【doc】大血小板
及临床意义探讨
大血小板检测及临床意义探讨
临床检验杂志2003年第21卷第1期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2003,Vo1.21,No.117
文章编号:1001—764X(2003)01—0017—02中图分类号:R446.113文献标识码:A
大血小板检测及临床意义探讨
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论着?
林宝顺,郑德柱,刘文星,林祥泉(1.南京军区福州总医院全军医学检验中心,福州350025;2.福建医科大学检验系实
习生)
摘要:目的评价ADVIA120血液分析仪对大血小板的检测及大血小板的临床意义.方法将富含大血小板标本分别用免
疫学法,手工法,ADVIA120和Coulter—JY血液分析仪计数血小板,以免疫学法结果为参考值,比较手_Y-法,ADVIA120和
C0ulter-JT与免疫学法的相关性;临床分析290例大血小板标本.结果3种方法与免疫学法比较的相关系数分别为0.8121,
0.9306和0,7669:妊娠和恶性肿瘤患者大血小板分别占17.9%和20.0%.结论ADVIA120血液分析仪是目前检测血小板
较理想的仪器之一;妊娠和恶性肿瘤病人血中会出现较多的大血小
板.
关键词:大血小板;血小板计数;相关性;临床意义
血液分析仪已被广泛应用,其对血小板计数准
确性的问题引起人们广泛关注,尤其是对直径4,
6ptm,体积大于20fl的大血小板…的正确计数,目
前大多数血液分析仪受限于其功能,未能将大血小
板与小红细胞分开,无法准确计数血小板.ADVIA
120采用两个角度测定激光的散射强度的原理[2l,
能对大血小板较准确地计数.本文以该仪器调查了
健康成人的大血小板的参考值范围,并对ADVIA
120报警富含大血小板(>8.1%)的标本用免疫学
法(测CD61),手工法,ADVIA120和Coulter-JT检
测,对其结果的相关性作了比较,并对大血小板标本
进行I临床分析.
1材料与方法
1.1仪器ADVIA120血液分析仪及配套试剂
(拜耳公司);Coulter-JT血液分析仪及配套试剂(贝
克曼公司);CoulterEPICSRXL流式细胞仪及配套
试剂(贝克曼公司);双目镜显微镜(Olympus公司);
血细胞计数板等.
1.2试剂手工法试剂按操作规程[]严格配制.
1.3标本用于检测的41份大血小板标本(男25
例,女16例;年龄最小为5岁,最大为75岁,平均
36.8岁)为本院住院病人空腹静脉血,EDTA—K,抗
凝,1h内检测完毕;用|于临床分析的290份大血小
板标本(男129例,女161例;年龄最小为2岁,最大
为83岁,平均42.3岁)为常规工作中随机抽取仪器
提示富含大血小板者;418份成人标本为来本院的
体检健康者(男201例,女217例;年龄最小20岁,
最大73岁,平均45.3岁,)的空腹静脉血,EDTA-
K2抗凝,1h内检测完毕.
1.4方法
1.4.1ADVIA120血液分析仪经严格质控,性能
稳定后对418例健康成人的血标本进行检测,根据
的血小板及大血小板数,用Excel统计学软件
统计大血小板的参考范围.
1.4.2手工法参考规程[3]严格操作,每份标本由
专人计数2次,最后取均值.
1.4.3免疫学参考Gill法Ll』,ADVIA120法及
Coulter-JT法严格按照仪器操作说明书进行检测.
1.4.441份富含3VlrlUb板标本用4种方法检测,以免
疫学法结果为参考值(X轴),余3法结果(Y轴)与免疫
学法比较.所有统计用Excel统计学软件进行处理.
2结果
2.1418份健康成人大血小板占血小板百分比的范
围为<8.1%.
2.241份富含大血小板标本手工法,)?A120和
Coulter-JT血细胞分析仪3种方法与免疫学法计数结
果的回归方程分别为Y=0.8256X+12.173,Y2=
0.8925X+3.1315和Y3:0.8125X一3.309;相关系数
分别为r1=0.9012,r2=0.9647和r0.8757.
2.3290例大血小板标本临床分析结果见表1.
表1290例大血小板标本的疾病分布
作者简介:林宝顺,1969年生,男,大学本科,主管技师,主要从事血液病检查方面的工作.
18临床检验杂志2003年第21卷第1期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2003,Vo1.21,No.1
3讨论
3.1世界卫生组织(WHO)推荐的血小板计数参考
方法[,是用草酸铵溶液作为溶血一稀释剂,在相差
显微镜下,肉眼计数血小板,但该方法存在血小板在
计数板上的分布误差,充池是否均匀等众多因素的
影响.Harrison称,这一方法在不同的操作者之间,
变异系数可达10%,25%I,很难准确计数血小
板.Coulter—JT采用电阻抗原理计数血小板,其测
定血小板体积临界值为2.0,20.Of|,而对其临界值
以外的血小板则根据健康人血小板体积符合正态分
布的理论,通过0,70fl的电子拟合曲线,将这些异
常大小的血小板估计计入.由于仪器受此原理的限
制,仅能对体积呈正态分布的血小板进行”准确”计
数,体积在2.0,20.0fl的”非血小板颗粒”
(nonplateletparticles,简称NPPs),如小红细胞等,
被当作血小板加以计数,使血小板假性增多.同样,
当标本中富含大血小板时,仪器将其误认为红细胞
而不计数,使计数结果假性偏低.ADVIA120采用
两维激光的原理l2,5],高角度(5.,15.)激光主要测
细胞的折射指数(refractiveindex,简称RI),它与细
胞的密度有关;低角度(2.,3.)激光主要测细胞的
大小.血小板的体积在1,30fl,RI在1.35,1.40
间,而小红细胞等因含有高浓度的血红蛋白,其RI
大于1.40,故大血小板虽有可能与小红细胞等体积
相似,但其RI相差较大,可将大血小板与小红细胞
区别加以计数,使富含大血小板的标本能准确计数
血小板.GillE1J等推荐应用免疫学方法,在流式细胞
仪(FCM)检测血小板表面分化抗原(CD61)作为目
前检测血小板的参考方法,但免疫学法要用昂贵的
荧光标记单抗和高档的仪器,操作也较为繁琐.此
外,有些人血小板表面不表达CD61,而表达CD62
或CD42b,这种病人就不宜用免疫学方法检测血小
板,因而免疫学法难以在常规工作中推广使用,仅适
用于特殊病例或用于建立参考方法和校准仪器[5_5.
从我们的结果可以看出,手工法和Coulter-JT
法与参考方法的相关性较差,相关系数r分别为
0.9012和0.8757,而ADVIA120与免疫学法有较
好的相关性(r为0.9647),而且操作非常简便.此
外,我们用ADVIA120血液分析仪对不同类型(富
含小红细胞,红细胞碎片,红细胞残骸和高,低血小
板计数)及不同保存条件(时间及温度)的标本进行
检测,做了系列研究,同样得到较为满意的结果.因
此认为,ADVIA120血液分析仪是当前检测血小板
较理想仪器之一.
3.2分析临床290例大血小板标本中,以妊娠,肿瘤
及心脑肾疾病多见,其中妊娠和恶性肿瘤所占比例.
最高,分别为17.9%和20.0%.
3.2.1血小板是具有酶和生理活性的细胞,一般认
为体积较大的血小板是较年青的血小板,其功能活
性较强,随着血小板的老化,体积收缩,功能降低.
体积较大的血小板含有较多致密颗粒,可释放更多
的5一羟色胺等生物活性物质,其聚集和粘附功能较
强,发生脑血栓等疾病的机会较大_6J.
3.2.2正常孕妇的血小板比较大,可能是由于在怀
孕期间血小板消耗增多,血小板反应性增生,引起了
血小板偏大.
3.2.3大血小板还出现于其他疾病(本文119例):
急性心肌炎,心肺旁路术后,体外循环术,血液病和
冠心病等疾病时,血小板消耗增多,血小板数减少,
MPV增加,形成”应激反应性大血小板”;川合阳
子[]等认为在慢性粒细胞白血病,血小板无力症,
原发性血小板减少性紫癜等病人也可能出现较多的
大血小板,这可能与血小板破坏增多有关;至于大血
小板与年龄,性别及生理状态等因素的关系,有待以
后进一步探讨.
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1收稿日期:2002—07—19.修回日期:2002—10—11)
(本文编辑:陈军)