【word】 盐酸苯达莫司汀的合成

【word】 盐酸苯达莫司汀的合成 盐酸苯达莫司汀的合成 盐酸苯达莫司汀的合成 中国新药杂志2007年第16卷第23期 高丽梅,汪燕翔,宋丹青 (中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京100050) [摘要]目的:合成盐酸苯达莫司汀.方法:以2,4-二硝基氯苯为起始原料,经取代,还原,酰化,环合,还原, 取代,水解,成盐等9步反应制得目标化合物.结果:目标化合物的质谱,核磁共振氢谱,红外光谱均与文献报道相 吻合,总收率为33.5%.结论:本路线操作简单,成本较低,适合工业化生产. [关键词]盐酸苯达莫司汀;抗肿瘤;药物合成 [中图分类号]R979.1;R73[文献标识码]B[文章编号]1003—3734(2007)23—1960—03 Synthesisofbendamustine GAOLi—mei,WANGYan—xiang,SONGDan—qing (InstituteofMedicinalBiotechnology,ChinaAcademyofMedicalSciencea ndPeking UnionMedicalCollege,Beijing100050,China) [Abstract]0bjective:Tosynthesizebendamustine.Methods:Thetargetcomp oundwassynthe— sizedfrom2,4-dinitro—chlorobenzenasastartingmaterialvianinestepsincl udingsubstitution,reduction, acylation,cyclization,reduction,substitution,hydrolizationandsalification .Results:Thestructureof thetargetcompoundwasconfirmedbyMS.H—NMR.IRanalysis.Thetotalyieldofbendamustinewas savingandsimplifiedmethodcanbeusedinth 33.5%.Conclusion:Thiscost— eindustrialmanufacture. [Keywords]bendamustine;antitumor;synthesis 盐酸苯达莫司汀(bendamustinehydrochloride) 是由Merckle公司开发的烷化抗肿瘤药物,于2003 年l0月在德国上市,商品名为Ribomustin.Salme— dix公司得到授权在美国和加拿大开发,商品名为 Treanda(SDX一105),目前正处于?期临床.临床用 于乳腺癌,慢性淋巴细胞性白血病,非霍奇金淋巴瘤 (?,?期),霍奇金病,浆细胞瘤的单独治疗或联 N . O一 2 :2cH3一 合用药.临床应用明,其单独治疗或联合用药治 疗乳腺癌,疗效确切,能明显降低复发率与死亡率, 且不良反应小,安全性好. 综合文献报道,我们以2,4一二硝基氯苯为原 料,经取代,还原,酰化,环合,还原,取代,水解,成盐等 9步反应合成目标化合物.此路线原料易得,反应条件 温和,成本较低,易于规模化生产.合成路线见图1. (CH2)3COOC2Hs(CH2)aCOOC2Hs 一 2~O?ooc CH3CH3,CH 567 o.一 \cH3\c 图1苯达莫司汀的合成路线 实验部分SDX3 … 00~ x VGZAS-2F 熔点用国产YRT一3型熔点测定仪测定,温度定(400Hz),溶剂为二甲 亚砜(DMSO);荧光检测 计未经校正;红外光谱用岛津IR一455型红外仪测用上海顾村仪器 厂的三用紫外分析仪,一般薄层 一 1960一 舢 ? , . 层析(TLC)采用E—Merck公司预铺硅胶铝箔卷. 所用试剂为Acros公司和国产分析纯或化学纯的 试剂. 1N?甲基一2,4?二硝基苯氨(2) 将30%的甲胺乙醇(150mL)溶液置于反应瓶 中,于35?以下,分批加入2,4-二硝基氯苯(30g, 0.15too1),体系剧烈放热,加毕,搅拌1.5h,板检反 应完全(展开剂为乙酸乙酯.环乙烷=1:1),大量黄 色固体出现,降至室温,抽滤,得黄色固体2,称重 28g.收率96%,mp:177.5,179?(文献…:收率 89%,mp:178,180?). 22一氨基_4一硝基一?一甲基苯氨(3) 将化合物2(11.82g,0.06too1)溶于甲醇(500 mL)中,将体系缓慢加热至50?,有少量固体不溶, 为黄色悬浊液体.后将九水合硫化钠(38.4g,0.16 too1)和碳酸氢钠(13.44g,0.16too1)溶于水(150 mL)中,将此溶液缓慢滴加至反应体系中,滴加时问 约1.5h.滴加完毕后,缓慢升温使回流0.5h,板检 反应完全(展开剂为乙酸乙酯).将反应液倒入水 (1800mL)中,放置过夜,次日瓶底有大量红褐色晶 体析出,抽滤,50?下真空干燥3h,得红褐色固体 3,称重8.8g.收率:88%,mp:177,178?(文 献:收率87%,mp:176,179?). 35-(2-甲氨基-5-硝基苯基)氨基-5.氧代戊酸(4) 将化合物3(1.67g,0.O1too1)加入到三氯甲烷 (50mL)中,在保持20?的情况下完全溶解,搅拌分 批加入己二酸酐(1.45g,0.O1too1),滴毕,加热回流 0.5h后即有黄色固体析出,反应2h,板检反应完全 (展开剂为乙醇).冷却,抽滤,得黄色结晶4,称重 2.7g.收率:96%,mp:170.5,171.5qC(文献: 收率78%,mp:170.5,171.5?). 4[1一甲基一2-(4’一丁酸乙酯基)-5-硝基]-1H.苯并 咪唑(5) 将化合物4(2.81g,0.O1too1)溶于乙醇(15mL) 中,将浓硫酸(0.8mL)滴加入混合液中,完全溶解,搅 拌下加热回流3h,缓慢冷却到35,40?(不可过冷, 否则固体提前析出,对以后的操作造成不便),将上述 反应液倒入KCO水溶液中(1.7gKCO/20mL H0),得到2.9g黄色结晶5.收率:99%,mp:109, 110?(文献:收率68%,mp:109,110?). 5[1一甲基I2-(4’一丁酸乙酯基)-5一氨基]一1H一苯并 咪唑f6) 化合物5(2.91g,0.O1too1)溶于甲醇(100mL) 中,加入催化剂兰尼镍0.03g,常温,约3.03X10 国堑麴苤查007年第16卷第23期 Pa下进行催化氢化6h,滤掉催化剂进行减压浓缩, 得白色固体,加入乙酸乙酯回流5rain,过滤,弃去 滤渣.将乙酸乙酯溶液浓缩至少量白色固体析 出,冰箱中放置过夜.次日,抽滤,得到无色结晶 6,称重1.87g.收率:72%,mp:131—132?(文 献:收率97.3%,mp:130.5—132?).MS.ESI (m/z):262.4[M+H]. 6[1一甲基?2一(4’一丁酸乙酯基)I5.?,?.二(2’一羟基 乙基)]一1H一苯并咪唑(7) 化合物6(2.61g,0.O1too1),溶于15mL水中, 加入少量的醋酸钠中和,再加5mL乙酸进行酸化, 将体系降温至5?,保持此温度,滴加环氧乙烷(2.5 mL,0.05too1)滴毕,5?放置5h,20?放置过夜. 用4.55%的KCO水溶液进行中和,用氯仿提取, 饱和氯化钠溶液洗1遍,无水硫酸钠干燥.浓缩得 浅棕色胶状物7,称重3.3g. 7[一水合甲基:2一(4’一丁酸基).5一?,?.二(2’一氯乙 基)]一1H一苯并咪唑盐酸盐(1) 将上述油状物溶于氯仿(30mL)中,0—5?滴 加二氯亚砜(10mL),保持0,5?搅拌1h.室温反 应1h,浓缩.加入30mL浓盐酸,90,95?加热 3h.过滤,滤液浓缩,得油状物,将此油状物倒入10 mL水中,得到浅棕色结晶2.6g.粗品用水(10mL) 重结晶,析出无色结晶1,称重2.4g.收率:58%, mp:150,151?(文献:收率85%,mp:148, 151?).MS—ESI(m/z):358.3M+H].HNMR 和IR与文献报道吻合. 讨论 从起始原料到合成最终产物共需9步反应,总 收率33.5%.我们对以下几方面进行了深入的研 究:?在化合物2至化合物3的还原过程中,反应 结束后加水量很大,我们对水的体积进行了研究,发 现减少水的用量会影响产率,但再加大对产率贡献 也不大.?在化合物5至化合物6的还原过程中, 我们发现用铁粉和盐酸还原不如兰尼镍完全,且产 率较低.?在化合物6至7的过程中,用碳酸钾中 和很重要,必须确保pH=7,7..3,低于7收率很低, 高于7.3则影响纯度,从而导致最终产物无法纯化. ?在制备化合物8的时候,我们通过增加氯化亚砜 的量(是文献[2]的3.5倍)来缩短反应时问(从文 献[2]的24h变为1h),从而有效地防止不良反应 的发生,有利于目标产物的纯化. (下转第1970页) 一 1961— 取,得到的供试品溶液,分别精密量取20L注入高 效液相色谱仪.另取CuB对照品溶液,同法测定. 记录色谱峰面积,计算得到3批样品的含量分别为: 批号20061024为100.2%,批号20061101为99.6%, 批号20061110为100.7%,RSD=0.5%. 讨论 本实验采用了文献报道的CuB的最大吸收波 长作为检测波长,但文献报道的色谱条件多为甲醇. 水流动相系统,所得色谱峰有拖尾,理论塔板数 较低.因此本实验采用了乙腈.水系统,并加入磷 酸,改善峰形的同时缩短保留时间,提高了理论塔板 数.在其他色谱条件相同的情况下,作者考察的甲 醇一水(62:38)的流动相,理论塔板数仅为2875,而 本实验所采用的流动相理论塔板数提高到8212,有 利于CuB的分离检测. 由于蛋白纳米粒是一种比较特殊的制剂,所以 本方法的关键之处在于选择一种合适的方法将蛋白 与药物分离开来,避免其对测定产生干扰.考虑到 CuB是一种脂溶性极强的物质,本实验选定有机溶 剂沉淀蛋白的方法来处理样品,有机溶剂可破坏蛋 白的水化层,使之发生沉淀反应.一方面,制剂中的 蛋白被沉淀分离,另一方面脂溶性极强的药物充分 溶解于有机溶剂中而被提取出来. 在本法建立的过程中,作者考察过甲醇,乙腈以 及无水乙醇3种蛋白沉淀剂.其中甲醇产生的蛋白 沉淀量较少,且不易过滤除去,有可能沉淀不完全; 无水乙醇沉淀迅速,但生成较大的团块,不利于药物 溶出;乙腈能够形成均匀疏松的沉淀,既能保证药物 的充分提取又容易过滤除去沉淀.因此本实验选择 中国新药杂志2007年第16卷第23期 了乙腈作为蛋白沉淀剂. 本法较酶解蛋白然后测定的方法更为简便省 时].蛋白纳米粒样品经有机溶剂沉淀提取后可 直接进样测定,适合强脂溶性药物蛋白纳米粒制剂 的分离检测. [作者简介]王宁(1982一),女,硕士研究生.联系电话: (024)23986316,E—mail:wangning9728@163.COB. [通讯作者]邓意辉(1964一),男,教授,博士生导师,主要 从事药物靶向新剂型的研究.联系电话:(024)23986316, E—mail:dds一666一happy@163.COB. [参考文献] [1]方新德葫芦素类成分的化学与生物活性的研究进展[J].国 外医学药学分册.1985,12(3):132—135. [2]JAYAPRAKASAMB,SEERAMNP,NAIRMG.Anticancerand antiinflammatoryactivitiesofcucurbitacinsfromCucurbitaandre? ana[J]CancerLett,2003,189(1):11—16. [3]WARTLICKH,SPANKUCH.SCHMITTB,STREBHARDTK,et a1.Tumourcelldeliveryofantisenseoligonucleotidesbyhuman serumalbuminnanoparticles[J].JControlRelease,2004,96 (3):483—495. [4]MICHAJP,GOLDSTEINGH,BIRKCL,eta1.Abraxaneinthe treatmentofovariancancer:theabsenceofhypersensitivityreac? tions[J].GynecolOncol,2006,100(2):437—438. [5]黄璐琦,姚三桃.高效液相色谱法测定异叶马交儿根中葫芦素 B的含量[J].中草药.1994,25(10),555. [6]李超英,候世祥,杨凯,等.血浆中葫芦素B的高效液相色谱测 定方法研究[J].中国药学杂志,2001,36(8):557—559. [7]王恺,马光辉.白蛋白药物载体的制备及表征[J].过程工程 ,2004,4(2):156—159. 编辑:周卓/接受日期:2007—07—10 (上接第1961页) [作者简介]高丽梅(1974一),女,硕士,主要从事药物化 学工作.联系电话:(010)63033012,E.mail:gaolimei1205@ hotmail.COB. [通讯作者]宋丹青(1964一),女,博士,硕士生导师,主要 从事药物化学工作.联系电话:(010)63165268,E.mail: songdanqingsdq@sina.COB. [参考文献] [1]WILLITZERH,BRAUNIGERH,ENGELMANND.Syntheseund antiviralewirksamkeitvonsl1bstituierten5.ureid0und5.n1i0ureid0一 benzimidazolderivaten[J].Pharmazie,1978,33(1):30—38. [2]VONWERNERO,KREBSD.?一[Bis一(B.ehlorathy1).amino—benz— imidazolyl一(2)]?propion—bzw.?buttersiiurenalspotentielleCyto? satatika[J].JFurPraktischeChemic,1963,20(4):178—186. [3]TEICHERTJ,SOHRR,BAUMANNF.Synthesisandcharacter— izationofsomenewphaseIImetabolitesofthealkylatorbenda- mustineandtheiridentificationinhumanbile,urine,andplasma frompatientswithch0la”gi0carcin0ma[J].DrugMetabDispDs, 992. 2005,33(7):984— 编辑:王宇梅/接受日期:2007—06—29