高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究 ()邹春华 郑华金成 都 军 区 总 医 院 血 液 科 610083 () 西藏军区总医院高山病研究中心 850083李素芝 何国强 薛增军 牟信兵 摘 要( ) 目 的: 了 解 高 原 红 细 胞 增 多 症 骨 髓 红 系 组 细 胞 增 殖 状 况。 方 法: HA PC 患者 25 例, 正常对照 22 例身体健康者, 应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红HA PC (() ) 系 祖细胞 ——增殖能力, —及 —对红细胞生成素 的 , B FU E C FU E B FU E C FU E Epo 反应能力。 结果: 患者骨髓 ——集落数分别高于正常对照。 对, HA PC B FU E C FU E Epo HA PC 患者骨髓 B FU —E , C FU —E 刺激明显, 与正常对照组比较 B FU —E 集落数差异 (() )显著 < 0105; —集落数差异显著 < 0101。结论: 骨髓红系祖细胞增殖 P C FU E P HA PC 能力增强, 对 敏感性增高。Epo 关键词 红系祖细胞 细胞培养 红细胞增多症 高原 (高 原 红 细 胞 增 多 症 H igh a lt itu de po ly2 10Λm o lL 的 Α—硫 基 乙 醇, 015u m l 的 Epo , ƒƒ 1 ) 发病机理尚不清楚, 应用造 018% 甲基纤维素, 用 1 补足体积, 配制 , cy th em iaHA PC M DM 血祖细胞体外培养技术研究 患者红系 为 3 毫升, 培养体系, 每组重复 3 次, —HA PC B FU E () 祖细胞的增殖能力及对红细胞生成素 的 Epo 培养另加 5% 的植物血凝素—— 淋巴细胞条件 反应能力, 以探讨 患者红系祖细胞的特 培养液。HA PC 213 点及 的发病机制。HA PC 作用测定 分别设 1ƒ15ƒ, 1, Epo u m lu m l 2三种不同浓度 其余成分同培养体ƒ, u m l Epo 材 料 和 方 法 系。 1 研究对象 根据中华医学会第三次全国高在 37?、5% 、饱和湿度条件下培养 7 CO 2 2() 原医学学术讨论会诊断标准 , 患者 25天观察 —天观察 —。 8, 50, 14 HA PC C FU E B FU E 个细胞组成的细胞为 —集路, 50 个以上 例, 男 18 例, 女 7 例, 年龄 22 岁, 51 岁。 正常C FU E 的为 —集落。对 照 22 例, 男 15 例, 女 7 例, 年 龄 20 岁, 47B FU E θ 3 统计学方法?表示, 显著差异 数据用 岁。所有参加实验者均移居高原 2 年以上, 居住 xs 应用 检验, 变量关系用直线回归。地海拔3 600, 4 700。t mm 2 研究方法结果 2. 1 骨髓细胞悬液制备由髂骨抽取骨髓液 4, 6, 肝素抗凝, 淋巴细胞分离液分层, 取患者骨髓红系祖细胞培养结果见表1 m lm l HA PC 个单个核细胞层用培养液洗 2 次, 用 培 1 患者骨髓中 —和 —集IM DM HA PC B FU E C FU E 3 落数分为 257155?37136, 314114?58121。 正 养液制成单个核细胞悬液。 2. 2 红系祖细胞培养 根据 甲基纤 常对照组 ——分别为 102145 ?, G rego ry B FU E C FU E ( ) 23117, 263183 ?145127, 两者组间比较存显著 维素法, 培养体系内含单个核细胞 2×10个ƒ () 性差异 < 0105, < 0105。 , 20% 灭 活 胎 牛 血 清, 1% 小 牛 血 清 白 蛋 白,P 1 P 2 m l 2 HA PC 患 者 骨 髓 红 系 祖 细 胞 对 Epo C FU —E 随 Epo 浓 度 的 增 加, 集 落 数 增 加, 特 1、2患者骨髓 —反应能力见图 ,别是 —增加明显, 与正常对照比较, 回 HA PC B FU E C FU E 归直先呈高升状态, 回归系数比较, 具有显著的 θ () 附表 骨髓细胞红系祖细胞培养结果 x?s(0101; 统 计 学 差 异 —= 31478, < : B FU Et P ) —= 41509, < 01001。: C FU EtP 组别 例数 B FU —E C FU —E 25 HA PC 257155?37136 324114?53121 讨论 ※※ 正常对照22 102145?28117273183?45127 ※P < 0105 1889 年, 首次发现高原居住人群, 血中红 细胞数量较平原人高, 但其发病机理仍未完全 4 清楚。 我们应用造血祖细胞体外培养技术研 ( 究 患 者 骨 髓 红 系 祖 细 胞 —,HA PC B FU E ) C FU —E 的 增 殖 能 力, 发 现 HA PC 患 者 ——集落数均较正常对照为多,, B FU E C FU E 有统计学差异。我们认为 红系祖细胞自 HA PC 身增殖、分化较高, 需进一步研究机理。 红 系 祖 细 胞 的 增 殖 分 化 需 要 促 进, Epo 增加 —的复制和 —的Epo B FU E DN A C FU E 5 成 熟, 其 作 用 是 通 过 与 —和Epo B FU E —细胞膜表面的 受 体 结 合 而 发 挥 C FU E Epo 的。我们将不同浓度 加入培养体系中观察Epo 对 患 者 骨 髓 —和 —Eop HA PC B FU E C FU E 的 作 用, 发 现 —和 —集 落 数 随, B FU E C FU E 浓度增加明显增加, 与正常对照比较有显 Epo 著的统计学差异, 说明 患者骨髓— HA PC B FU 、—对 的 反 应 与 其 浓 度 有 关。EC FU E Epo 的 —与 —对 敏感性HA PC B FU E C FU E Epo 6 的差异, 可能与细 胞 受 体 数 有 关, 需 进 Epo 一步实验证实。 患 者 红 系 祖 细 胞 增 殖 能 力 强, 对HA PC 敏感性增强, 可能系致外周血红细胞增多 Epo 的主要因素之一。 参 考 文 献 1 牟信兵, 张进军, 车惠民. 高原红细胞增多症发病机 理的研究进展. 西南部队医药 1992; 增刊?77. 我国高原病命名分型及 诊 断 标 准. 高 原 医 学 杂 志2 () 1996; 6 1?2. () 图 1、2 高原红细胞增多症 患者骨髓红系祖细 HA PC 3 唐佩弘. 杨天楹, 主编. 造血细胞培养技术. 西安: 陕 胞对 E PO 的反应 西科学技术出版社, 1985?119. 4 . ?2 493.78T abba ra IAE ry th ropo it in b io lo gy and c lin ica l ap 2 . . 2 6 ?293.W o ichow sk i DM C a slak e lan r ieb io t in t la ted reco . 1993; 153p lica t io n sA rch In te rn M ed : 5 . . m b inan t h um an e ry th ropo ie t in sB io ac t iv ity and ac2 D a i C h un H unSanfo r th BH um an bu r stfo rm ing - un it se ry th ro id need d irec t in te rac t io n w ith stem ?952.. 1989; 74t iv ity a s recep to r ligandB loo d 1991; ce ll fac to r fo r fa r th e r deve lopm en t. B loo d IN V ITRO CUL TURE O F BO NE M A RROOW RBC L INES PRO GEN ITO R CELL S IN HA PC Zho u C h u n h u a, e t a l T h e G en e ra l H osp ita l of C h en g d u M il ita ry C om m a n d O b jec t ive: T o stu dy th e g row th o f p ro gen ito r s in bo n e m a r row RBC lin e s in HA PC. M e tho d s: ()- - 25 T h e P ro gen ito r ce lls B FU E an d C FU E w e re cu ltu re an d st im u la ted w ith Epo in v it ro in 22 . : _ _ p a t ien t s w ith HA PC an d h ea lth y co n t ro lsR e su lt sCo lo n e ie s o f B FU E an d C FU E in HA PC w e re h ih ge r th an th a t in co n t ro ls an d re spo n ded w ith Epo sign if ican t ly a s com p a r iso n w ith ()< 0105 - < 0101 - . : co n t ro ls P in B FU E an d P in C FU E Co n c lu sio n sT h e cap ac ity o f g row th o f p ro gen ito r s in HA PC is h igh e r an d m o re su scep t ib le to Epo. Key word s H igh a lt itu de; P ro gen ito r; In v t ro cu ltu re; Epo; Co lo n y; Po lycy th em ia; Bo n e m a r row 急速初入高原致房室传导阻滞一例报告 () 青海格尔木解放军第 22 医院心内科 816000刘争建 李高元 张兆清 患者男性, 19 岁, 安徽天长县人, 系格尔木市某部 , T ?房室传导阻滞。予心电监 滞。 诊断为急性高原反应 护、吸氧、能量合剂等营养心肌治疗, 同时每日复查心 新入伍战士, 住院号 006879。主因来格后第二天在体检 电 图, 第 四 天 查 心 电 图 为 正 常 心 电 图, 住 院 一 周 后 出 时发现心电图异常, 于 1998 年 12 月 23 日收住入院。患 院。 者无胸闷, 心慌, 既往无心肺疾患, 在原籍体检时 EC G 正 常。 入 科 查 体: 3612?, 70 次ƒ分, 20 次ƒ分。T P R 讨 论 急速初入高原致房室传导阻滞尚未见报道, 本例13617。 神清, 面唇无紫绀, 咽部轻度充血, 扁 13ƒ B P k P a ( ) 桃体无肿大, 颈静脉无怒张, 胸廓对称, 双肺听诊呼吸 患 者既往无心脏疾患史, 此次从平原 海拔约 116 米 () 快速进入高原 海拔约 2 808, 体检时 示 ?房室 音清晰。心前区无局部隆起, 心尖搏动位于第五肋间左m EC G I (传导阻滞 —间期长短不等, 最长 840, 且逐渐延锁骨中线内侧 1, 搏动范围 115×115。心前区未触 P R m s cm cm ) 及细震颤, 心界无扩大, 心率 70 次分。 律齐, 音有力, ƒ长实属罕见, 其发生机制可能为: 快速进入高原地区 各瓣膜听诊区未闻及杂音。 腹部未见异常。 实验室检致急性心肌缺血缺氧而引起房室传导延迟。 由于及时 ( ) ( ) ( ) 查: 血 常 规 - , 尿 十 项 - , 大 便 常 规 - , 肾 功予以吸氧, 改善心肌能量供给等治疗, 避免了严重房室 + + -( ) 传导阻滞的发生, 本例提示: 初入高原应梯度适应; 急 - , 电 解 质 4142142、, ƒƒk mm o lL N amm o lL C l2+ 100、2162。胸片示心膈肺无异常。 ƒƒ速进入高原地区后应当常规行 检查, 预防心脏事 mm o lL C amm o lL EC G ( )心脏彩色超声 - 。 示 窦 性 心 律, ?房 室 传 导 阻件的发生。 EC G I