肾安颗粒中淫羊藿和黄芪半仿生提取工艺研究

肾安颗粒中淫羊藿和黄芪半仿生提取工艺研究 肾安颗粒中淫羊藿和黄芪半仿生提取工艺 研究 HeraldofMedicineVo1.29No.8August2010 肾安颗粒中淫羊藿和黄芪半仿生提取工艺研究 贺薇薇,冯汉鸽,汪琦,王小琴,巴赛 (1.湖北中医学院2007级硕士研究生班,武汉430065;2.湖北省中医院,武汉430061;3.广东药学院,广州 510006) [摘要]目的优选肾安颗粒的提取工艺.方法以方中君药淫羊藿,臣药黄芪的主要成分淫羊藿苷,黄芪甲 苷为指标,用半仿生法对淫羊藿苷,黄芪甲苷的提取工艺进行优选.结果淫羊藿,黄芪的最佳提取工艺为A,Bc D,即第1次提取pH=2,第2次提取pH=7,第3次提取pH=9,共提取5h.结论用半仿生设计法对胃安颗粒中淫羊 藿苷黄芪甲苷的提取工艺进行优选,优选出的工艺科学,合理. [关键词]肾安颗粒;淫羊藿苷;黄芪甲苷;半仿生提取法 [中图分类号]R283.627;TQ460.6[文献标识码]A[文章编号]1004—0781(2010)08-1060-03 肾安颗粒为湖北省中医院自制制剂(科研制剂), 由淫羊藿,黄芪和大黄组成,临床上对于慢性肾功能衰 竭(肾衰)有良好的疗效.该制剂能明显降低腺嘌呤 诱导的慢性肾衰大鼠血浆尿素氮,肌酐,中分子物质, 提高血红蛋白,红细胞免疫功能及淋巴细胞转化率,肾 组织病理明显改善.笔者采用水煎工艺,通过半仿生 实验(SBE法是从生物药剂学的角度将整体药物研究 法与分子药物研究法相结合,模仿口服药物在胃肠道 的转运过程,采用选定pH值的酸性水和碱性水,依次 连续提取得到含指标成分高的活性混合物的中药和方 剂的药效物质提取新技术),以方中淫羊藿苷,黄芪甲 苷的含量为指标,对肾安颗粒的制备工艺进行了研究. 1仪器与试药 1.1仪器美国Waters600泵,WatersPDA检测器; 戴安SEDEX75,蒸发光散射检测器;AgilentC柱 (4.6mmx250mm,5m),E12140型电子天平 (OHAUS);DZF.2002型真空干燥箱(上海浦东跃欣科 学仪器厂);E12140型电子天平(OHAUS),320一 SdeltaPH计(梅特勒一托利多);KQ一100A型超声波清洗 器(昆山超声仪器有限公司). 1.2试药淫羊藿和黄芪药材由湖北省中医院药剂 科提供,经鉴定符合《中华人民共和国药典~2005版规 定,淫羊藿对照品(中国药品生物制品检定所,批号: 110737-200415),黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品 检定所,批号:110781—200613);制剂样品为自制,水为 [收稿日期]2009—12—22[修回日期]2010一Ol一28 [作者简介]贺微微(1984一),女,四川人,硕上在读,研究 方向:中药新制剂和新剂型.电话:027—51810667,E—mail: vivian0121@qq.com. [通讯作者]冯汉鸽(1956一),女,湖北武汉人,主任药帅, 学士,主要从事中药新制剂和新剂型.电话:027—88929175,E— mail:fhange@126.coin. 双蒸水,甲醇,乙腈(色谱纯,天津市科密欧化学试剂 开发中心),其他试剂均为分析纯. 2方法 2.1提取工艺方中淫羊藿,黄芪按处方比例(1: 1)进行配伍水提,通过半仿生试验进行SBE…(半仿 生提取法)研究,即将淫羊藿和黄芪(配伍比例)粉碎, 过筛孔内径840,2000m筛.称取药材粗粉80g, 常压下加热回流提取3次(加水量分别为药材重量的 10,8,8倍;浸泡30rain),水的pH值及提取时间见 1.提取液用4层纱布加筛孔内径(150?6.6)txm筛 滤过,离心(转速2000r?min,,r=6cm,25min),合 并上清液,浓缩定容至200mL,即每毫升含生药0.4g. 制得样品液1,9. 表1淫羊藿,黄芪水提取pH值和时间因素水平表 2.2淫羊藿苷含量的测定.] 2.2.1色谱条件与系统适应性试验ODSAgileng Cl8柱:4.6mmx250toni,5Ixm;检测波长:270nm;流动 相乙腈一水(32:68);流速1.0mL?min,. 2.2.2对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品约为 0.002g,用甲醇配制成1.00mg?mL,,即得对照品溶 液. 2.2.3供试品溶液的制备精密量取各样品溶液 医药导报2010年8月第29卷第8期?1061? 5mL置10mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀.精密 量取1mL,加10mL水稀释,用乙酸乙酯萃取3次,合 并乙酸乙酯溶液,回收至干,残渣加稀乙醇溶解并定容 至10mL,摇匀,即得供试品溶液1,9. 2.2.4曲线的绘制分别精密吸取对照品溶液 2,4,6,8,10L进样,按上述色谱条件测定,以进样量 (g)为横坐标,峰面积积分值l,为纵坐标绘制工作 曲线,得回归方程为Y=281348.4286X+414933.2 (r=0.9997),表明淫羊藿苷在2,10g范围内,峰面 积与进样量呈良好线性关系. 2.2.5精密度试验精密吸取对照品溶液6,按 前述色谱条件重复进样5次,测得峰面积积分值RSD 为0.7807%. 2.2.6重复性试验精密量取"2.1"项下样品液共5 份,按"2.2.3"项下供试液制备,按上述色谱条件下进 样,测定.RSD为0.3026%,表明重现性良好. 2.2.7稳定性试验精密吸取1号供试液6L,按 前述色谱条件下进样,每隔1h进样1次,共进样5 次,测得峰面积积分值,计算RSD为0.4709%,在4h 内稳定. 2.2.8加样回收率试验精密吸取对照液适量,加入 已测得淫羊藿苷含量的1号供试液中,混匀,按前述色 谱条件进样,测定.结果回收率为95.95%.RSD为 0.8591%(n=5). 2.3黄芪甲苷的含量测定 2.3.1色谱条件与系统适应性试验ODSAgi]eng C18柱:4.6minx250mm,5m;流动相:乙腈一水(37: 63);流速:1.0mL?rain,.蒸发光散射检测器,漂移 管温度30cC. 2.3.2对照品溶液的制备精密量取黄芪甲苷对照 品适量,加甲醇制成每lmL含0.5mg的溶液,即得. 2.3.3供试品溶液的制备精密量取10mL样品液 置分液漏斗中,用水饱和的正丁醇振摇抽提3次,每次 20mL,合并正丁醇液,再用40%氨水抽提2次,每次 20mL,弃去氨液,蒸干正丁醇,残渣加甲醇溶液溶解, 定容至10mL,摇匀,即得黄芪甲苷供试液1,9. 2.3.4标准曲线的绘制分别精密吸取对照品溶液 2,4,6,8,10L进样,按上述色谱条件测定,以进样量 (g)为横坐标,峰面积积分值y为纵坐标绘制工作 曲线,得回归方程为l,=5.3184X一2.2556(r= 0.9996),表明黄芪甲苷在1,5g范围内,峰面积与 进样量呈良好线性关系. 2.3.5精密度试验精密吸取对照品溶液6L,按 前述色谱条件重复进样5次,测得峰面积积分值RSD 为2.37%. 2.3.6重复性试验精密量取"2.1"项下样品液共5 份,按"2.3.3"项下供试液制备,按上述色谱条件下进 样,测定.RSD为1.80%,表明重现性良好. 2.3.7稳定性试验精密吸取1号供试液6L,按 前述色谱条件下进样,每隔1h进样1次,共进样5 次,测得峰面积积分值,计算RSD为1.89%. 2.3.8加样回收率试验精密吸取对照液适量,加入 已测得黄芪甲苷含量的1号供试液中,混匀,按前述色 谱条件进样,测定.结果回收率为95.62%.RSD为 2.41%(凡=5). 2.4统计学方法黄芪甲苷含量评分=(40/最大黄 芪甲苷含量×黄芪甲苷含量)X100%;淫羊藿含量评 分=(40/最大淫羊藿苷含量×淫羊藿苷含量)X100%; 得膏率评分=(20/最大得膏率×得膏率)×100%;综合 评分l,=得膏率评分十黄芪甲苷含量评分+淫羊藿苷评 分.并运用SPSS软件进行多元线性回归分析. 3结果 根据SBE法理论,在药材粒度,煎提温度,煎煮加 水量,离心,浓缩等条件相同的前提下,确定考察的主 要因素及水平.选用均匀设计法uL(9x3)表(中国 航天工业总公司第三研究院提供). 3.1半仿生试验结果精密吸取样品1,9号各 10L,分别注入液相色谱仪,同对照品条件测定峰面 积,计算出样品中淫羊藿苷,黄芪甲苷的含蹙,结果见 表2,表3. 表2U9(9'x3)试验设计表(提取时间:2:1:1) 考察指标:淫羊藿苷含量,黄芪甲苷含量,干浸膏含量 将表1和值输人SPSS软件进行多元线性回归 分析,R=0.975F=18.907(凡=4),P<0.01有极显着 意义.得回归方程:Y=一242.606+2.309X+ 15.158X,+19.167X+9.487X4.得1号样为最佳工 艺,即第1次水提取pH=2提取2h;第2次水提取 pH=7提取2h;第3次水提pH=9提取Ih. ? 1062?HeraldofMedicineVo1.29No.8August2010 3.2验证试验称取药材粗粉80g,按最佳工艺A. BCD进行验证试验,结果与半仿生试验结果吻合. 即淫羊藿苷0.2126mg?mL一,黄芪甲苷 0.8221mg?mL,,干浸膏23.9641g. 表39种提取液各指标成分的含量 4讨论 淫羊藿和黄芪合并提取增加了淫羊藿苷的提取 量,并且长时问的提取也有利于黄芪甲苷的提取.为 节约能源,有利于大生产,曾考虑在同等条件下将提取 时间调整为3.5h进行考察,结果提取时间减少,使黄 芪甲苷的提取量明显减少,故仍采用5h进行提取. 根据淫羊藿苷可溶于水,甲醇,醋酸乙酯等性质,实验 中选用乙酸乙酯为萃取溶剂可将水提液中淫羊藿苷提 取完全,且所得供试液中杂质大大减少,有利于色谱分 离,减少对色谱柱的污染.笔者在本实验中还将药典 收载方法中的流动相乙腈.水(30:70),调整为乙腈一 水(32:68),使分离度和峰形对称性良好,可得到理 想的效果.本实验含量测定方法简便,准确,重现性 好,能同时为淫羊藿与黄芪的复方制剂质量标准的制 定提供参考. [DOI]10.3870/yydb.2010.08.031 [参考文献] [1]土英姿,雷英,淳于声玲.均匀设计优选朝鲜淫洋藿的 半仿生提取工艺条件[J].山东中医药大学,2007,31 (2):159. [2]赵燕燕,徐本明,姜斌,等.淫羊藿总黄酮提取工艺对总 黄酮和淫羊藿苷含量的影响[J].烟台大学,2007,20 (1):23. [3]岁毅,杨俊,马郁文,等.高效液相色普法测定淫羊藿 与黄芪配伍后淫羊藿前煎出量的变化[J].中国医院药学 杂志,2006,26(3):362. [4]杨立平.用正交设计法优选黄芪中黄芪甲苷的提取工艺 研究[J].实用预防医学,2004,11(3):592. [5]石晓伟,吴一兵,杨双革,等.高效液相色谱一蒸发光散射 检测器法测定益气强身颗粒中黄芪甲苷的含量[J].河北 医科大学,2008,29(1):78. [6]查建蓬,张嫡群,:志云,等,黄芪及其制剂质量控制方法 研究进展[J].中成药,2006,28(6)l875. 罗红霉素微粉化分散片的制备与溶出度测定 徐成,金春,秦勇,周自桂,苏晋 (1.江苏弘惠医药有限公司,南京210008;2.江苏神龙药业有限公司,东台224200) [摘要]目的对罗红霉素微粉化分散片的制剂工艺和质量进行研究.方法使用球磨 机制备罗红霉素.乳糖 微粉化混合物,并添加适合的辅料制备分散片.结果所制样品质量稳定,分散均匀 性及溶出度合格.结论本制剂设 计合理,质量稳定. [关键词]罗红霉素;微粉化;分散片 [中图分类号]R915.11;TQ460.6[文献标识码]A[文章编号]1004—0781(2010)08— 1062—03 罗红霉素具有广谱高效抗菌的特点,并具有半衰 期长,吸收效果好,血药浓度高及维持时间长,对胃肠 刺激性小等诸多优点?,因此世界上陆续有80多个国 家和地区广泛将罗红霉素制剂应用临床.罗红霉素具 有强疏水性,在水中溶解度极低,在胃中的迅速溶出是 11—20[修回日期]2009—12—29 [收稿日期]2009— [作者简介]徐成(1978一),男,汀苏扬州人,工程师,学 士,从事药物研发及制剂研究.电话:025—83310081,E—mail: xucheng2000@126.coin. 保证其片剂生物利用度的关键之一.为使罗红霉 素在临床应用上取得更好的效果,笔者对罗红霉素进 行了微粉化处理,并制备成罗红霉素微粉化分散片,大 大提高其溶出度和生物利用度,更好的发挥了药物的 疗效. 1仪器与试药 1.1仪器QM—WX卧式行星球磨机(南京大学仪器 厂);ZRS一8G智能溶出仪(天津市天大天发科技有限 公司);UV2800紫外分光光度计(美国优尼科公司);