【doc】宫颈粘液酶学对比研究

【doc】宫颈粘液酶学对比研究 宫颈粘液酶学对比研究 666 囊 陕西压学杂志1994年ll】月第23卷第l1期 l b?' l目}'. R1Jl"'P 宫颈粘液酶学对比研究 西安医科大学第一附属医皖妇产科内分泌研究室(710061) 王红曹缵孙V毛丈军 ———一————一 摘要对33例月经正常的不孕患者进行月经周期动态观察,测定宫颈粘液中过氧 化物酶(Px),乳酸脱氢酶(LDH),碱性磷酸酶(AKP)活性及五清孕酮(P)雌二醇(E), LH结果明三种酶均在围排卵期活性下降开j成低各;三种酶相比以Px活性在围排卵期 下降幅度最大;三种酶低谷日与排卵日一致率分别为AKP72,Px68,LDH58(尸> 0.05).结果提示三种酶均可预示排卵,但Px具有围排卵期活性下降明显,,低谷日与排卵 日一效率高之优点,故以Px洲定作为预剥排卵指标最佳 主题词王室塑整鎏/!赞写,甍,耩?^ 宫颈粘液在生殖过程中起着不可忽视的作结束时一次测定酶括性. 用,因此对它的研究具有重要意义.近年来国内2.2酶活性测定. 外学者先后对宫颈粘液多种酶进行了研究,结2.2.1Px.活性测定. 果表明过氧诬物酶(Px),乳酸脱氢酶(LDH)和宫颈粘,液经称重后,用含钙韵Tris,HC1 碱性磷酸酶(AKP)在月经周期中具有规律性缓冲液lml在冰浴中匀浆,低温离心 3000× 变化,恒看无共同变化规律,何者变仡最典lOmia,上清渡用于测定Px活性.以愈创 术酚 型,国内外均未见报道.本研究目的拟通过比较为底物t加入HO.后用分光光鹿计 测定最初 上述三种酶的变化规律,推荐最佳者作为预测~nin;每分钟的吸光度.傅活性以每克 湿重宫 排卵的指标颈粘液内所食酶单位表示,一个酶单位指每分 .批内变 材料和霎.量8.7.2实Z验 1病铡选择 病例选自我院生殖内分泌专科门诊33例 月经周期正常的不孕妇女.年龄23~38岁.所 有研究对象在进^本研究前6个月未接受内分 泌治疗,未采取避孕措施,无官颈炎症,共观察 33个周期...--, 2实验内容及方法' 2.1采集宫颈粘液一 每位被规察者按其月经周期分另在卵袍期 和黄体期隔13及围排卵期每日采集宫颈粘液. 用窥器暴露宫颈,擦去表面分泌物.用TB针管 入官颈外口内0.5cm抽取宫颈粘粮,置于已称 重的容器内,保存在一Z0c冰箱中,待一个周期 *冒茹c自然科学基盘甄助项目 2.2.2IDH和AKP插性测定 官颈粘渡称重后,加入生理盐水lml在球 浴l中匀浆,低温离心3000g×10min,用上清渡 测定LDH和AKP活性.LDH活性测定方法, 乳酸为基质,在氧化型辅酶I存在时,用分光 光度计测定丙酮酸哇l成量.LDH活性以每克 温重宫颈粘液中所古LDH活性单位数表示,1 个活性单位指lmi宫颈粘渡上清液中LDH在 37ne与基质作用15mln,能生成1微克分子丙 酮酸.实验批内变异系数3.7,批间变异系数 为89.AKP活性测定用快速测定法,单位 以每克湿重宫殒粘液中所含金氏单位表示.金 氏单位定义为每100ml宫颈粘液上清渡中 A.KP活力可产生1mg酚者为】个金氏单位. 实验批问变异系数1.4,批问变异系数3. 陕西医学杂志1994年11月第23卷第11期667 .. 7_03.血清促黄体生成索(IH),雌二醇 )和孕酮(P)的测定. 在取宫颈粘液同天,于上午10,12时抽 血,离心后将血清保存于--20?冰箱中,待一个 周期结束时一次测定,甩I标记韵放射免疫 双抗体法双管测定LH,E.和P,实验批内变异 系数6,批间变异系数8.一 结果. 本研究观察33个周期,黄体中期血清均 大于5ng/ml,表明为有排卵周期叫排卵日以 血清LH蜂值日表示,为O'天,排卵前为D一, D—,D-…?,排卵后为D+l,D+,D…".33 个周期中19个周期单测Px活性;14个周期 测AKP活性,其中蛆个周期同时测LDH活 性. 33个周期均出现月经中期LH峰,均值为 132.5土87.7qmIU/ml;E2嶂前形成峰值, 然后下降,在排卵后再次上升;血清P在排卵 后第达14.6-+-7.34ng/ml~内分泌激索在月 经周期中韵变化同其它学者报道基本一致】. Px.LDH,AKP在月经周期中各周期间差 异较大,但有共同的变化规律,在月经中期酶活 性呈低值状态,均有低谷日出现.显示了三种酶 均数变化规律,LDH和AKP活性卵_泡期呈下 降趋势,其闻有波动;而Px呈线型下降它们 共同壁化规律是在卵泡期酶活性相对较高,而 在国排l卵期酶活性明显下降,P持续低水平 3而LDH和AKP主要表现为排卵日形成一 低谷.三种酶活性在排卵后ld均明显上升,上 升幅度达5倍. 表1三种酶在月经周期中的比较 表2目排卵期酶性下障倍数比较 图1CMPx,LDH,AKP在月经周期中的变化 为了比较三种酶在围排卵期活性下降有无 意义,将月经周期分为三期;卵泡期(D一至 D—a),围排卵期(D—z至D+)和黄体期(D一至 D.其结果见表1,由表中可见三种酶活性在 宙排卵期明显低于卵泡期和黄体期,P<0.01. 表显示了三种酶从卵-滟期至围排卵期活性下 降倍数比般,以Px活性下降倍数最高,其次为 IDH.AKP下降倍数最低,见图1. 国口目 310十】,日 图2酶活性低备口与排卵一致车 668 —- 陕西医学杂志1994年l1月第23卷第11期 三种酶低谷日与排卵日关系见图2,由此 可见,三种酶低谷日绝大多数周期集中在D一 至D+.,仅AKP14的周期低答日在D一三种 酶低谷日与排卵日一致率最高为AKP(72), 其次是Px(68)和LDH(58),三者经检 验无显着性差别. '讨论 宫颈粘液物理性状受体内甾体激素水平的 影响而表现为周期性变化,宫颈粘液P]【,LDH, AKP亦同样表现为周期性变化,其特点是围排 卵期酶活性呈低值状态,此时酶活性明显低于 卵泡期和黄体期,排卵后1d酶活性迅速上升. 但三者间也存在一定差异,Px在蟊排卵期活性 下降幅度大,低值状态持续时间长,而AKP和 LDH活性在卵泡期虽呈下降趋势,但下降幅度 均小于Px.因此三种酶相比以Px在月经中期 下降最明显. Px,LDH,AKP低谷日绝大多数周期在排 卵日及排卵前后ld,从而提示通过观察酶活性 低谷日估计排卵时间,也就是说它们的测定可 以作为监测排卵的指标.虽然AKP低谷日与 排卵日一致率最高,但有14的躅期低谷日在 排卵前3d,而Px和LDH的变化基本与排卵时 间相吻合.故就反映排卵时间准确性而言,以 Px和LDH测定为好. 目前现有的监测排卵方法很多,常用有激 素测定,宫颈粘液评分,B超等,其中以血LH 测定最可靠,精确,担必须多次抽血,且测定方 法繁琐,药盒昂贵,不够经济,多用于研究,临床 应用受限.B超是目前应用较多的监洲排卵方 法之一,方便可靠,能直观地了解卵泡发育情 况,但仪器昂贵.而宫颈粘液评分团简便经济而 广泛应用在我们以往的研究结果表明,三种酶 与宫颈粘液评分相比,在反映排卵周期的可靠 性及反映排卵时间准确性方面相似,但宫颈粘 液评分系计数指标并非计量指标.Px测定具有 方法简便之优点在愈创术酚存在的条件下,加 入HO可立即变色,肉眼容易观察.方法简 便,反应快速l而LDH,AKP括性测定过程试 剂繁多,且需要一定的温浴时间.总而盲之2x 测定具有围排卵期活性下降明显,低谷日与排 卵日一致率高,方法简便之优点,故以Px测定 作为监恻排卵指标最佳..此外,Px活性低值期 在捧卵前3d至排卵后1d,此期恰是生育期,有 研究表明阴道分泌物恬性与宫颈粘液中Px 活性相似的变化规律口.如通过简便测定方法, 妇女自行测定,这样Px测定对不孕妇女可指 导生育最佳时机,而对要求计划生育的妇女可 指导避孕期.屙时本研究结果对今后继续进行 方法学改进提供了理论依据. 参考文献 iT~kehisaT-Lacca~dehrogenaaeinoerZc~mll— custcorrelationw;ovu]atn.influenceofovar~ onateroidhormones.andisozyrnepatterh.Ferfil SteriI,1980;33t13S 2王红,曹缵孙,翁其亮,等.宫颈粘渡过氧化物酶 在月经周期中的变化规律.生殖与避孕,1990~10 9 3MoghisslKs,Sy.erFN,BctrlnB.Cyclicchangesof cervicalmucu8enzymesrelatedt6thetimeof0 tatlon.I.Alkalinephosphatase.AmJObstetGy- necol,1976;l25t1044 4RossGT.CarIleCM.LipstettMB,a1.Pitu— itaryandgonadalhormohesinwOnlendurmgsport- tanousandinducedovu]atorycyde~-RecentPr0g HormRes,】970i26-1 5TsibrlsJC,VirginFD,DawoodFS.f.Cervieov- ag[na]peroxldasetmarkersofthefertileperiod? OhstetGyneeo[,1986;67{316 (1gg3—1O一25收稿)