醋酸泼尼松龙注射液细菌内毒素检查方法的建立

醋酸泼尼松龙注射液细菌内毒素检查的建立 ,, , , ; ,, ; , , , ,,, , ,, , ,,, , , ,, , , , , , ,,, , ,,,, ,,,, ,,,, ，,,,, ( 样品测定 分别取批号为 ,,,, ，,,,, ,,,, 在甘油( , 中易溶〔 〕， 解， , ) , 应研磨使其溶解。 但溶解速度很慢， 按《的硼酸甘油滴耳液， 中国医院制剂》方法测得硼酸含量 , , , 硼酸的酸性是由于硼原 硼酸是一元弱酸， , , ,× , , ， , ,,, (，,,, , 平均含量 , ( , , 。 ,分别为 , (，,,, ( , , ， , ,, , , 子的缺电子性所引起的，硼酸在溶液中能与水离解出来的 , , , ,按加 入 甘 露 醇 法 测 得 硼 酸 含 量 , ( , , ， 均 含 量 , ,, , 平 离子生成加合物， ,，〕 使〔 相对升高，溶液显酸性。硼酸与氢氧 (, ,, ),, ,。两种方法所测硼酸含量差异有显著性 ,, (, 。 化钠中和生成的盐在水中极易水解，以酚酞作指示剂在其变化, 讨论 范围 内 不 能 准 确 指 示 等 当 点。而 甘 露 醇 是 硼 酸 酸 性 强 化 依据《中华人民共和国药典》中硼酸含量的测定方法，考虑 — 剂——硼酸与甘露醇可生成鳌合物，是较强的一元酸，其电离采用加入甘露醇法测定硼酸甘油滴耳液中硼酸的含量，在多元 , , 相当于醋酸， 常数是硼酸的 ,× ,倍， 从而能以酚酞作指示剂，醇中，甘露醇用量少，体积小，终点敏锐，从硼酸与甘露醇反应 用氢氧化钠液直接滴定。由于此滴定反应为水解反应，容易使的理论上推断此方法是可行的。另依据《湖北省医院制剂规 滴定未达终点时即显红色，因此应加入足量的甘露醇，使平衡范》中硼酸甘油含量的测定方法，笔者考虑采用接近滴定终点 向左移动，才能使中和反应进行完全， , 终点显示准确 〔 〕。加中性甘油法，此方法滴定至溶液显持久的淡红色，滴定终点 在硼酸含量测定过程中，应注意待硼酸完全溶解于甘油中的判断更加明确。依据硼酸与甘油的反应方程式，该反应为不 方可测定其含量，否则因硼酸未完全溶解而导致含量测定偏差完全反应，易发生水解，笔者考虑用中性无水乙醇作为媒介，排 较大。甘油黏度大，在移液管内不易流出，应尽量减少因取样除在滴定过程中因水解对含量测定产生的影响，而甘油与乙醇 量的差异导致的含量测定不准确。可以任意比例互溶，故不存在因溶解不均而导致测得硼酸含量 以前虽有文献报道用加入甘露醇法测定硼酸含量的方法，不准确。因此笔者选择此 ,种方法进行硼酸含量测定。 但未见方法学验证，在其他文献中也未见相关报道。本实验结 ,种方法比较，结果表明: , ,， 加入甘露醇法回收率高 , , 果显示:加入甘露醇法操作简便，快速，结果准确，可用于硼酸重现性较好，相对偏差较小;接近滴定终点时加中性甘油 甘油滴耳液的含量测定。 , ,，法和无水乙醇溶剂法回收率虽然均 , , 但均显著高于《中 〔参考文献〕国医院制剂规范》中含量测定方法( , , ,) 且后 回收率为 , (, ， 〔〕 , 中华人民共和国卫生部( ,〕 ,版( 中国医院制剂规范〔 ( 北京:中国两种方法与第一种方法比较差异均有显著性 ,, (, 。, ,, ) ,, :, ,, 医药科技出版社，,,,,, , (种方法的重复性、稳定性和线性均较好。 , 湖北省卫生厅( 〔〕 ,〕 武 武 湖北省 医院制 剂规范 〔 ( 汉: 汉 出 版 社， ,,,,, ,, :，, ( 在制剂制备过程中，因温度对硼酸甘油的稳定性有影响， , 徐德琴( 〔〕 ,( 硼酸甘油滴耳液制备方法的改进〔 〕 武警医学院学报，高温易导致甘油分解成丙稀醛而使颜变黄色或棕色，并增加药 ,,, ( ) ,, ,, ，, , :, ( ,物的刺激性 〔 〕。其反应过程如下: , , ( , ,? , , ,, , , , , , ) , ,, , 王 群， 〔〕 郗 张 恒， 颖(硼酸甘油滴耳液含量测定方法的比较 ,, ，， ,, 故不能加热使之溶解， , ,、 而硼酸在沸水( , ) 沸乙醇 ,( ,, ，( ) , ( 〔〕 中国药业，,,, , :, , , , 中易溶，和 ,,?甘油( ,) , ,、 , , 中溶 在水( , ) 乙醇( , ) 醋酸泼尼松龙注射液细菌内毒素检查方法的建立 刘映倩 ( ,,, ) 重庆市药品检验所，,,, 〔摘 要〕 目的 探讨醋酸泼尼松龙注射液细菌内毒素检查法的可行性。方法 以两个厂家的鲎试剂对醋酸泼 尼松龙注射液分别进行干扰实验和确证实验。结果 醋酸泼尼松龙注射液内毒素检查结果均符合规定。结论 醋酸泼 尼松龙注射液的热原检查可用细菌内毒素检查法。 〔关键词〕 泼尼松龙，醋酸;细菌内毒素检查法;鲎试剂;干扰实验 〔 ,,, ; ,,, 〔 中图分类号〕 , , (, , , (, 文献标识码〕 〔 , ,, , ,, ) ,, ,, , , , 文章编号〕 ,,,, ( ,, , , 醋酸泼尼松龙注射液为肾上腺皮质激素类药物，具有抗 , ,批号:,,, , , ,由浙 ,, ， ,,, ，,,, ,,, ， ,,,, ，,,, 规格: , ,,, ，炎、抗变态反应和抑制免疫等多种药理作用。通过实验，探讨 江仙琚制药股份有限公司提供)。以细菌内毒素检查法检测醋酸泼尼松龙注射液的可行性。 ( 试剂 细菌内毒素工作标准品( ,, 规格: , , 批号: 每支 ,,, ，, 实验材料 ,,, 中 , ,, ， 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ) 剂 ( 敏 度 ( 药品 醋酸泼尼松龙注射液(,, ,,, ， 批号:灵 ;鲎 试 ,,, 规格: , ,, (,, , 批号:,,, ， , ,, , , ， ,,,, 湛江博康海洋生物有限公司，简 〔收稿日期〕 ,,, ,, , ,, 称博康;灵敏度 ,,,, , ， , (, , , 批号:,,, ， ,,,, 湛江安度斯生 〔作者简介〕 刘映倩( ,,, ， 重庆人， ,, ) 女， 药师，学士，从事药品 物有限公司，简称安度斯) 细菌内毒素检查用水( ; ,,, 批号: ,,检验工作。电话:, ,,,, ， ,:, , ,,, ,, ,;,。 , ,,, ,,,, ,, , ,, ,,, , (, , , ,， ,, ， , 每支 , , 中国药品生物制品检定所)。医药导报 ,, ,卷第 ,期 ,,年 ,月第 , , ,,,, ( 仪器 微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司); 表, 细菌内毒素检查的干扰实验结果(博康产鲎试剂，, , ,旋涡混合器( ,, ; , ,型干式恒 上海医科大学仪器厂) , , ,, , , 样品浓度 ,, , , ,) λ, (,, , ,,， (,, , , 温器(南京三爱斯技术开发有限公司)。 反应终点浓度 , 项目 ,λ λ (λ ,, (, , , ,, λ , ,,, 方法与结果 , , ) ( , ,, ( ,的,, 细 菌 内 毒 素 限 值 ( ) 确 定 和 最 大 有 效 稀 释 倍 数 , ,,( ,) , , 的计算 , ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, (, ,, (( ,值的确定 查《,,, 国家药品标准化学药说明书内容汇 , ,,, ) ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, ( ,,, (, ,,编》 醋酸泼 尼 松 龙 注 射 液 的 最 大 剂 量 为 关 节 腔 内 每 次 注 射 ， , ,,, ) ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, ( ,,, (, ,, , ,,, ) ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, ( ,,, (, ,,,, ，, ,由 细 菌 内 毒 素 限 值 计 算 公 式 计 算 其 限 值 为 , ,,, ) ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, ( ,,, (, ,, ,,,, , 。 查阅 , , 第 , ( , , , ( ,版)得知，醋酸泼尼松龙注射液 ,为供试品溶液，,为鲎试剂标示灵敏度的对照系列，,为干扰实 (,, , ,的限值 为 ,, , , 。本 实 验 采 用 的 限 值 为 , , , ( ,, ” “, 表示阴性 验系列，“， 表示阳性， ” ,, 。 , 表, 细菌内毒素检查的干扰实验结果(安度斯产鲎试剂， , (( , ,的确立 鲎试剂灵敏度( ) , , ,,,, , , λ 以 (,, , 为 , ,,,, , 样品浓度 ,,,, , ,,) λ, (, , , ， (, , , 准， , , , ,,倍。 样品的 , ,, , λ, , 反应终点浓度 , ( , ,灵敏度的复核 根据所用 , ,的灵敏度标示值，,, , , 用 项目 ,λ λ (λ ,, ,, λ , ,, (, , , , , ) ( , ,,细菌内毒素检查用水将细菌内毒素工作标准品溶解，在旋涡混 , ,,旋器上混匀( ,,, ， ) , , 分别将细菌内毒素工作标准品稀释成为 , ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, (, ,,, ( ,,, , ,,, ) ，，，， ，，，， ,,,, ,,,, (, ,,,浓度为 , 、 、(λ,, λ的系列细菌内毒素溶液， 、(, 用检查用水 , ,,, ) ，，，， ，，，， ,,,, ,,,λ λ,, , .