微生物考试重点 (1)

微生物考试重点 1、名词解释 1.芽孢 指某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量极低，抗逆性极强的休眠体。 2.菌落 指在固体培养基上个，由一个细菌或孢子生长，繁殖形成的肉眼可见的群体，称为菌落。 3.酵母菌 一种俗语，指一群单细胞的真核微生物，通常以芽殖或裂殖来进行无性繁殖的单细胞真菌，极少数种可产生子囊孢子进行有性繁殖。 4.霉菌 是一种俗语，是一类丝状真菌的统称。分类上分属于鞭毛菌亚门，接合菌亚门、子囊菌亚门、担子菌亚门和半知菌亚门。 5.温和噬菌体  指侵入宿主后，将其核酸整合到细菌染色体上，该细菌细胞继续生长繁殖，并使宿主细胞溶原化的噬菌体。 6.烈性噬菌体  指入侵宿主后，改变宿主的性质，使之成为制造噬菌体的“工厂”，产生大量新的噬菌体，最后导致菌体裂解死亡的噬菌体。 7.溶源性 溶源性是温和噬菌体侵入宿主细菌细胞后产生的一种特性。即当温和噬菌体侵入宿主细胞后，在宿主细胞中检查不到噬菌体的存在，但却具有产生成熟噬菌体粒子的潜在能力。 8.选择性培养基  根据某种微生物的特殊营养要求或对某化学、物因素的抗性而设计的培养基，其功能是使混合菌样中的劣势微生物变为优势微生物，从而提高该微生物的筛选效率。    9.鉴别性培养基 培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌的菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基。 10.发酵（生化意义上） 发酵工业上的发酵是指任何利用好氧或厌氧微生物来生产有用代谢产物的一类生产方式；而在生物化学中发酵是指在无氧条件下，底物脱氢后所产生的还原力[H]不经过呼吸链而直接传递给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。 11.次级代谢    是相对于初级代谢而提出的一个概念，指微生物在一定的生长时期，以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动没有明确功能的物质的过程。如某些色素、抗生素、毒素、激素和生物碱等的代谢。 12.连续发酵 根据所绘制的典型生长曲线，针对所采用的单批培养或密闭培养而采取相应的有效的一种培养方式，当微生物培养到后期时，一方面以一定速度连续流进新鲜培养基，并立即搅拌均匀，另一方面，利用溢流的方式以同样的流速不断流出培养物，这样培养物就可长期保持对数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上。称为连续培养，又称开放培氧，如用于生产实践上，就称为连续发酵。 13.最适生长温度  是指某菌分裂代时最短或生长速率最高时的生长温度。 14.巴氏消毒法    是指对牛奶、啤酒、果酒和酱油等不能进行高温灭菌液体进行的一种消毒方法，其主要目的是杀死其中无芽孢的病原菌，而又不影响它们的风味。 15.质粒 一种能独立于染色体之外的，能够自主复制的遗传因子。 16.诱发突变  指通过人为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高基因突变频率的手段。 17.自养微生物 以二氧化碳作为主要或唯一的碳源，以无机氮化物作为氮源，通过细菌光合作用或化能合成作用获得能量的微生物。 18.异养微生物 包括两类：化能异养型微生物的能源和碳源都来自于有机物，能源来自有机物的氧化分解，ATP通过氧化磷酸化产生，碳源直接取自于有机碳化合物。光能异养微生物以光为能源，以有机碳化合物（甲酸、乙酸、甲醇、异丙醇等）作为碳源和氢供体进行光合作用而生长繁殖的微生物。 19.菌株(strain) 从自然界离得到的任何一种微生物的纯培养物 2、简答题 1.试述细菌革兰氏染色的步骤、原理和结果? 答：（1）步骤：①先用结晶紫染色，菌体呈紫色；②再加碘液媒染，菌体呈紫色；③然后用乙醇脱色；革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌无色；④最后用沙黄或番红复染，革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。 （2）原理：革兰氏染色结果与细胞壁组成有关，因为革兰氏阳性细菌细胞壁较厚，肽聚糖含量较高，网络结构紧密，含脂量又低，当它被酒精脱色时，引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小，从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出，故菌体呈紫色；可是革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量低，而脂类含量高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增大，结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来，故革兰氏阴性细菌呈复合液的红色。 （3）结果：革兰氏阳性细菌呈紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。 2.什么是选择性培养基，试举一例并分析其中的原理? 答：选择性培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，其功能是使混合菌样中的劣势微生物变为优势微生物，从而提高该微生物的筛选选择性培养基的设计主要是投其所好和取其所抗。前者是加分离对象喜欢的营养物，使其大量繁殖，在数量上占优势；后者是加入分离对象所固抗的物质，抑制或杀灭其他微生物，使分离对象占优势。如Ashby无氮培养基：甘露醇1％，KH2PO4  0．02％，MgSO4·7H2O 0．02％，NaCl 0．02％，CaSO4·2H2O 0．01％，CaCO3 0．5％。该培养基用来富集自生固氮菌。培氧基中没有氮源，甘露醇为自生固氮菌的碳源。 3.什么是鉴别性培养基，试举例分析其鉴别作用和原理? 答：鉴别性培养基 ：培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌的菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基。 最常见的是EMB即伊红美蓝乳糖培养基，主要用于饮用水、牛乳的大肠杆菌等细菌学检验和遗传学研究。其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。低酸度时二者会结合形成沉淀，起产酸指示剂的作用。如大肠杆菌分解乳糖产生大量混合酸，可染上酸性伊红，伊红又和美蓝结合，菌落被染成深紫色，从菌落表面的发射光中还可以看到绿色金属闪光。 4.什么叫无氧呼吸(厌氧呼吸)，比较呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点? 答：①无氧呼吸(厌氧呼吸)是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物(个别为有机氧化物)的生物氧化。这是一类在无氧条件下进行的产能效较低的特殊呼吸。其特点是底物按照常规途径脱氢后，经部分呼吸链递氢，最终由氧化态的无机物(个别是有机物延胡索酸)受氢。②呼吸也称为有氧呼吸，其与无氧呼吸的共同点是它们代谢都经过电子传递链进行氢传递；区别是氢受体不同，有氧呼吸最终氢受体是氧分子，而无氧呼吸的氢受体是氧化态的无机物或有机物。③无氧呼吸与发酵的共同点是它们都在无氧条件下进行的；区别是无氧呼吸通过电子传递链进行氢的传递，而发酵过程中氢的传递不经过电子传递链。 5.试绘图说明单细胞微生物的生长曲线，并指明各期的特点，及如何利用微生物的生长规律来指导工业生产？ 答：①延滞期：生长速率常数为零、菌体粗大、RNA含量增加、代谢活力强、对不良环境的抵抗能力下降。②对数期：生长速率最快、代谢旺盛、酶系活跃、活细菌数和总细菌数大致接近、细胞的化学组成形态理化性质基本一致。③稳定期：活细菌数保持相对稳定、总细菌数达到最高水平、细胞代谢产物积累达到最高峰、是生产的收获期、芽孢杆菌开始形成芽孢。④衰亡期：细菌死亡速度大于新生成的速度、整个群体出现负增长、细胞开始畸形、细胞死亡出现自溶现象。 根据微生物的生长曲线可以明确微生物的生长规律，对生产实践具有重大的指导意义。故根据对数期的生长规律可以得到培养菌种时缩短工期的方法:接种对数期的菌种,采用最适菌龄，加大接种量，用与培养菌种相同组成的培养基。有如，根据稳定期的生长规律，可知稳定期是产物的最佳收获期，也是最佳测定期，通过对稳定期到来原因的研究还促进了连续培养原理的提出和技术的创建。 6.以EBM（伊红美蓝乳糖琼脂培养基）为例，分析鉴别培养基的作用原理。 答：EMB主要用于饮用水、牛乳的大肠杆菌等细菌学检验和遗传学研究。其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。低酸度时二者会结合形成沉淀，起产酸指示剂的作用。如大肠杆菌分解乳糖产生大量混合酸，可染上酸性伊红，伊红又和美蓝结合，菌落被染成深紫色，从菌落表面的发射光中还可以看到绿色金属闪光。原理即是培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌的菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基。 7.菌种衰退的原因是什么，如何区分衰退、饰变与杂菌污染? 答：菌种衰退(degeneration)的根本的直接的内因是基因的自发突变。菌种衰退有一个从量变到质变的过程，菌株在生长繁殖过程中自发突变，其后代变异株中的负变株比例总是高于正变株；因此，随着繁殖代数的增加，负突变株在整个群体中的比例逐渐增大，致使菌株的优良性能逐渐衰退。然而，基因的自发突变不是没有原因的，只不过这些原因属非人工有意设置而已。因此，凡能引起基因突变的一切环境因素都可视为菌株衰退间接原因。其他如菌种传代增加等也是菌种衰退的原因。 基因突变所造成的菌株衰退具有可遗传性。而饰变主要是环境条件导致的、不发生遗传结构改变的、只是在转录与转译水平上的一种变化，因此，它没有遗传性，在解除相关环境因子后，改变了的性能可以恢复。因此它与衰退有本质区别。  生产菌株的杂菌污染也可导致菌株优良性能的衰退，但一旦菌株被分离纯化，优良性能即可恢复。故不难鉴定。 8.简述汤非凡的生平以及给我们的启示。 答：汤非凡是我国著名的的中国第一代医学病毒学家，医学微生物学家，医学教育家。他建立起中国第一支防疫队伍，他生产了中国自己的青霉素、狂犬疫苗，白喉疫苗，牛痘疫苗，卡介苗和丙种球蛋白。在病毒学发展的早期，他用物理方法研究阐明病毒的本质。1955年他首次分离出沙眼衣原体世界首支班疹伤寒疫苗，是世界上第一个分离出沙眼衣原体的人，故沙眼病毒又称为"汤氏病毒"。他对中国的生物制品事业的发展有不可磨灭的功绩。他在抗日战争期间和抗日战争胜利后两次重建中国最早的生物制品机构——中央防疫处 并创建了中国最早的抗生素生产研究机构和第一个实验动物饲养场。中华人民共和国成立后他主持组建了中国最早的生物制品质量管理机构——中央生物制品检定所。是中国病毒学、免疫学奠基人。 沙眼衣原体之父汤飞凡被称为中国离诺贝尔奖最近的科学家，因为许多的的原因而被淹没在历史的长河里，渐渐被人遗忘。可是历史是不应该不遗忘的，尤其是像汤非凡这样的大师，他对于中国的生物制品事业的发展有不可磨灭的功绩，是一个必须写在世界医学史上的中国人。尤其是他的许多品质值得我们学习，从小对于学习的刻苦，对于科学的无私奉献，吃苦耐劳，坚持不懈，能够以自己作为实验的研究对象，总是一心一意做研究，正是今天的我们所需要学习和追求的精神。无论时代怎么变迁，我们都应该学习他的品质，鞭策自己，为国家和人民奉献自己的力量。