【doc】风毛菊抗诱变,抗炎有效部位的筛选,定性和定量

【doc】风毛菊抗诱变,抗炎有效部位的筛选,定性和定量 风毛菊抗诱变,抗炎有效部位的筛选,定性和 定量 队药.,.听砌年第卷期?40? 参考立献 江苏新医学皖.中药太辞典(上册).上海人民出版杜,1977:23 黄运平.广西植物1994~14(4):357一蛳 0_4??N,da1.Plan~M19ff/~:432 石建功.等.高等学校化学1991;12:906 5赍古明,等 6绦程云,等 l992:713 7邢富强,等 8要炳南,等 1986:56 中草药1989;20(2>:27 药理学实验方法.第2版.北京:人民卫生出版社 中药通报19ff/~12(9)49 药理学实验教程.第2版.贵州:贵州人民出版杜 风毛菊抗诱变,抗炎有效部位的筛选,定性和定量 聂晶王桂秋张冬 —————一 (哈尔滨市职工医学院?啥尔滨tsoo~) 风毛菊(岫州Dc)是分布于北温带的菊科二年生草率植物, 在全世界约有4?余种,我国约300种l1】.车属中的雪莲,木香是着 名的中药.传统医药中用于酵寒,止血,解痉,降压,止泻,治疗腹痛 等l2].风毛帮在曩尤江省有?种b】.尚未引起广泛关注.摄有开发 前景的药用植物赍彝.有关风毛菊的化学戚分和细胞分类的研究, 国内蚪已有部分报道H|矗l.本文对凤毛菊的抗诱变救应和抗黄作用 的有救部位.进行了筛选l定性和定量研究.根据文献及同属植 物可健吉有柑似化学成分的理论可知,风毛菊害有生物碱和黄酮类. 且动物实验证明风毛菊的煎IfI(1:1)有抗诱变和抗受作用.目此可 采用0用乙醇热回藏法提雎总生物碱井定量,用薄层层析检识定性; 0用聚酰胺作为周定相.用5o%,95%乙醇厦丙酮作为藏动相.进行 黄嗣类拄层析分竣诜脱,特挽脱蒗舟崩进行药理实验.确定有教部位 成分.如下. 1宴t材料风毛菊(全草切殷轩碎),乙醇(5o徭,85%,95徭),氯 仿,丙酮,10%盐酸,无水硫酸铺,碡一化钾,?化汞卸,鞣酸,碘化 钻钾,改良?化铬卸,盐酸镁静,醋酸钱,三氯化铝,硅瞳G静,聚酰酸 (6o目),曩秒. 2宴t方薷 2.J主鞠托镬讽|}取4种风毛菊租耪各1E,分别加^10%盐酸 10m1.宣丑下攫黄1h.滤过.取壁清滤藏每种风毛精分数^4支小试 蕾,各蕾1.拄顺序号1—4嵌农加^生物碱沉淀剂:碘一硬化钾, 化汞押,辑酸和化铋钾各2涛后均出现不同程度沉淀反应,?棕 红色0白色?棕黄色@拮红色.其中日本风毛菊(.(Thuab) 眦.)讯淀现象量哦显且沉淀韵最多,美托风毛菊(s.瑚乩凡曲, 肼.)农之.面碱地风毛菊(s.珊口.c.)和齿叶凰毛菊{ n?姗啦Nal~tff|口.c)均沉淀不明显. 色,:{ 2.2生物碱的提取取日本凰毛菊和美花风毛菊粗粉各l?分别 加%乙醇各300rn1.回流1b后穗出{沙布过堪)再加85%乙醇 O,回流Ih,重复I攻85%乙醇回濂过程将3扶液体台并蒸馏去 醇至无味,泉液蒸发至IG0ral(浓度I:1).冷却后用澈盐酸调至pH2. 过穗藏移至分藏蒲斗中.先加^I/2体积(50I『d)氯仿后再加澈氨水5 — 6ml,两DHl0以上.塞擘后振摇蒲斗微两相萃取.明显分层后放出 瓤仿于具辜锥形瓶中,剩余的碱承层用I/3阵积再萃取两攻.合并3 墩瓤仿萃取藏集中于另一分箍精斗中.加人1/2体积燕馏水振摇洗 去残留的喊水.分出氯仿层.加^20g无水硫酸钠.密塞容嚣振摇 l呻n,静止10mln后脱击氯仿溶}蠢中的水分,用干滤纸滤挝除去硫酸 钠.水谘蒜馏回收氯仿至千,加人15ral丙酮使溶液呈檄浊状态,干球 箱中救置析晶24h后称重. 2.3薄屡屉析 2.3I层析材料硅腔G硬板(5x20咖) 232展开剂环已烷:二乙胺(70:30),苹:乙醣l_己胺(7o:20: 1O). 2.33显色利改良碘化铋钾试剂(喷雾). 234对照晶1%盐酸蕾参碱溶液,1%盐酸野百合碱藩液. 235方祛0点样:取哺块屡斩板.甩铅笔尖在板一端1.5cm妊怍 起始线标记两点相距2cm,第一块板用毛嗳管将1%日奉风毛菊生物 碱提取液和I%盐酸苦参碱藏分别点在两十原点上.取第二块板用 同样方法特I啦美花风毛菊生物碱提取}壹和I%盐酸野百台碱溶聩点 在躁点.?展开:当艟开荆层至薄层全{乏2/3时取出薄屋板,喷洒显 色后出现粉红电斑点.迅速用米R量出前精至原点的总长度和原 点至各斑点的长度,计算各斑点的比移值().◎层析日谱如囝1, 围2. 圉1日本风毛帮层析匦谱匦2美花风毛菊层析图谱 , 科 l234, 々 一 rL斗 姗年第7卷1期中国中医药科技?41 2.4囊蔬胺柱屡分段取聚酰胺3e0g(60目),加^层析柱内墩宴. 特日本甄毛蔫和黄花甄毛精的承煎剂(1:1)各3O0ml在水措上浓鲭至 适量,热后加^聚醣胺l,搅拌均匀,在承潜上燕千,研细.加^{目I 备好的层析柱上,依次用加%,%乙醇,丙酮各1080ml进行谠脱,将 冼脱液浓缩至千,各加^蒸馏承m,溶解过滤i直得出滤液1,2,3 号. 2.5抗更有鼓郜住定性经药理实验证明3号液抗毙效果最好,对 两种风毛菊的3号液进行定性结果相同:0盐酸镁粉反应:红色;@ 醋酸镁糟反应:橙黄色;@三氧化帮反应:鲜黄色;@聚酰胺TIC谱如 图3o屉开剂:95%乙醇;展距:8啪.使用三用紫外分析仪(365啪)观 察为黄绿色斑点. 2.6黄嗣赛的提取与定t取两种风毛菊20g(垒草切段,研碎)分 别加人O.4%硼砂承溶藏m,在搅拌下加石灰乳调pH8—9,加热煮 沸30n,随时补充失去的水分并保持pH吕一9,倾出上清掖,用四层纱 布粗滤,同样操作再提取l攻,合并两次滤液,狰却后用盐酸调证 3o置肄箱过夜折晶,沉淀物甩蔫馏术洗至中性,60?下干燥,称重. 3站暴 31生轴^提取特定量蛄秉两种风毛菊的生物碱童占晶呈徽黄色. 称重分嗣是1.,g和1.2873B,即日本风毛菊生暂碱古量约占干重 的1.6徭,美花风毛菊约1.3% 3.2薄层层祈蛄秉分祈图1所示日本风毛菊与对照品苦参碱的层 析结果,'号为日奉风毛菊,2号是对黑品.根据斑点砥值计算可知 在0.63和O.93扯二者有相同形状,太小的斑点,根据文献?'_可知日 本风毛菊主要古有双稠哌啶娄生物碱.美花风毛菊与对厢品野百合 碱的层折结果如图2,可见在础0.38处有较太帅相同斑点,是双稿毗 咯烷生物碱. 3.3抗更有鼓郜住定性蛄秉分祈兰项黄酮娄定性实验反应均呈 (图j)在肇外光下显示黄绿色斑点,是黄酮 阳性,聚酰胺TIC谱 醇的抗炎效果最佳. 3.4黄酮妻提取轴定t分祈蛄秉分祈两种风毛精的结晶均淡黄 色,称重为0.8842和0.9960,即日本风毛菊总黄酮量约4.41%,美花 风毛菊约4.98%. 4结论 本课所获得的有关风毛精生物碱和黄酮类定性,定量资料可 为进一步研究,筛选同属系列药物提供参考散据.风毛菊是一类分 布广泛,种类繁多,取材方便,竹格低廉,扳待开发的野生药物资源 为进一步扩大研究成果,奉课题组将继续进行风毛菊抗诱变抗毙系 列苛物的筛选研究工作,有种植有救药物品种并进行制成固定 方荆的探索.如在枯床推广应用,可缩弥补菝国抗蹙,缓解放疗后不 良反应辅助药物不足,刨造良好的经济效益和杜会教盏. 参考文献 ls.IJps~~.(.舢cau?mDC.(^Ec盱&oe)【-一pdi,1977 2江苏新医学院中药大辞典(上册).上悔人民出版杜.1977;23 3韩贵林,等.Jl臣龙江植物检索.黑龙江人民出版社,1990:563 639 C?_N,WichelanIVied1987;53:432 黄运平,等.广西植物1994:14(4):357 黄运平,等.植物研究1994;14(4),395 石建功,等.高等学控化学1991:12:906 He,&:Ee.J.A,d.Muratr释1983;l?(1):,51 肖祟厚,等.中药化学.上悔科技出版社,198"/;78,8l82 放疗同时应用风毛菊治疗恶性肿瘤的临床观察 刁恩英聂晶曾丽君赵元鹏'王孝平 ?.8 (哈扣其职工医学院-哈尔滨l50啤0黑龙江省第二肿椿医簏-哈尔滨1本文在宴验证实风毛菊生物碱提取物对于环辞酰胺诱发的小鼠 骨髓细胞截檀率和染色悻畸变辜有显着的降低作用…的基础上,于 l9孵一l0—1999一.1对风毛菊配台放疗治疗恶性肿瘤琏行了临床观 察,报告如下 1瞄床资料病人选自放疗科进行放射治疗的各种癌症患者,均经 x线,cr及细胞学证实为恶性舯辔,且无其他重要脏器损伤.按放疗 顺字随机分组a实验组加例,年卤奎为41—74岁;男性3o倒,女性l0 耐,其中直肠癌5倒,肺癌3l倒,乳腺癌4倒.对照组加捌.年龄37 — 70岁;男性踅捌.女性8何,其中直肠癌3倒,肺癌强饲.乳腺癌5 倒,两组一般情况无明显差异 2方法全部患者均采用我院直线加速器8MVX线外照射.常规设 —70G~/6W一7w.实验组在放疗同时采用风毛 野,放疗根请量为60 菏每d20g术煎服.舟早晚2攻El服.直至放疗结束.风毛菊由哈尔滨 职工医学院药理科提供. ,结果 31疗鼓标准肿瘤捎退情况:按照国际抗癌协会UICC村定的标 准.完全堙解(CR):瘤体完垒稍失并维持4w以上;部分埕解 (PR):癌体两径的乘积减少>50%.井维持4w以上;稳定(sD):瘤侔 两径的乘积减少<25%,或增太25%,无新赢变出现;进展(PD):瘸体 两径的乘积增太>25%或新病灶出现.总鹱解串cR+PR.艘疗反 应的改善情况:放疗期问有时出现食欲不振,恶心,呕吐,骨髓抑制. 为放疗中的垒身反应,骨髓抑制主要表现为自细胞减少.毒副反应: 放疗前后复考肝功,肾功,心电,以幢验其风毛精的药物毒性. 32结果 3.2】舯瘸清退情况宴验组CR4捌.PB~A.例,S1)10例,PD2扫I.缓 解率cR+PR为70%.对照组cR4例,PP,20剜,SD13例,PD3甜.缓 解率cR+PR为60%.采用四格表及检验P>0.e5,两组对比无显 着差别. 322放疗反应的改善情况见下表.. 附表两组出现放疗反应的情况 323毒卧反应放疗前后复考肝功,臀功,心电,末见有明显的毒 斟反应 4讨论艘疗是治疗恶性肿瘤的主要手段之一,但放疗同时对机体 有一定损伤.出现一些常见的垒身反应.风毛菊与放疗同用.未观察 翻其明显的抗癌作用与放疗增敏作用.但却可以改善患者的一殷状