[doc] 四甲基吡嗪与血管平滑肌上α受体的作用

[doc] 四甲基吡嗪与血管平滑肌上α受体的作用 四甲基吡嗪与血管平滑肌上α受体的作用 l,|2(王) 南通医学院l舶2年第l2卷第2期?79? , f, 732_四甲基吡嗪与血管平滑肌上0l受体的作用 药理学教研室垄圭亘R罗 据要本文研究四甲基吡嗪(TMP)与a受体的相互作用TMP以剂量依赣方式竞争性抑 制0.2nM浓度的H?哌唑嗪与血管平滑肌质膜的结合,增加.H一哌唑嗪的浓度可减少其抑制. Scatcl,a一分析示不改变B艟,但增加Kd值.本文结果提供了TMP可与a受体直接相互作用的 证据I含吡臻环结构的其他衍生物结果类似,但程度不同.’率文明吡嗪类衍生物以竞争方式与口 受体作用. 关?词四甲基吡嗪f四乙基吡嚷J三乙基吡嗪,碾唑嗪I氨氯吡眯,苯肾上腺素J B—HT920~堡丝塑垩塑些微粒体膜MIcI.. 四甲基吡嚎(TMP)有多种药理作用,例如 降低血压作用”,离体心房的负性肌力与负 性变时性作用’,抑制血小板凝集作用. 国内TMP已用来治疗脑动脉阻塞性疾病”, 因其有直接扩张肺动脉作用,也用来降低肺 血管阻力,治疗肺动脉高压症.尽管如此, TMP在体外血管蛆织上的研究甚少.Kwan 等报道”无论细胞外Ca存在或缺少时, MP都有抑制a受体激动剂苯肾上腺素的 收缩血管作用,但如果加大苯肾上腺索剂 量,就会减弱TMP的抑制作用,这表明TMP 作用于a受体水平”‘.本文目的:(1)用放 射性同位素实验和功能性实验TMP拮 抗作用发生在n受体水平,选择狗主动脉 是因其比其它血管组织含更高的u-受体密 度c.”(z)测试6种含吡嗪环衍生物.H一 哌唑嗪与a-拮抗受体结台的作用. 材料与 富含质膜的M1C?部分是从狗主动脉与 肠系膜动脉分离制备获得,并用停放射性同 位素测定,具体方法巳报遒”. 功能性实验中,狗主动脉与大隐静脉均 从刚处死的狗获得,井仔细除去周围组织和 刮去内膜,装于内含3ml克氏液的organ Bath中(克氏液含:KCI4.6MgSO1.16, CaCI22.5,NaCI115.5,Nail2PO’1.16, 本研究系作者在加拿大访问时完成的课题 NaHCO321.9,葡萄糖11.0,浓度均为 mM),pH7.4,37?,通以050=和5 CO:的混合气体.蛆织平衡2小时,每20 分钟换1次,基础张力3g.用100mM的KCl 观其收缩,重复2次,二者幅度小于10% (超过的血管组织弃用).Bath中加 安3×10,M,氢化可的松3×10,M,去甲 丙咪嘹10M,以抑制去甲肾上腺素的摄取 和8受体的激活.为了防止at和qz两受体? 型的相互干扰,加a-激动剂时加入a.拮抗 剂萝荚木碱(ranwolscine),加a2激动剂 时加a-拮抗剂哌唑嗪.无Ca”克氏液中省 去CaCI2并加入50M的EGTA,以络 合残存的Ca”.TMP(北京第四制药厂生 产)以20mg/ml溶于生理盐水中,临用时再 配制.氨氯吡眯(Amildride,Sigma公司产 品),其衙生物由Dr.Cra~;oa提供.四乙基 吡嗪(TEP)和三乙基吡嗪(3EP)由Dr. Ohta提供. 缩果与讨论 国1示.H一哌唑嗪用近似于Kd值的浓 度0.2nM面不是用饱和浓度0.8nM时,TMP 以剂.量依赖方式抑制.H一哌唑嚎与狗主动 脉平滑肌质照MIC?的结台.而增加哌唑嗪 的浓度时能减少TMP的抑制作用,表明其 性质为竞争性的. ? 8O? j 0 ? 0.80.5 TMP.m~/ml 图l两种H一赈唑嗪浓度对狗主动脉MICI 部分的作用.为0.8M,?为O.2nM o g.’ 嚣 X 蓍一 1oo 75 5O 25 O 051o15 TorTEP.I.A,I 匦2H一嚷唑臻与狗主动脉MICI部分的饱 和实验(上圈,三个实验之一的Scatchard分 析<下图)0为对照,?为加八l0一M的TMP 图2的实验也证实了其为竞争性的,在 含有与缺乏lOM的TMP时的饱和曲线和 Scatchard分析中,TMP增加.H一哌唑嗪 的Kd值而不影响Bmax值.同样的结果也从 狗肠系膜动脉的实验中获得,见附表. 资料上数值为夏?SD,来自3个实验,每 个实验中的每个点重复3次,并经Scatch— ard分析.狗肠系膜动脉上a受体密度为 狗主动脉的20~30,TMP增加二者Kd 值而不影响二者Bmax值.这些结果证实了 TMP是a受体的竞争性拮抗剂. 三 Ilrj口my(TMp) R,#R-=R.=.CH RI— 2Tctiac~I【ncP) R一--R,一R.一.c翎, 3TiicLhylp)Tazine(3EP) R一R,一R.一一CH吼R.t-H 4 l1Onde R一…CON(NH-)t?CI -R.=?NH| )]Ami[odd~(MC,CMA) ??CI, t?NHl ;搿戬mn岫CH R】一?Nc口旧??NH. 图3TMP~aM{Ior[de类衍生物的化学 结构,它们都具有共同的毗嗪环 氨氯吡咪与TMP在结构上均含吡嗪部 分(见图3),也抑制a几乎可完全抑制H 一 哌唑嗪与狗主动脉平滑肌质膜M[C?部 分的结合,而10M的TMP在同样情况下 仅抑制4o~5o%,所以氨氯吡眯比TMP能 更强有力地抑制H一哌唑嗪的结合部位, 这归因于两药在毗嗪环上不同昀取代基因. 为了测试此吡嗪类化合物的抑制作用,6个 含吡嗪的化合杨(3个结构与氨氯吡眯有关, 3个结构与TMP有关)用来检测其在狗 主动脉平滑肌质赋MIC?上取代H一哌唑 嗪特异结合的能力? ??7e543 OOMPOUND,一LOG’) 图4在狗主动脉MICI部分,O.2nM 的’H哌唑嗪与8个化古物的竞争性实验 (未加入e个衍生物时为100争6) ?为TMP,?为3EP,O为a’nioloride, ?为MGCMA,口为TEP,?为CBDMB 图4示乙基取代TMP上4个甲基的TEP 其抑制H一哌唑嗪的结合能力比TMP大一 个对数单位,类似于氨氯吡眯减少TEP结 构上一个乙基即3EP,其作用介于TEP与 TMP之间.6个化合物申作用最强的是CB— DMB,MGCMA略强于TEP与氨氯吡眯. 我们测试了TMP和TEP抑制苯肾上腺 素(选择性d激动剂)和B—HT920(选择 性a激动剂)收缩血管反应.狗大隐静脉 用来诱发功能性突触后a:受体反应,而狗主 0400 E 量 .200 C o rn 0o.03 0 tU OD2 C Q0.01 ? ?毫1 Bound,fmottmg 图5存在TMP(0和TEP(?,时的 功能性实验3x10Mpny1eprine (上图),B—HT920引起血管组织拘收纬反应 (下图)n=6 动脉和肠系陵动脉缺乏这一反应”. 图5示TMP与TEP对苯肾上腺素和B— HT920收缩反应的作用,显然TMP和TEP 均以剂量依赖方式抑制苯肾上腺素和B-HT 920诱发的反应,而TEP比TMP抑制作用 更强,这一结果与放射性同位素在主动脉上 研究的结果一致(见图4).有趣的是TMP 抑制大隐静脉上苯肾上腺素的收缩反应比抑 制主动脉上苯肾上腺素的收缩反应更为敏 感,表明了at受体在这两种血管上存在着 功能上的差别,这也与放射性同位素实验相 一 致,大隐静脉上.H一哌唑嗪的Kd值比主 动脉和肠系膜动脉上的Kd值低4,10倍”. 本文研究表明tTMP和与其结构上相 似的其他药物以竞争方式与血管平滑肌上的 a受体直接相互作用. 参考文献, 1.OjewoleIAO,eta1.Neuromuscular andcardiovascularactionsoftetra— methyIpyrazinefromthestemofja— trophapodagri~a.PlantaMedlca1980l 毋.cflo皿c,毋oN哪.1.工n ? g2? 38332. 2.0JewoleJAO.Effectoftetrameztby— lpyrazineonisolatedatriaofthegui— nea—pig.PlantaMedica1981}42:223 3.NieSq,eta1.Effectsoftetramethy— lpyrazlne(TMP)onmembranefluidi— tya?delectrophuretlcmobilityofpla— teletsandthere1ationshiPtoitsan— tiaggregatiOneffect.ActaPharmaceut Sinica1985~20:689. 4.Beljingres.Inst.PharmaceIndus— try;Research:ontheactiveingredi— entofllgustriumwallichiifra. ,~cha’ I.Clinical(218cases)useofligu— strazineintheteratmentofhypoxe— miccerebralv~SCulardiseases.Chin MedI1日7J. .4B7 5.ZouAP.etal;Hcmodynamiceffects of1igustrazine,tetrandrine,phento— lamineandphenoxybenzamineonpul monaryctrculationduringalv~olar hypoxia.ActaAcadMedWuhan. 1984;4:282. 6.KwanCY,eta1.Inhlbitionofvaso— constrlctionbytetramethylpyrazine= de— DoeSitacthYblockingvoltage— channe1.ICardioYaSc pendentCa— Pharmacol1.990;15:157. 7.ShiAG,eta1.Relationbetweenden— sityfBmax)andalpha—adreaoceptor bindingsitesandcontractlieresponse infoufcaninevasculartissues.J PhalmaC01ExpTher1989}250l1119. 8.施安国.用H—prazosln与H—rauwolscine 的结合实骑来研究狗大隐静脉平滑肌细胞膜a 爱体亚型的特征.南通医学院1991111 (1);1. 9.ShiAG,etaJ.Inhibitoryeffectsof axnilorideonalpha—adrenoceptorsin canineVgscular,smoothmuscle.JPh— armacolExPTher1990l253:791. (1991—94一Ol收稿) EFFECTS0FTETRAMETHYLPYRAZINEWITH VASCULARSM00THMUSCLEALPHAADREN0CEPT0RS 一 . ShiAnguo Departmentofpharmacol,ogy,NanLongMedicalCollege TheinteractionofTMPwiththevascularalphaladren0ceptorsWasinves— tigated.TMPinhibitedthebindingof.H-prazosintoV&SCalarmusclememb— fanesinacone印 ~rationdependentmannerat0.2nMconcentrationofpraz0sin’ Theincreasingconcentrationof. prazosin.can.redttcesnc;aninhibitionby TMP.Scatchardanalysisindicatedasubstant~a/increaseofKdvalueswithout achangeinBmax.Thepresent.resultsprovidesupportingevidencethatthe inhibitoryeffec,tofTMPmaybeadirectactionatthergcognitlonsitesofalpha adrenocep~ors.Pyrazine—containingcompoundshadthesimilarresults,butditto- redindegree.Ourresultsshowthatthepyrazinemoietyofthesecompounds mayberesponslbl’eforthecompetitivebindingatatphaladrenoceptorsites. Keywords:TMP(Tetramethy1prazine)jTEP(, Tetraethylpyrazine)}3EP (Tfiethy1pyrazine)., prazosinjamiloride;phenylephrlneB-HT920’alpha ~’~ceptorjo~arich卑dplasmamembranefractionMIe?