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【doc】大血小板检测及临床意义探讨

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【doc】大血小板检测及临床意义探讨【doc】大血小板检测及临床意义探讨 大血小板检测及临床意义探讨 临床检验杂志2003年第21卷第1期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2003,Vo1.21,No.117 文章编号:1001—764X(2003)01—0017—02中图分类号:R446.113文献标识码:A 大血小板检测及临床意义探讨 ? 论着? 林宝顺,郑德柱,刘文星,林祥泉(1.南京军区福州总医院全军医学检验中心,福州350025;2.福建医科大学检验系实 习生) 摘要:目的评价ADVI...
【doc】大血小板检测及临床意义探讨
【doc】大血小板及临床意义探讨 大血小板检测及临床意义探讨 临床检验杂志2003年第21卷第1期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2003,Vo1.21,No.117 文章编号:1001—764X(2003)01—0017—02中图分类号:R446.113文献标识码:A 大血小板检测及临床意义探讨 ? 论着? 林宝顺,郑德柱,刘文星,林祥泉(1.南京军区福州总医院全军医学检验中心,福州350025;2.福建医科大学检验系实 习生) 摘要:目的评价ADVIA120血液分析仪对大血小板的检测及大血小板的临床意义.方法将富含大血小板标本分别用免 疫学法,手工法,ADVIA120和Coulter—JY血液分析仪计数血小板,以免疫学法结果为参考值,比较手_Y-法,ADVIA120和 C0ulter-JT与免疫学法的相关性;临床分析290例大血小板标本.结果3种方法与免疫学法比较的相关系数分别为0.8121, 0.9306和0,7669:妊娠和恶性肿瘤患者大血小板分别占17.9%和20.0%.结论ADVIA120血液分析仪是目前检测血小板 较理想的仪器之一;妊娠和恶性肿瘤病人血中会出现较多的大血小 板. 关键词:大血小板;血小板计数;相关性;临床意义 血液分析仪已被广泛应用,其对血小板计数准 确性的问题引起人们广泛关注,尤其是对直径4, 6ptm,体积大于20fl的大血小板…的正确计数,目 前大多数血液分析仪受限于其功能,未能将大血小 板与小红细胞分开,无法准确计数血小板.ADVIA 120采用两个角度测定激光的散射强度的原理[2l, 能对大血小板较准确地计数.本文以该仪器调查了 健康成人的大血小板的参考值范围,并对ADVIA 120报警富含大血小板(>8.1%)的标本用免疫学 法(测CD61),手工法,ADVIA120和Coulter-JT检 测,对其结果的相关性作了比较,并对大血小板标本 进行I临床分析. 1材料与方法 1.1仪器ADVIA120血液分析仪及配套试剂 (拜耳公司);Coulter-JT血液分析仪及配套试剂(贝 克曼公司);CoulterEPICSRXL流式细胞仪及配套 试剂(贝克曼公司);双目镜显微镜(Olympus公司); 血细胞计数板等. 1.2试剂手工法试剂按操作规程[]严格配制. 1.3标本用于检测的41份大血小板标本(男25 例,女16例;年龄最小为5岁,最大为75岁,平均 36.8岁)为本院住院病人空腹静脉血,EDTA—K,抗 凝,1h内检测完毕;用|于临床分析的290份大血小 板标本(男129例,女161例;年龄最小为2岁,最大 为83岁,平均42.3岁)为常规工作中随机抽取仪器 提示富含大血小板者;418份成人标本为来本院的 体检健康者(男201例,女217例;年龄最小20岁, 最大73岁,平均45.3岁,)的空腹静脉血,EDTA- K2抗凝,1h内检测完毕. 1.4方法 1.4.1ADVIA120血液分析仪经严格质控,性能 稳定后对418例健康成人的血标本进行检测,根据 的血小板及大血小板数,用Excel统计学软件 统计大血小板的参考范围. 1.4.2手工法参考规程[3]严格操作,每份标本由 专人计数2次,最后取均值. 1.4.3免疫学参考Gill法Ll』,ADVIA120法及 Coulter-JT法严格按照仪器操作说明书进行检测. 1.4.441份富含3VlrlUb板标本用4种方法检测,以免 疫学法结果为参考值(X轴),余3法结果(Y轴)与免疫 学法比较.所有统计用Excel统计学软件进行处理. 2结果 2.1418份健康成人大血小板占血小板百分比的范 围为<8.1%. 2.241份富含大血小板标本手工法,)?A120和 Coulter-JT血细胞分析仪3种方法与免疫学法计数结 果的回归方程分别为Y=0.8256X+12.173,Y2= 0.8925X+3.1315和Y3:0.8125X一3.309;相关系数 分别为r1=0.9012,r2=0.9647和r0.8757. 2.3290例大血小板标本临床分析结果见表1. 表1290例大血小板标本的疾病分布 作者简介:林宝顺,1969年生,男,大学本科,主管技师,主要从事血液病检查方面的工作. 18临床检验杂志2003年第21卷第1期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2003,Vo1.21,No.1 3讨论 3.1世界卫生组织(WHO)推荐的血小板计数参考 方法[,是用草酸铵溶液作为溶血一稀释剂,在相差 显微镜下,肉眼计数血小板,但该方法存在血小板在 计数板上的分布误差,充池是否均匀等众多因素的 影响.Harrison称,这一方法在不同的操作者之间, 变异系数可达10%,25%I,很难准确计数血小 板.Coulter—JT采用电阻抗原理计数血小板,其测 定血小板体积临界值为2.0,20.Of|,而对其临界值 以外的血小板则根据健康人血小板体积符合正态分 布的理论,通过0,70fl的电子拟合曲线,将这些异 常大小的血小板估计计入.由于仪器受此原理的限 制,仅能对体积呈正态分布的血小板进行”准确”计 数,体积在2.0,20.0fl的”非血小板颗粒” (nonplateletparticles,简称NPPs),如小红细胞等, 被当作血小板加以计数,使血小板假性增多.同样, 当标本中富含大血小板时,仪器将其误认为红细胞 而不计数,使计数结果假性偏低.ADVIA120采用 两维激光的原理l2,5],高角度(5.,15.)激光主要测 细胞的折射指数(refractiveindex,简称RI),它与细 胞的密度有关;低角度(2.,3.)激光主要测细胞的 大小.血小板的体积在1,30fl,RI在1.35,1.40 间,而小红细胞等因含有高浓度的血红蛋白,其RI 大于1.40,故大血小板虽有可能与小红细胞等体积 相似,但其RI相差较大,可将大血小板与小红细胞 区别加以计数,使富含大血小板的标本能准确计数 血小板.GillE1J等推荐应用免疫学方法,在流式细胞 仪(FCM)检测血小板表面分化抗原(CD61)作为目 前检测血小板的参考方法,但免疫学法要用昂贵的 荧光标记单抗和高档的仪器,操作也较为繁琐.此 外,有些人血小板表面不表达CD61,而表达CD62 或CD42b,这种病人就不宜用免疫学方法检测血小 板,因而免疫学法难以在常规工作中推广使用,仅适 用于特殊病例或用于建立参考方法和校准仪器[5_5. 从我们的结果可以看出,手工法和Coulter-JT 法与参考方法的相关性较差,相关系数r分别为 0.9012和0.8757,而ADVIA120与免疫学法有较 好的相关性(r为0.9647),而且操作非常简便.此 外,我们用ADVIA120血液分析仪对不同类型(富 含小红细胞,红细胞碎片,红细胞残骸和高,低血小 板计数)及不同保存条件(时间及温度)的标本进行 检测,做了系列研究,同样得到较为满意的结果.因 此认为,ADVIA120血液分析仪是当前检测血小板 较理想仪器之一. 3.2分析临床290例大血小板标本中,以妊娠,肿瘤 及心脑肾疾病多见,其中妊娠和恶性肿瘤所占比例. 最高,分别为17.9%和20.0%. 3.2.1血小板是具有酶和生理活性的细胞,一般认 为体积较大的血小板是较年青的血小板,其功能活 性较强,随着血小板的老化,体积收缩,功能降低. 体积较大的血小板含有较多致密颗粒,可释放更多 的5一羟色胺等生物活性物质,其聚集和粘附功能较 强,发生脑血栓等疾病的机会较大_6J. 3.2.2正常孕妇的血小板比较大,可能是由于在怀 孕期间血小板消耗增多,血小板反应性增生,引起了 血小板偏大. 3.2.3大血小板还出现于其他疾病(本文119例): 急性心肌炎,心肺旁路术后,体外循环术,血液病和 冠心病等疾病时,血小板消耗增多,血小板数减少, MPV增加,形成”应激反应性大血小板”;川合阳 子[]等认为在慢性粒细胞白血病,血小板无力症, 原发性血小板减少性紫癜等病人也可能出现较多的 大血小板,这可能与血小板破坏增多有关;至于大血 小板与年龄,性别及生理状态等因素的关系,有待以 后进一步探讨. 参考文献: [1]GillJE,DavisKA,CowartWJ,eta1.Arapidandaccurate closed—tubeimmunoassayforplateletsonanautomatedhematology analyzer[J].AmJClinPathol,2000,114(1):47—56. [23KunickaJE,FischerG,MushyJ,eta1.Improvedplatelet countingusingtwo-dimensionallaserlightscatter[J].AmJClin Pathol,2000,114(2):283—289. [3]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].南京:东南大学出 版社,1991.15—17. [4]HarrisonP,HortonA,GrantD,eta1.Irrmaunoplateletcounting:a proposednewreferenceprocedure[J].RrJHaemato,2000,108 (2):228—235. [5]朱忠勇.准确计数血小板方法学研究进展[J].国外医学临床生物 化学与检验学分册,2002,23(3):131—132. [6]王绮美.大型血小板比率与急性脑梗死的相关性[J].中国实用内 科学杂志,2000,20(7):399—400. [7]Jll合阳子,清水长子.容易被遗漏的血小板形态的观察[J].日本 检查血液学会杂志,2001,2(1):76—84. 1收稿日期:2002—07—19.修回日期:2002—10—11) (本文编辑:陈军)
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