人中、百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

人中、百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响 人中、百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血 再灌注损伤的影响 暖掌理论与蕻鹾2011年第24卷第19期Vo1.24,No.19,Oct2011JMedTheor&Prac同2281 人中,百会穴注射香丹注射液对大鼠 脑缺血再灌注损伤的影响 申艳红 南阳医学高等专科学校,河南省南阳市473000 摘要目的t观察人中,百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法t6O只SD大鼠随机分为假手 术组,模型组,对照组,香丹注射液组共4组,每组15只,均用药14d后,线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模 型,缺血30min后再灌注60rain,测定脑匀浆中S0D活力,MDA含量,N0和N0S含量.结果;脑匀浆SOD活力,N0 和NOS含量:模型组与假手术组相比明显降低(P<O.01);对照组和香丹注射液组比模型组有不同程度的增加(P< 0.o5).对照组与香丹注射液组比较差异有统计学意义(P<O.05).脑匀浆MDlA含量:模型组与假手术组相比明显 升高(P<0.01);对照组和香丹注射液组较模型组有不同程度的降低(P<O.05);对照组与香丹注射液组比较差异有 统计学意义(P<0.0s).结论;人中,百会穴注射香丹注射液能够减轻再灌注期脑组织的损害,保护脑组织. 关键词香丹注射液人中穴百会穴脑缺血再灌注 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1O01—7585(2O11)19-2281—02 EffectsofAcupointInjectionofXiangdanInjectionatPhiltrumandBaihuiinIschemia-Repe rfusionRats SHENYanhong.NanyangMedicalCollege,NanyangCity,HenanProvince473000 ABSTRACTObjective:ToexploretheacupointinjectionofXiangdaninjectionatphiltrumandbaihuiinIschemia-Reper- fusion(I/R)Rats.Methods:60SDratsweredividedintofourgroupsincludingshalTloperationgroup,modelgroup,con- trolgroup,Xiangdanectiongroup.14daysbeforemolding,SDratswereperformedacupointinjectionofXiangdan injectionatphiltrumandbaihui.UsedembolustomakeMCA0mode1.Reperfused60minaftercerebralischemia30 rain,thechangesoftheactivityofS0D,the1eve1ofMDA,N0andNOSinbraintissueweremeasured.Results:Thefie- tivityofS0D,thelevelofNOandNOSinbraintissueweredecreasedinthemodelgroupcomparedwithshamopera- tiongroup,andincreasedinordinatelyincontro1groupandXiangdaninjectiongroupcomparedwiththemodelgroup. ThelevelofMDAinbraintissuewasincreasedinmode1groupcomparedwithshamoperationgroup,anddecreasedin- ordinatelyincontrolledgroupandXiangdaninjectiongroupcomparedwiththemodelgroup.Differencesoftheactivity 0fS0D.thelevelofMDA,N0andN0SinbraintissuebetweencontrolledgroupandXiangdaninjectiongrouphadsta- tisticalsignificance.Condusion:TheacupointinjectionofXiangdaninjectionatphiltrumandbaihuicandecreasethe damageofIschemia-Reperfusiontoprotectthebraintissue. KEYWORDSXiangdaninjection,Philtrum,Baihui,Ischemia-Reperfusion 缺血性脑血管病占全部脑血管疾病的7O以 上,严重威胁人类生命与健康,再灌注过程中,不可 避免造成再灌注损伤,临床对于再灌注损伤治疗药 物繁多,方法众多,寻找和探索更为有效的预防药物 和疗法,已成为医学领域广泛关注的研究课.本 实验通过建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,采用穴 位注射的方法,于人中,百会穴注射香丹注射液,检 测各组大鼠脑组织匀浆中SoD(超氧化物歧化酶) 活力,MDA(过氧化脂质的代谢产物丙二醛)含量, No(一氧化氮)与NoS(一氧化氮合成酶)含量,探 讨香丹注射液大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,为临 床应用和选择治疗方式提供实验依据. 1材料与方法 1.1实验动物与分组清洁级SD大鼠6O只,雄 性,体重200~220g,由华中科技大学同济医学院实 验动物中心提供,随机分为假手术组,模型组,对照 组,香丹注射液组,共4组,每组15只. 1.2实验药物香丹注射液(江苏神龙药业有限公 司生产,国药准字Z3202O159,批号101215);丹参注 射液(神威药业有限公司生产,国药准字 Z13020777,批号:i01126). 1.3试剂No(一氧化氮试剂盒)及NOS(--~ 氮合成酶)试剂盒,SoD(超氧化物歧化酶)和MDA (过氧化脂质的代谢产物丙二醛)试剂盒,均由南京 建成生物工程研究所提供. 1.4方法60只SD大鼠随机分为4组.分别为: 假手术组,模型组,对照组(丹参注射液组),香丹注 射液组,每组15只.《大鼠穴位图谱的研制》定位 "人中,百会",进行穴位注射.对照组注射丹参注射 液,香丹注射液组注射香丹注射液,给药剂量均为 2282囡JModTheor&ero~;Vo1.24,No.19,Oct2Ol12011年第24卷第19期慝学 理论与致艘二 0.1rnl/~,1次/d,假手术组和模型组给予等体积生 理盐水,连续注射14d.第15天末次给药lh后,线 栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型.假手 术组仅分离动脉而不插入线栓,其他操作步骤相同. 缺血30min,再灌注60rain后,断头取脑法取出脑组 织,全脑称重,冰冷生理盐水冲洗,机械匀浆机匀浆, 制成10的组织匀浆,4O00r/min离心15rain,取 上清液,分3份,按试剂盒说明操作步骤,分别测 定脑组织匀浆中SoD活力,N0及N0S含量, 仍A含量. 1.5统计学处理采用统计学软件SPSS17.0统 计分析,所得数据采用均数土差表示,组间均数 比较采用单因素方差分析,Q检验,P<O.05显示差 异有统计学意义. 2结果 2.1香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠SoD和 MDA含量的影响脑匀浆SOD活力:模型组与假 手术组相比明显降低(P<O.O1);对照组和香丹注 射液组较模型组均有所增加(P<O.05).对照组与 香丹注射液组比较差异有统计学意义(P<O.05). 脑匀浆MDA含量:模型组与假手术组相比明显升 高(P-<O.01);对照组和香丹注射液组较模型组均 有所降低(P<O.o5).对照组与香丹注射液组比较 异有统计学意义(P<O.o5).见表1. 表1香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠 SOD活力和MDA含量的影响I士s) 注:a:与假手术组比较,P<O.Ol;b:与模型组比较,P<O.01Ic: 与对照组比较,P<O.05;d:与香丹注射液组比较,P<O.05. 2.2香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠No和NoS 含量的影响脑匀浆No,NoS含量:模型组与假 手术组相比明显降低(P<O.01);对照组和香丹注 射液组较假手术组有不同程度的降低(P<O.05), 较模型组有不同程度的升高(P<O.05).X,-/"照组与 香丹注射液组比较差异有统计学意义(p<O.O5). 见表2. 3讨论 脑缺血一定时间后恢复血供,其功能未能恢复 反而加重,引发的脑机能障碍,称为脑缺血再灌注损 表2香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠 NO和NOS含量的影响(士5) 注:a:与假手术组比较,P<O.Ol;b:与模型组比较,P<O.O1;c: 与对照组比较,P<O.05;d:与香丹注射液组比较,P<O.05. 伤.目前公认损伤机制如下[1]:氧自由基的生成,细 胞内钙超载,能量代谢障碍,兴奋性氨基酸毒性等. 缺血再灌注损害严重超过缺血本身,缺血时间与再 灌注后所产生的氧自由基数量呈正比关系.缺血期 脑组织缺血,缺氧,代谢率降低,酸性代谢产物堆积, 储备自由基的产生底物并提供环境,由于自由基产 生速率与组织的氧分压关系密切,缺氧条件限制自 由基生成.再灌流期恢复氧供,自由基产生速度加 快,但前期SOD水平较低,迅速增加的氧自由基可 进一步引起细胞代谢的紊乱与功能障碍,甚至细胞 死-~z.脑缺血缺氧期可引起细胞外兴奋性氨基酸含 量增加,刺激脑内精氨酸代谢产生No,N0过量则 导致神经毒性作用发生[2].N0S是N0合成的关 键因素,体内No的生物作用完全依赖于NoS活 t't.N0能扩张lIIt管并充当生物信息递质,调节神 经系统,维持血管稳态.香丹注射液由丹参,降香两味中药提取精制而成,对缺血性脑病临床疗效良好, 具有扩张血管,保护脑组织缺血缺氧,清除自由基, 抗衰老,改善血流变学等功效.本实验表明人中,百 会穴注射香丹注射液明显提高s0D活力,减少 MDA含量,减轻氧自由基再灌注期对脑组织的损 害;可增加脑缺血再灌注大鼠脑组织中No,NoS 含量,调整血管功能,改善脑组织内环境,保护脑组 织.本实验为今后临床应用香丹注射液保护脑缺血 再灌注损伤奠定可靠的实验依据和理论基础,值得 临床推广. 参考文献 [1]宝鲁尔.心肌缺血再灌注损伤发生机制研究进展口).内蒙古民 族大学,2009,15(2)l126.127. [z]陈利平,王发渭,韩志涛,等.苦参碱对脑缺血再灌注损伤炎性 因子的影响[J].中国中医急症,2010,19(12):2098-2099. 收稿日期2011~16 (编辑江山) o致作者0 关于数字的用法 本刊执行GB/T15835—1995《关于出版物上数字用法的规定》.公历世纪,年代,年,月,日,时刻和计 数,计量均用阿拉伯数字.小数点前或后超过3位数字时,每3位数字为一节.节问空1/4个汉字空,如, ''1,329.476,5"应写成"1329.4765".但字数词和年份,页数,部队番号,仪表型号,标准号不分节.百分数 的范围和偏差,前一个数字的百分符号不能省略,如:5,95不要写成5,95,而百分数公差其中心值 与公差用圆括号括起,其后写"".如(65?2),亦可写作"65士2",不得写作"65士2".附有长度单 位的数值相乘,按下列方式书写:4cmX3cmN5cm,而不能写成4×3×5cm.