临床分离革兰阴性菌对头孢他啶和头孢西丁的耐药性检测

临床分离革兰阴性菌对头孢他啶和头孢西丁的耐药性 临床分离革兰阴性菌对头孢他啶和头孢西 丁的耐药性检测 314 第22卷第4期 2007年8月 川北医学院Vo1.22,No.4 JOURNALOFNORTHSICHUANMEDICALCOLLEGEAug.2007 临床分离革兰阴性菌对头孢他啶和头孢西丁的耐药性检测木 张翔,袁斌,赵丽 (川北医学院药物研究所,四川南充637000) 摘要:目的调查临床分离革兰阴性菌对头孢他啶(ceftazidime,CAZ)和头孢西丁(cefoxitin,FOX)耐药情况.收集临 床分离革兰阴性菌,采用琼脂二倍稀释法测定CAZ和FOX对临床分离菌株的最小抑菌浓度(MIC).结果274株临床分离革 兰阴性菌对CAZ和FOX的总耐药率分别为43.43%和64.59%;同时对CAZ和FOX耐药的比率为38.3%.结论临床分离 革兰阴性菌对CAZ和FOX的耐药现象已十分严重,应高度重视临床分离菌株的耐药性检测与控制,防止耐药菌株的传播. 关键词:头孢他啶;头孢西丁;耐药率;MIC;革兰阴性菌 文章编号:1005—3697(2007)04-0314-02中图分类号:R978.11文献码:A TheAssay0fResistanceRate0fGram-negativeBacteriaIsolatedfrom ClinicalPatientst0CeftazidimeandCefoxitin ZHANGXiang,YUANBin,ZHAOLi (InstituteofMateriaMedical,NorthSichuanMedicalCollege,Nanchong,637000,China) Abstract:ObjectiveTostudytheresistancerateofGram—negativebacteriaisolatedfromclinicalpatientstoCAZandFOX.Methods Atotalof274non—duplicatedGram— negativebacteriawerecollectedfromtheAffiliatedHospitalofNorthSichuanMedicalColle ge. Minimuminhibitoryconcentrations(MIC)ofCAZandFOXweredeterminedbyagardilutio nmethod.ResultsTheresistancerateof CAZandFOXwere43.4%and64.6%respective:theresistancerateforbothCAZandFOXwa s38.3%.ConclusionsTheresistance ratesofGram—negativebacteriatoCAZandFOXwerewidespread.Areasonableantibioticpolicyshouldbe addressedathospitaltoa— voidthedisseminationofresistantbacteria. Keywords:Cefiazidime;Cefoxitin;Resistancerate;MIC;Gram—negativebacteria 抗生素广泛应用至今,细菌耐药性的发生,发展 已成为预防,控制细菌感染性疾病的主要障碍.细 菌耐药性目前已经成为全球关注的问题.头孢 他啶(CAZ)和头孢西丁(FOX)作为第三代头孢菌 素和头霉素类的代药物,在临床上使用较为广泛, 监测临床分离革兰阴性菌对CAZ和FOX的耐药性 有利于了解临床细菌耐药状况,为临床合理使用抗 生素提供指导. l材料与方法 1.1仪器:多点接种仪,MIT—P型,日本SAKUKMA 公司. 1.2药品:头孢他啶为哈药集团制药总厂产品,头 孢西丁为中国药品生物制品检定所提供,各药均在 ?基金项目:四川省教育厅自然科学重点项目(项目编号: 2005A081) 作者简介:张翔(1947一),男,四川绵阳人,副教授,主 要从事药学的相关科研与教学. 收稿日期:2007—06—15 使用前配制,使用期限不超过12小时. 1.3菌株来源及种类分布:实验所用菌株均由川 北医学院附属医院检验科2006年从临床分离,筛选 及鉴定,其中大肠埃希菌78株,阴沟肠杆菌47株, 鲍曼不动杆菌61株,肺炎克雷伯菌23株,铜绿假单 孢菌65株,共计274株. 1.4培养基:MH肉汤,MH琼脂均为北京奥博星 公司产品. 1.5药物的MIC测定:(采用琼脂二倍稀释法): 琼脂平皿稀释法测定抗菌药物的MIC'值,以大肠埃 希菌ATCC25922和铜绿假单孢菌ATCC27853为 标准质控菌株,将冻存的实验菌株于MH琼脂平皿 上复苏后,挑取2—3个菌落接种于3mlMH肉汤培 养基中,37?培养16—18小时,菌液浓度用生理盐 水稀释到0.5麦氏单位后,用MH肉汤按1:10比例 稀释(含菌量约为10CFU/m1).用多点接种仪分 别接种于按二倍法稀释的含抗菌药CAZ与FOX(浓 度为(512—0.0625)mg/L)的MH琼脂平板上,.每一 点接种量为5000CFU.待接种菌液干后,置于37~C 第22卷第4期 2007年8月 川北医学院 JOURNALOFNORTHSICHUANMEDICALCOLLEGE Vo1.22.No.4 Aug?2007315 生化培养箱孵育18小时,然后将所观察到的菌落生 长被完全抑制时的最低药物浓度作为该药对检验菌 的MIC值.根据MIC测定的结果,参照2002年美 国NCCLS公布的标准判断敏感(s),中介(I)和耐 药(R).将CAZ的MIC?32mg/L,16mg/L和? 8mg/L及FOX的MIC?64mg/L,32mg/L和? 16mg/L分别判定为耐药,中介和敏感. 1.6统计学方法:根据实验结果,将不同种类细菌 对CAZ耐药率和对FOX耐药率相比,进行X检验, 用SIGMASTAT软件进行 2结果 临床分离革兰阴性菌对CAZ和FOX的总耐药 率分别为43.4%和64.6%.同时对CAZ和FOX耐 药的比率为38.3%(见表1). 表1临床分离革兰阴性菌对CAZ 和FOX的耐药率 ' P<0.01(x检验:"对CAZ耐药率''与''对FOX耐药 率"相比.) 3讨论 细菌不同菌种对抗菌药物CAZ和FOX的耐药 率差异较大,阴沟肠杆菌和铜绿假单孢菌对CAZ和 FOX耐药率存在显着差异.文献报道肠杆菌科与 铜绿假单孢菌对FOX存在高度的固有耐药率,与本 实验结果一致.张建民等报道鲍曼不动杆菌 对CAZ的耐药率为52.9%,本实验鲍曼不动杆菌对 CAZ的耐药率高达70.5%,这可能与不同地区CAZ 274株细菌中 使用频度差异有关.值得注意的是, 同时对CAZ和FOX耐药率也已达到38.3%. 细菌对B一内酰胺类抗生素的耐药性,可能是 由于细菌产生超广谱B一内酰胺酶(Extended— SpectrumB—laetamase,ESBLs),或去阻遏持续高产 AmpC酶,或同时高表达这两类酶而造成川.临床 分离菌株对CAZ耐药提示存在着产ESBLs的可能, 而对FOX耐药则可能是由于产生能水解头孢西丁 的AmpC酶造成.如同时对CAZ和FOX耐药的菌 株则可能是由于同时产ESBLs和AmpC酶引 起.因此可以推测产ESBLs或AmpC酶可能是 某些细菌对抗菌药头孢他啶和头孢西丁产生耐药性 的原因,同时也不能排除与细菌外排泵或外膜蛋白 突变有关.产生对CAZ和FOX高耐药率的原因 是产ESBLs和AmpC酶造成还是其他,需要进一步 实验验证. 参考文献: 【1】JonesRN,RfallerMA.Baeterialresistance:aworldwideproblem [J].DiagnMicrobialInfeetDis,1998,31(2):379—388 [2]王健,刘刚,赵廷坤.加替沙星与头孢他啶对临床分离革 兰阴性致病菌的体外抗菌活性比较[J].川北医学院, 2005,20(1):87—89 [3]任冰,谢秀丽,张小江,等.头孢西丁对210株细菌的体外抑 菌活性[J].中华医院感染学杂志,1999,9(1):55—56 [4]张建民,冯玲玲.临床分离的155株鲍曼不动杆菌的分布和耐 药性调查[J].中国药物与临床,2006,6(12):953—954 [5]邓健康,郭晓兰,黄义山.临床常见致病性革兰氏阴性杆菌的 耐药性分析[J].川北医学院,2002,17(2):78—79 [6]施金玲,蔡璇,李从荣,等.阴沟肠杆菌去阻遏持续高产 AmpC酶和超广谱13一内酰胺酶的耐药调查[J].中华医院感 染学杂志,2003,13(10):966—968 【7]张永标,张扣兴,唐英春,等.产质粒介导AmpC酶和ESBLs细 菌的耐药性及13一内酰胺酶基因型研究[J].中华微生物学和 免疫学杂志,2004,24(7):577—582 [8]彭少华,刘素玲,程文娟.大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶现 状和基因型研究[J].中国感染与化疗杂志,2006,6(2):73— 75 [9]李向阳,杨景红.阴沟肠杆菌外膜蛋白缺失与头孢西丁耐药的 关系[J].中华检验医学杂志,2002,25(6):339—341 (学术编辑:周春阳)