; 柱 前 压 1 0 0 k P a ; 进 样 量 0 . 1 0 l ; 分 流 比 1 0 ? 1 ; 载 气 为 高 纯 氦 气 。 氧 化 酶 活 性 测 定 试 剂 盒 , 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 。 μ 7 2 2 型 分 光 光 度 计 , 上 海 第 三 分 析 仪 器 厂 。 M S 条 件 : 电 离 方 式 E I ; 电 子 能 量 7 0 ; 传 输 线 温 度 1 . 2 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 及 其 不 同 极 性 部 位 萃 2 5 0 ? ; 离 子 源 温 度 2 3 0 ? ; 四 极 杆 温 度 1 5 0 ? ; 质 量 取 物 制 备 范 围 3 5 ~ 5 0 0 ; 采 用 W i l e y 7 n . l 标 准 谱 库 计 算 机 检 索 定 性 。 取 拟 黑 多 刺 蚁 粉 1 0 0 0 g , 用 无 水 乙 醇 浸 泡 , 水 浴 1 . 5 统 计 学 分 析 回 流 提 取 3 次 , 合 并 回 流 液 , 水 浴 浓 缩 至 无 醇 味 , 得 实 验 结 果 数 据 用 x ? s 表 示 , 采 用 S P S S 1 1 . 0 1 2 8 g 棕 褐 色 稠 膏 ( 得 膏 率 为 1 2 . 8 % ) 。 分 别 用 等 体 系 统 软 件 , 组 间 比 较 采 用 单 因 素 方 差 分 析 , P < 0 . 0 5 积 石 油 醚 ( 6 0 ~ 9 0 ? ) 、 乙 酸 乙 酯 、 正 丁 醇 和 水 萃 取 认 为 差 异 具 有 统 计 学 意 义 。 3 次 , 分 别 回 收 溶 剂 , 水 浴 浓 缩 后 得 到 石 油 醚 部 位 3 9 . 5 1 g , 乙 酸 乙 酯 部 位 2 5 . 6 4 g , 正 丁 醇 部 位 2 5 . 8 3 g 和 水 部 位 2 0 . 7 6 g 。 各 部 位 均 用 吐 温 ? 8 0 乳 2 结 果 化 配 制 成 相 应 浓 度 备 用 , 其 中 吐 温 ? 8 0 含 量 为 0 . 3 % 。 2 . 1 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 对 高 尿 酸 血 症 模 型 小 1 . 3 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 和 黄 嘌 呤 鼠 尿 酸 水 平 的 影 响 氧 化 酶 活 性 的 测 定 由 表 1 所 示 , 与 正 常 对 照 组 比 较 , 模 型 组 小 鼠 血 清 小 鼠 6 0 只 , 随 机 分 为 6 组 , 即 正 常 对 照 组 、 模 尿 酸 水 平 显 著 升 高 ( P < 0 . 0 1 ) ; 与 模 型 组 比 较 , 别 嘌 醇 - 1 型 组 、 阳 性 对 照 药 别 嘌 醇 0 . 0 4 g ? k g 组 、 拟 黑 多 刺 - 1 - 1 0 . 0 4 g ? k g , 乙 醇 提 取 物 0 . 2 5 6 和 0 . 5 1 2 g ? k g 可 明 - 1 蚁 乙 醇 提 取 物 0 . 1 2 8 , 0 . 2 5 6 和 0 . 5 1 2 g ? k g ( 相 显 降 低 血 清 尿 酸 水 平 ( P < 0 . 0 5 ) 。 - 1 当 于 生 药 1 , 2 和 4g ? k g ) 组 , 每 组 1 0 只 。 i g 给 药 , 每 天 1 次 , 正 常 对 照 组 和 模 型 组 i g 给 予 等 体 积 T a b . 1 E f f e c t o f e t h a n o l e x t r a c t o f P o l y r h a c h i s v i c i n a 含 0 . 3 % 吐 温 ? 8 0 的 水 溶 液 , 连 续 1 2 d 。 末 次 给 药 R o g e r ( E E P R ) o n s e r u m l e v e l o f u r i c a c i d o f h y p e r u r i ? - 1 1 h 后 i p 给 予 次 黄 嘌 呤 0 . 6 g ? k g , 1 h 后 眼 眶 静 脉 c e m i a m o d e l m i c e [ 6 - 7 ] - 1 丛 取 血 , 1 0 0 6 × g 离 心 1 0m i n 取 血 清 , 用 尿 酸 G r o u p U r i c a c i d / μ m o ? l L 测 定 试 剂 盒 磷 钨 酸 比 色 法 测 定 血 清 尿 酸 含 量 。 N o r m a l c o n t r o l 1 7 0 ? 7 3 另 取 小 鼠 1 1 0 只 , 雄 性 , 随 机 分 为 1 1 组 , 即 正 ? ? H y p e r u r i c e m i a m o d e l 4 6 4 ? 1 4 3 - 1 常 对 照 组 、 模 型 组 、 阳 性 对 照 别 嘌 醇 0 . 0 4 g ? k g # A l l o p u r i n o l 0 . 0 4 2 7 3 ? 8 0 - 1 组 、 石 油 醚 部 位 0 . 0 7 9 和 0 . 1 5 8 g ? k g 组 、 乙 酸 乙 E E P R 0 . 1 2 8 3 8 4 ? 1 0 5 - 1 酯 部 位 0 . 0 5 1 和 0 . 1 0 2 g ? k g 组 、 正 丁 醇 部 位 # 0 . 2 5 6 - 1 3 4 6 ? 8 5 0 . 0 5 2 和 0 . 1 0 4 g ? k g 组 、 水 部 位 0 . 0 4 2 和 # - 1 - 1 0 . 5 1 2 3 0 2 ? 7 2 0 . 0 8 4 g ? k g 组 ( 均 相 当 于 生 药 2 和 4 g ? k g ) , 每 T h e m i c e w e r e i g g i v e n w a t e r s o l u t i o n c o n t a i n i n g 0 . 3 % T w e e n ? 8 0 o r 组 1 0 只 。 i g 给 药 , 每 天 1 次 , 正 常 对 照 组 和 模 型 组 - 1 - 1 a l l o p u r i n o l 0 . 0 4 g ? k g o r E E P R 0 . 1 2 8 , 0 . 2 5 6 a n d 0 . 5 1 2 g ? k g , 小 鼠 i g 给 予 等 体 积 含 0 . 3 % 吐 温 ? 8 0 的 水 溶 液 , 连 o n c e d a i l y , f o r 1 2 d t h e n t h e m i c e w e r e i p g i v e n h y p o x a n t h i n e - 1 ? ? 0 . 6 g ? k g 1 h a f t e r t h e f i n a l a d m i n i s t r a t i o n . x ? s , n = 1 0 . P < 续 1 2 d 。 按 文 献 [ 8 - 9 ] 方 法 , 末 次 给 药 1 h 后 i p 给 # 0 . 0 1 , c o m p a r e d w i t h n o r m a l c o n t r o l g r o u p ; P < 0 . 0 5 , c o m p a r e d - 1 予 次 黄 嘌 呤 0 . 6 g ? k g , 1 h 后 眼 球 取 血 , 1 0 0 6 × g w i t h h y p e r u r i c e m i a m o d e l g r o u p . 离 心 1 0 m i n 取 血 清 , 黄 嘌 呤 氧 化 酶 活 性 磷 钨 酸 比 色 法 测 定 血 清 尿 酸 含 量 , 黄 嘌 呤 氧 化 酶 活 性 按 照 试 剂 2 . 2 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 不 同 部 位 对 高 尿 酸 血 盒 说 明 测 定 。 症 模 型 小 鼠 尿 酸 水 平 和 黄 嘌 呤 氧 化 酶 活 性 的 影 响 1 . 4 G C ? M S 分 析 石 油 醚 活 性 部 位 中 的 脂 肪 酸 成 分 表 2 结 果 表 明 , 与 正 常 对 照 组 比 较 , 模 型 组 小 鼠 取 石 油 醚 活 性 部 位 , 加 苯 ? 石 油 醚 ( 1 ? 1 , V / V ) 血 清 尿 酸 水 平 明 显 升 高 ( P < 0 . 0 5 ) 。 与 模 型 组 比 - 1 - 1 2 0 m l 使 之 溶 解 , 再 加 K O H ? M e O H 溶 液 ( 0 . 4 m o ? l L ) 较 , 石 油 醚 部 位 0 . 0 7 9 和 0 . 1 5 8 g ? k g 可 显 著 抑 制中 国 药 理 学 与 毒 理 学 杂 志 2 0 1 3 年 8 月 第 2 7 卷 第 4 期 C h i n J P h a r m a c o l T o x i c o l , V o l 2 7 , N o 4 , A u g 2 0 1 3 ? 6 7 5 ? 由 次 黄 嘌 呤 引 起 的 血 清 尿 酸 水 平 升 高 ( P < 0 . 0 5 ) ; 2 . 3 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 石 油 醚 部 位 中 的 脂 肪 - 1 酸 成 分 0 . 1 5 8 g ? k g 可 显 著 抑 制 黄 嘌 呤 氧 化 酶 活 性 ( P< 对 石 油 醚 部 位 进 行 G C ? M S 分 析 的 结 果 如 图 1 0 . 0 5 ) 。 乙 酸 乙 酯 部 位 、 正 丁 醇 部 位 和 水 部 位 无 明 所 示 。 各 色 谱 峰 相 应 的 质 谱 图 经 人 工 解 析 及 N I S T 2 7 显 影 响 。 由 此 表 明 , 石 油 醚 部 位 为 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 和 N I S T l 4 7 谱 库 检 索 定 性 , 采 用 面 积 归 一 法 计 算 各 成 提 取 物 中 降 低 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 的 分 的 相 对 百 分 含 量 , 最 终 鉴 定 出 1 2 种 脂 肪 酸 , 具 体 分 活 性 部 位 。 子 式 和 含 量 见 表 3 。 其中 9 种 饱 和 脂 肪 酸 及 其 酯 , 占 T a b . 2 E f f e c t o f d i f f e r e n t f r a c t i o n s f r o m E E P R o n s e r ? 总 含 量 的 2 5 . 0 4 % ; 3 种 不 饱 和 脂 肪 酸 , 即 十 六 碳 烯 酸 u m l e v e l o f u r i c a c i d a n d x a n t h i n e o x i d a s e a c t i v i t y o f 甲 酯 ( 棕 榈 油 酸 甲 酯 ) 、 十 八 碳 二 烯 酸 甲 酯 和 反 式 十 八 h y p e r u r i c e m i a m o d e l m i c e 碳 烯 酸 甲 酯 , 占 总 含 量 的 7 1 . 1 4 % , 其 中 单 不 饱 和 反 U r i c a c i d / X a n t h i n e o x i d a s e G r o u p - 1 - 1 式 脂 肪 酸 十 八 碳 烯 酸 甲 酯 占 6 0 . 7 7 % 。 m o ? l L a c t i v i t y / U ? L μ N o r m a l c o n t r o l 1 7 4 ? 7 9 1 4 ? 4 ? ? T a b . 3 M o l e c u l a r f o r m u l a a n d r e l a t i v e c o n t e n t o f f a t t y H y p e r u r i c e m i a m o d e l 4 4 6 ? 1 3 9 1 8 ? 8 a c i d c o m p o u n d s i n P E F f r o m E A P R # ? A l l o p u r i n o l 0 . 0 4 2 3 6 ? 1 0 7 1 1 ? 5 M o l e c u l a r R e l a t i v e C o m p o u n d # P E F 0 . 0 7 9 1 4 ? 4 3 2 8 ? 1 0 0 f o r m u l a c o n t e n t / % # # C H O 0 . 1 5 8 3 1 4 ? 1 1 2 1 1 ? 5 M e t h y l l a u r a t e 0 . 1 2 1 3 2 6 2 C H O M e t h y l t e t r a d e c a n o a t e 0 . 6 0 E A F 0 . 0 5 1 3 7 9 ? 1 0 6 1 3 ? 4 1 5 3 0 2 C H O M e t h y l p a l m i t o l e a t e 9 . 3 1 0 . 1 0 2 3 3 8 ? 1 1 1 1 5 ? 4 1 7 3 2 2 C H O M e t h y l h e x a d e c a n o a t e 1 8 . 9 9 1 7 3 4 2 B A F 0 . 0 5 2 3 3 9 ? 9 9 1 4 ? 5 C H O M e t h y l 1 4 ? m e t h y l h e x a d e c a n o a t e 0 . 0 9 1 8 3 6 2 0 . 1 0 4 3 5 5 ? 1 1 0 1 4 ? 5 C H O M e t h y l 2 ? h e x y l ? c y c l o p r o p y l o c t a n o a t e 0 . 2 2 1 8 3 2 2 W E F 0 . 0 4 2 3 4 3 ? 1 0 3 1 4 ? 3 C H O M e t h y l h e p t a d e c a n o a t e 0 . 0 5 1 8 3 6 2 0 . 0 8 4 3 3 1 ? 1 0 8 1 4 ? 4 C H O M e t h y l o c t a d e c a d i e n o a t e 1 . 0 6 1 9 3 4 2 S e e T a b . 1 f o r t h e m o u s e t r e a t m e n t . T h e m i c e w e r e i g g i v e n - 1 p e t r o l e u m e t h e r f r a c t i o n ( P E F ) 0 . 0 7 9a n d 0 . 1 5 8g ? k g o r e t h y l C H O M e t h y l t r a n s v a c c e n a t e 6 0 . 7 7 1 9 3 6 2 - 1 a c e t a t e f r a c t i o n ( E A F ) 0 . 0 5 1 a n d 0 . 1 0 2 g ? k g o r b u t a n o l f r a c t i o n C H O M e t h y l o c t a d e c a n o a t e 4 . 5 5 1 9 3 8 2 - 1 ( B A F ) 0 . 0 5 2 a n d 1 . 0 4 g ? k g o r w a t e r f r a c t i o n ( W E F ) 0 . 0 4 2 C H O - 1 ? M e t h y l e i c o s a n o a t e 0 . 3 0 2 1 4 2 2 a n d 0 . 0 8 4 g ? k g . x ? s , n = 1 0 . P < 0 . 0 5 , c o m p a r e d w i t h # C H O n o r m a l c o n t r o l g r o u p ; P < 0 . 0 5 ,c o m p a r e d w i t h h y p e r u r i c e m i a M e t h y l d o c o s a n o a t e 0 . 1 2 2 3 4 6 2 m o d e l g r o u p . F i g . 1 T o t a l i o n s c h r o m a t o g r a m o f P E F f r o m E E P R a n a l y z e d w i t h G C ? M S . 1 : m e t h y l l a u r a t e ; 2 : m e t h y l t e t r a d e c a n o a t e ; 3 : m e t h y l p a l m i t o l e a t e ; 4 : m e t h y l h e x a d e c a n o a t e ; 5 : m e t h y l 1 4 ? m e t h y l h e x a d e c a n o a t e ; 6 : m e t h y l 2 ? h e x y l ? c y c l o p r o p y l o c t a n o a t e ; 7 : m e t h y l h e p t a d e c a n o a t e ; 8 : m e t h y l o c t a d e c a d i e n o a t e ; 9 : m e t h y l t r a n s v a c c e n a t e ; 1 0 : m e t h y l o c t a d e c a n o a t e ; 1 1 : m e t h y l e i c o s a n o a t e ; 1 2 : m e t h y l d o c o s a n o a t e .? 6 7 6 ? 中 国 药 理 学 与 毒 理 学 杂 志 2 0 1 3 年 8 月 第 2 7 卷 第 4 期 C h i n J P h a r m a c o l T o x i c o l , V o l 2 7 , N o 4 , A u g 2 0 1 3 参 考 文 献 : 3 讨 论 [ 1 ] R i c h e t t e P , B a r d i n T . G o u t [ J ] . L a n c e t , 2 0 1 0 , 3 7 5 尿 酸 为 机 体 内 嘌 呤 代 谢 的 终 产 物 。 体 内 衰 老 细 ( 9 7 1 1 ) : 3 1 8 ? 3 2 8 . 胞 和 食 物 , 尤 其 是 富 含 嘌 呤 的 食 物 如 动 物 内 脏 、 海 鲜 [ 2 ] B a k e r J F , S c h u m a c h e r H R . U p d a t e o n g o u t a n d h y p e r u r i ? 等 在 体 内 新 陈 代 谢 的 过 程 中 产 生 嘌 呤 , 嘌 呤 在 肝 脏 c e m i a [ J ] . I n t J C l i n P r a c t , 2 0 1 0 , 6 4 ( 3 ) : 3 7 1 ? 3 7 7 . 中 再 次 氧 化 为 尿 酸 。 正 常 情 况 下 , 体 内 的 尿 酸 处 于 [ 3 ] K e l k a r A , K u o A , F r i s h m a n W H . A l l o p u r i n o l a s a c a r d i o ? v a s c u l a r d r u g [ J ] . C a r d i o l R e v , 2 0 1 1 , 1 9 ( 6 ) : 2 6 5 ? 2 7 1 . 动 态 平 衡 状 态 , 2 / 3 尿 酸 经 肾 脏 随 尿 液 排 出 体 外 , [ 4 ] C o n s t a n t i n e s c u R , Z e t t e r b e r g H . U r a t e a s a m a r k e r o f d e ? 1 / 3 通 过 粪 便 和 汗 液 排 出 。 研 究 表 明 , 尿 酸 是 一 种 v e l o p m e n t a n d p r o g r e s s i o n i n P a r k i n s o n ′ s d i s e a s e [ J ] . 天 然 抗 氧 化 剂 , 可 清 除 人 体 血 液 中 大 部 分 的 自 由 D r u g s T o d a y ( B a r c ) , 2 0 1 1 , 4 7 ( 5 ) : 3 6 9 ? 3 8 0 . [ 1 0 - 1 2 ] 基 ; 在 人 体 内 , 尿 酸 与 过 氧 亚 硝 酸 盐 和 超 氧 化 [ 5 ] W e i G N , Z e n g X B , Y a Q K , H e F , L ü J H , S u H , e t a l . 物 反 应 , 分 别 产 生 1 , 3 ? 二 ? 氨 基 甲 酰 尿 素 和 尿 囊 E m p i r i c a l s t u d y o f P o l y r h a c h i s v i c i n a i n t r e a t m e n t o f g o u t [ 1 3 ] 素 。 当 尿 酸 低 于 正 常 水 平 时 , 则 与 多 发 性 硬 化 [ J ] . C h i n J E x p T r a d i t M e d F o r m ( 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志 ) , 2 0 1 0 , 1 8 ( 2 0 ) : 2 0 5 ? 2 0 8 . 症 、 帕 金 森 病 、 阿 尔 茨 海 默 病 和 视 神 经 炎 等 的 发 病 有 [ 1 4 ] - 1 [ 6 ] P a n Z , D u a n F J , W a n g Y H , Z h a n g J B , W e i X H . E f f e c t o f 关 。 当 男 性 血 尿 酸 浓 度 高 于 4 1 7 m o l ? L , 女 性 μ e x t r a c t o f C o r t e x P h e l l o d e n d r i a n d A t r a c t y l o d e s l a n c e a o n - 1 血 尿 酸 浓 度 高 于 3 5 7 μ m o l ? L 时 称 之 为 高 尿 酸 血 h y p e r u r i c e m i a i n m i c e [ J ] . L i s h i z h e n M e d M a t e r M e d R e s 症 。 高 尿 酸 血 症 是 痛 风 的 基 础 病 因 , 根 据 高 尿 酸 血 ( 时 珍 国 医 国 药 ) , 2 0 0 8 , 1 9 ( 1 ) : 1 1 2 ? 1 1 3 . 症 病 因 及 其 影 响 因 素 , 积 极 寻 找 抗 高 尿 酸 血 症 的 药 [ 7 ] L i Y K . E x p e r i m e n t a l M e t h o d o l o g y o f T C M P h a r m a c o l o g y 物 是 防 治 痛 风 的 关 键 。 ( 中 药 药 理 实 验 方 法 学 ) [ M ] . S h a n g h a i : S h a n g h a i S c i e n c e [ 5 ] a n d T e c h n o l o g y P r e s s , 2 0 0 6 : 6 4 4 . 基 于 拟 黑 多 刺 蚁 良 好 的 抗 痛 风 作 用 , 本 研 究 [ 8 ] H u a n g J Q , Z h u M Z , W a n g S W . E f f e c t s o f g e n i s t e i n , a p i ? 试 图 了 解 拟 黑 多 刺 蚁 抗 痛 风 作 用 的 机 制 和 物 质 基 g e n i n , q u e r c e t i n , r u t i n a n d a s t i l b i n o n x a n t h i n e o x i d a s e a c ? 础 。 本 研 究 结 果 表 明 , 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 提 取 物 能 显 t i v i t i e s a n d s e r u m u r i c a c i d l e v e l s i n h y p e r u r i c e m i c m i c e 著 降 低 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 尿 酸 水 平 , 其 乙 酸 [ J ] . C h i n P h a r m a c o l B u l l ( 中 国 药 理 学 通 报 ) , 2 0 1 1 , 2 7 乙 酯 部 位 、 正 丁 醇 部 位 和 水 部 位 对 高 尿 酸 血 症 血 清 ( 4 ) : 5 6 1 ? 5 6 5 . [ 9 ] Z h a n g H D , H u a n g Y L , H e J Q . I n h i b i t i o n o f d i t e r p e n o i d 尿 酸 的 水 平 均 无 显 著 影 响 , 石 油 醚 部 位 可 显 著 抑 制 t a n s h i n o n e s f r o m S a l v i a m i l t i o r r h i z a B g e . o n x a n t h i n e o x i ? 血 清 尿 酸 水 平 , 并 显 著 抑 制 黄 嘌 呤 氧 化 酶 的 活 性 。 d a s e a c t i v i t y [ J ] . C h i n J P h a r m a c o l T o x i c o l ( 中 国 药 理 学 与 尿 酸 的 生 物 合 成 主 要 受 次 黄 嘌 呤 ? 鸟 嘌 呤 磷 酸 核 糖 毒 理 学 杂 志 ) , 2 0 0 7 , 2 1 ( 3 ) : 1 7 4 ? 1 7 8 . 转 移 酶 、 磷 酸 核 糖 焦 磷 酸 合 成 酶 以 及 黄 嘌 呤 氧 化 酶 [ 1 0 ] A m e s B N , C a t h c a r t R , S c h w i e r s E , H o c h s t e i n P . U r i c 的 调 控 , 尿 酸 代 谢 的 排 泄 主 要 通 过 肾 脏 进 行 , 尿 酸 的 a c i d p r o v i d e s a n a n t i o x i d a n t d e f e n s e i n h u m a n s a g a i n s t o x ? 生 物 合 成 和 排 泄 是 尿 酸 代 谢 的 关 键 环 节 。 本 研 究 结 i d a n t ? a n d r a d i c a l ? c a u s e d a g i n g a n d c a n c e r : a h y p o t h e s i s [ J ] . P r o c N a t l A c a d S c i U S A , 1 9 8 1 , 7 8 ( 1 1 ) : 6 8 5 8 ? 6 8 6 2 . 果 提 示 , 抑 制 黄 嘌 呤 氧 化 酶 活 性 是 拟 黑 多 刺 蚁 乙 醇 [ 1 1 ] G e r s c h C , P a l i i S P , K i m K M , A n g e r h o f e r A , J o h n s o n R J , 提 取 物 中 石 油 醚 部 位 降 低 高 尿 酸 血 症 模 型 小 鼠 血 清 H e n d e r s o n G N . I n a c t i v a t i o n o f n i t r i c o x i d e b y u r i c a c i d [ J ] . 尿 酸 水 平 的 机 制 之 一 。 N u c l e o s i d e s N u c l e o t i d e s N u c l e i c A c i d s , 2 0 0 8 , 2 7 ( 8 ) : 据 报 道 , 南 极 磷 虾 和 海 狗 油 等 的 石 油 醚 部 位 的 9 6 7 ? 9 7 8 . [ 1 5 - 1 6 ] 化 学 成 分 主 要 以 脂 肪 酸 为 主 , 其 中 不 饱 和 脂 [ 1 2 ] G e r s c h C , P a l i i S P , I m a r a m W , K i m K M , K a r u m a n c h i S A , [ 1 7 - 1 8 ] 肪 酸 具 有 重 要 的 生 理 功 能 。 为 了 解 拟 黑 多 刺 A n g e r h o f e r A , e t a l . R e a c t i o n s o f p e r o x y n i t r i t e w i t h u r i c a c i d : f o r m a t i o n o f r e a c t i v e i n t e r m e d i a t e s , a l k y l a t e d p r o d ? 蚁 乙 醇 提 取 物 中 石 油 醚 部 位 的 活 性 成 分 , 对 石 油 醚 u c t s a n d t r i u r e t , a n d i n v i v o p r o d u c t i o n o f t r i u r e t u n d e r c o n ? 部 位 中 的 脂 肪 酸 成 分 进 行 G C ? M S 分 析 。 在 K O H d i t i o n s o f o x i d a t i v e s t r e s s [ J ] . N u c l e o s i d e s N u c l e o t i d e s 的 碱 性 条 件 下 , 由 M e O H对 石 油 醚 部 位 中 的 脂 肪 酸 N u c l e i c A c i d s , 2 0 0 9 , 2 8 ( 2 ) : 1 1 8 ? 1 4 9 . 成 分 进 行 甲 酯 化 , 然 后 进 行 G C ? M S 分 析 。 结 果 表 [ 1 3 ] S h i m a d a M , J o h n s o n R J , M a y W S J r , L i n g e g o w d a V , 明 , 石