【doc】 高效液相色谱法测定双丹胶囊中丹参酮ⅡA的含量

【doc】 高效液相色谱法测定双丹胶囊中丹参酮ⅡA的含量 高效液相色谱法测定双丹胶囊中丹参酮?A 的含量 ? 62?J@u~qalolGuangxiTraditionalChinmeMedicalUniversity!!:堡:竺: 高效液相色谱法测定双丹胶囊中丹参酮?A的含量 涂文升,钟丽球,詹群军 (1.广西医科大学附属肿瘤医院,广西南宁530021; 2.广西医科大学药学系2001级实习生,广西南宁530027) 摘要:[目的]建立双丹胶囊中丹参酮?A的含量测定方法.[方法]采用HPLC法,色谱柱为Shim—packCLC—ODSC18 柱,流动相为甲醇:水(75:25),流速为1.5ml/min,柱温为50?,波长270nm.[结果]丹参酮?A在0.05,0.25g范围内 线性关系良好=0.9992,平均回收率为99.48%,RSD为0.50%.[结论]HPLC法简便,准确,重复性好,适用于x/.丹胶囊 的质量控制. 关键词:双丹胶囊;丹参酮11A;高效液相色谱法 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编号:1008—7486(2005)04—0062—03 DeterminingContentofTanshinone?AinShuangDanCapsulebyHPLCMethod TUWen—sheng,ZHONGLi—qiu,ZHANQun—jun (1.TheAffiliatedTumorHospital,Guang~iMedicalUniversity,Nanning530021; 2.GuangxiMedicalUniversity,Nannblg530027) Abstrcat:[Objective]ToestablishamethodfordeterminingthecontentofTanshinone1IAinShuangDanCapsulebyHPLC method[Methods]HPLCwasperformedonShim.packCLC-ODSCl8column,themobilephasewasconsistedofmethanol—water(75 :25).TheflowrateWaS1.5ml/min,thetemperatureofcolumn50C,andthewave.1engthofdetection270nii1[Results]Thelin— earrelatiomshipWaSgoodforTanshinone11Awithintherangeof0.050tO0.250g(r=0.9992).TheaveragerecoveryWaS 99.48%,andtheRSDwas0,50%(7}=6).[Conclusion]TheHPLCmethodissimpleandaccurateforcontrollingthequalityof ShuangDanCapsulewithg?)drepetition KeyWords:ShuangDanCapsule;Tanshinone11A;HPLCmethod 双丹胶囊由丹参,牡丹皮组成,具有活血化瘀,通络止痛 之功效,用于心血瘀阻所致的胸痹心痛.方中丹参为君药, 其主要有效成分为丹参酮?A.按”君药,贵重药,有毒药”的 原则,本文采用高效液相色谱法对丹参酮?A进行了含量测 定,结果满意,适用于该品的质量控制. 1仪器和试药 1.1仪器LC一10ATvp高效液相色谱仪(El本岛津):包括 LC—lOATvp泵,SPD一10Avp紫外检测器,CI’O一10ASvp色 谱柱温箱,威玛龙色谱数据工作站;高速离心机. 1.2试药双丹胶囊(广州某制药有限公司,批号:030502, 030604,030803);丹参酮?A(中国药品生物检定所,批号: 110766—200314,供含量测定用);甲醇为色谱纯;水为双蒸 水. 2方法与结果 2.1色谱务件色谱柱:Shim—packC1C—ODSC18柱 (15cm×6.0nun,5肿);流动相:甲醇:水(75:25);检测波长: 收稿日期:2005—07—25 270nm;柱温:50?;流速:1.5ml/min;理论塔板数按丹参酮 ?A峰计算不低于2000. 2.2对照品溶液的制备取丹参酮?A对照品2.Omg,精密 称定,以甲醇溶解制成浓度为0.20mg/ml的对照品溶液. 2.3供试品溶液的制备取双丹胶囊20粒,除去胶囊壳, 精密称重,研细,取粉末约4.5g,精密称定,置于锥形瓶中,精 密加25ml甲醇,精密称定重量,水浴加热回流提取1.5h.放 冷,补足重量,过滤,滤液水浴蒸至近干,残渣用甲醇溶解,转 移至5ml量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,取溶液离心 10min(15000r/min),上清液作为供试品溶液. 2.4阴性溶液的制备按处方及工艺制备不含丹参的样 品,按2.3项下方法制备阴性溶液. 2.5系统适应性试验照上述色谱条件,精密吸取x,-tN品 溶液,供试品溶液,阴性溶液各10.01,分别注入色谱仪,记 录色谱图,可见供试品色谱图中,在与对照品色谱图相应的 位置上,有一相同保留时间的色谱峰,同时样品中丹参酮?A 与相邻组份达到较好的分离,阴性样品对测定无干扰,色谱 2005年第8卷第4期广西中医学院?63? 图见图l. 一』\032976712.0516?2082 B供试品 图1HPLC色谱图 2.6线性关系考察分别精密吸取浓度为0.20mg/ml丹参 酮?A对照品溶液0.25,0.5,0.75,1.00,1.25ml,用甲醇稀 释并定容于10ml量瓶中,各精密吸取l01]注入液相色谱仪, 以浓度为纵坐标,峰面积为横坐标绘制曲线,计算回归 方程Y=8484056.58—81450.5X,相关系数r=0.9992.结 果表明,丹参酮?A在0.05,0.25g范围内具有良好线性关 系. 2.7精密度试验精密吸取同一供试品溶液10.0FI,连续 进样5次,测定峰面积.结果RSD为0.64%. 2.8稳定性考察取供试品溶液,分别于0,l,2,3,4,5,6h 进样10.0FI,测定峰面积.结果RSD为0.98%,表明供试品 溶液在6h内基本稳定. 2.9重复性试验取同一批号样品,按供试品溶液制备方 法制备5份供试品溶液.分别进样测定,结果RSD为 0.85%. 2.10加样回收率试验取已测知含量的样品(批号: 030502)2.2g,精密称定6份,分别加入一定量的丹参酮?A 对照品,按2.3方法提取并测定,计算加样回收率,结果见表 1. 表l加样回收率试验结果(=6) 2.11样品测定取批号为030502,030604和030803的双 丹胶囊,按制备供试品溶液方法制备样品溶液,精密吸取样 品溶液各10.0ul,注入液相色谱仪各测定3次,结果见表2, 表2样品含量测定结果(=3) 3讨论 3.1丹参酮?A是丹参的主要有效成分之一,故以丹参酮 ?A作为双丹胶囊的指标进行定量.此实验建立的 HPLC测定法,精密度高,重现性好,加样回收率高,测得的 数据可靠. 3.2丹参酮?对光,强热敏感,易分解变质J.故样品采 用水浴加热回流的温度不宜过高,时间也不宜过长,同时应 避光回流.甲醇为提取溶剂,其沸点为75”C,这样保证在较 低的温度下就能回流提取,避免了丹参酮?A在高温下的分 解.实验考察了三种不同条件的提取效果(?8512,】.5h;? 85?,2,5h;?95?,1.5h),结果第一种条件提取效果最好. ? 64?JournalofGuangxiTraditionalChineseMedicalUniver~ty2005.Vo1.8. No.4 在实验过程中,标准品应置于棕色瓶中并保存于冰箱,且保 存时间不宜超过2周. 3.3双丹胶囊的成分复杂,丹参酮?A的含量较低,采用甲 醇,水以不同比例进行实验,经多次试验,发现采用文献[2] 甲醇:水(75:25)方法,可使丹参酮?A与邻近的峰达到理想 的分离效果(与前后峰的分离度均大于1.5). 3.4本文建立的HPLC法测定双丹胶囊中丹参酮?A的含 量,样品预处理简便,有效成分分离较好,专属性强,分析速 度快,可作为该制剂的质量控制方法. 参考文献 [1]杨毅恒,张晓乐,王淑庆,等.乳结消散片中丹参酮?A 的含量测定[J].中国药学杂志,2001,36(1):56. [2]中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典. 一 部[s].北京:化学工业出版社,2000.58. (编辑陈明伟) 沙苑子微量元素的含量分析 唐永红.谢涛 (1.广西壮族自治区人民医院药剂科,广西南宁530021; 2.广西分析测试中心,广西南宁530022) 关键词:沙苑子;微量元素;含量分析 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编号:1008—7486(2005)04—0064—02 沙苑子为豆科植物扁茎黄芪(AstragalusCO,planat” R.Br.)干燥成熟的种子,具有补肝益肾,明目固精等功效. 有报道沙苑子具有保肝,抗炎,降血脂,降血压,抗癌,对免疫 功能的影响,镇痛,抗衰老等药理作用….本文对沙苑子的 微量元素含量进行测定,旨在为探讨沙苑子多种药用功效提 供初步的实验依据. 1与方法 1.1材料与仪器IRISLntrepidIIXsp.LCP—AES仪(美国 热电公司产品);AFS-230双道原子荧光光度计(北京海光仪 器公司产品).沙苑子(广西南宁市医药公司提供,批号: 20050204,20050328,20050516);优级纯硝酸;超纯水;优级 纯高氯酸;光谱纯测量元素标准品. 1.2测定方法将沙苑子用水洗净,自然晾干,粉碎过100 目筛,备用.取上述样品0.4g,精密称定,置125ml三角烧瓶 中,加适量硝酸,少量高氯酸分解样品溶液至清亮,定容至 25ml量瓶中,上机,进行多项微量元素测定.其中A1,, Fe,Cu,Mn,Zn元素采用电感耦合等离子体发射光谱法 (LCP—AF~)N定,se和A5元素采用双道原子荧光光度计测 定. 2结果见表1. 表1沙苑子微量元素测定结果(=3) 结果表明,沙苑子中含有丰富的微量元素,其微量元素 含量顺序为Fe)Ca)Mg)A1)Mn>Cu>Zn>As>Se,有害 元素的含量低于国家食品卫生标准(小于或等于0.5mg/ ). 3讨论 3.1沙苑子中所含丰富的Fe,,cu,Fe元素具有广泛的生 理功能和生物学作用,它们不仅与造血功能密切相关,还跟 能量代谢有密切关系[引.Fe和Cu参与造血,是血红蛋白合 成的活化剂,Fe和Cu离子与它们的络合物还具有抗菌消炎 作用除作为骨质主要构成外,还能增加毛细管壁致 收稿日期:2005—09—28 密度,降低其通透性,减少渗出,具有抗炎,消肿,抗组织胺作 用. 3.2沙苑子中gg含量较高,gg是Na一K一ATP酶反应中 中药的配体之一,缺乏时可导致细胞内K浓度降低,Na浓 度升高,引起或加重高血压.Mg不足时,8肾上腺,前列腺 素的舒张血管效应减弱,而使平滑肌收缩性增强,在细胞外 Mg及膜IVIg对血管张力,反应性及外周管阻力的调节方面 均起重要作用. 3.3Mn是对心,脑血管有益的微量元素,具有降血脂作用, 能加速细胞内脂肪的氧化,改善动脉粥样硬化患者的脂质代