HPLC法同时测定金黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量

HPLC法同时测定金黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 HPLC法同时测定金黄连口服液中绿原酸 和黄芩苷的含量 ? 46?TraditionalChineseMedicalUniversity2011.Vo1.14No.3 3讨论 以上实验结果表明,赦桐根中可能含有蛋白质,糖,鞣质, 有机酸,皂苷,黄酮类,酚类,香豆素与内酯,植物甾醇,三萜类 和挥发油等化学成分.本文首次对桢桐根进行了化学成分预试 验,初步确定了其可能含有的化学成分,为进一步进行该植物 生物活性成分的确定,提取,分离,纯化研究提供了研究基础. 参考文献 [1]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M3.第 六卷.上海:上海科学技术出版社,1999:571—572. [2]黄燮才.臭牡丹原植物的种类及资源分布[J].广西植物, 1981,1(1):34—37. (编辑陈明伟) HPLC法同时测定金黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 莫迎.徐东来 (广西壮族自治区南宁食品药品检验所,广西南宁530001) 摘要:[目的]建立HPLC法同时测定金黄连口服液中绿原酸和黄芩苷 的含量测定.[方法]色谱柱为Ag~entTC—c.. (4.6mmx250mm,5Ixm),流动相为乙腈一0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱, 流速为1.0ml/min,检测波长为318am,柱温为35?.[结 果]绿原酸和黄芩苷的线性范围分别为0.1602,1.60l6Ixg(r=0.999)和 0.1002,1.0020Ixg(r=-I.000).绿原酸平均回收率为98.01%, RSD为1.21%;黄芩苷平均回收率为99.54%,RSD为1.16%.[结 论]HPLC法简便,快捷,重复性好,可作为该制剂质量控制的方法. 关键词:金黄连口服液;黄芩苷;绿原酸;HPLC 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编 号:1008—7486(2011)03—0046—03 DeterminationofChlorogenicAcidandBaicalininJinhuanglianOralLiquid byHPLC M0Ying.XUDong—lai (GuangxiNanningInstituteforFoodandD,Control,Nanning530001) Abstract:【Objective】 Toestablishamethodfordeterminationthecontentsofchlorogenicacidandbaic alininJinghuanglianOral LiquidbyHPLC.[Methods]TheAgilentTC—C18column(4.6mlnx250mm,5~m)wasusedandthemobilephaseconsistedofacetoni— trile一 0.1%phosphoricacid.Theflowratewas1.0ml’min-1andthedetectionwavelengthwas318nm,columntemperature35?.【Re— suits】 Thehnearrangeofchlomgenicacidandbaicalinwere0.1602~1.6016g(r=O.999)and0.1002~1.0020p,g(r=-I)respectively.The averagerecoveryrateforchlorogenicacidandbaicalinwere98.01%and99.54%,witIlRSD1.21%and1.16%accordingly.[Conclusion] Themethodissimple,quickandrepeatable,whichcouldbeusedforitsquah~contro1. Keyword:JinhuanglianOral;HPLC;Baicalin;Chlorogenicacid 金黄连口服液为医院制剂,由金银花,黄芩,连翘等药材 组成,具有辛凉解表,清热解毒的功效,临床用于病毒,细菌感 染的上呼吸道感染等症.原质量只有性状,检查和连翘的 薄层色谱鉴别项目,为了有效地控制该制剂的内在质量,保证 临床用药的安全性和有效性,本文采用高效液相色谱法同时 测定制剂中黄芩的活性成分黄芩苷和金银花的活性成分绿原 酸的含量.现将结果报道如下. 1仪器及试药 日本岛津LC一2010AHT高效液相色谱仪,LCsolution色谱 工作站;Sa~oriusBP211D型电子天平;黄芩苷对照品(中国药 品生物制品检定所提供,批号:110715—200514,含量测定用); 绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:110753— 200413,含量测定用);乙腈(色谱纯);磷酸(色谱纯);水(超纯 收稿日期:2011-05—13 水);其余试剂均为纯. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:AgilentTC--C18(4.6mmx250mm,5m); 流动相:以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按 表1进行梯度洗脱;检测波长:318nm;流速:1.0ml/min;柱温: 35cc;进样量:10.理论塔板数按绿原酸峰,黄芩苷峰计算 均应不低于5000.绿原酸,黄芩苷的分离度均大于1.5. 表1梯度洗脱表 2011年第14卷第3广西中医学院学?47? 2.2溶液的制备 2.2.1对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品l0.01mg, 置25ml量瓶中,JJnso%甲醇溶解并稀释至刻度,作为绿原酸 对照品储备液,精密量取该储备液1ml置1Om1量瓶中,JJnso% 甲醇稀释至刻度,作为绿原酸对照品溶液;精密称取黄芩苷对 照品10.02mg,置100ml量瓶中,~n5o%甲醇溶解并稀释至刻 度,作为黄芩苷对照品储备液;精密量取该储备液5nd置10ml 量瓶中,~n5o%甲醇稀释至刻度,作为黄芩苷对照品溶液. 2.2.2供试品溶液的制备精密量取金黄连口服液1ml,置 25Illl量瓶中,~n5o%甲醇适量,超声处理20min,放置至室温, ~1150%甲醇至刻度,摇匀,即得供试品溶液. 2.2.3阴性溶液的制备取不含黄芩和金银花的阴性样品, 再按供试品溶液的制备方法依法操作,制成阴性样品溶液. 2.3干扰试验精密吸取上述两种对照品溶液,供试品及阴 性样品溶液各l0l,分别注入高效液相色谱仪,测定.结果色 谱图中在绿原酸,黄芩苷峰相应的保留时间附近无干扰峰 (图1). A绿原酸对照品B黄芩苷对照品c阴性样品D样品 图l船LC色谱图 2.4线JJ生关系考察分别精密量取绿原酸对照品贮备液,黄 芩苷对照贮备液加50%甲醇,制成不同浓度的对照品溶液,按 2.1色谱条件进样10l,测定,以峰面积积分值为纵坐标,进样 量()为横坐标绘制标准曲线,绿原酸回归方程为l,=224 035X+63629,r=0.999;黄芩苷回归方程为Y=I914347X+5 304,r=-I.000.结果表明:绿原酸在0.1602,1.6016g范围内线 性关系良好;黄芩苷在0.1002,1.0020Ixg范围内呈良好的线性 关系. 2.5精密度试验取同一供试品溶液,按上述色谱条件连续 测定6次,测得绿原酸峰与黄芩苷峰面积的RSD分别为0.85% (6)和0.94%(n=6),结果表明仪器的精密度良好. 2.6重复性试验取同一批号样品,制备6份供试品溶液,按 2.1色谱条件测定,结果绿原酸平均含量为1.20mgml,RSD为 O.83%(n=6);黄芩苷平均含量为0.77mg]ml,RSD为1.37%(n= 6). 2.7稳定性试验取同一供试品溶液分别于0,4,8,12,24h 依法测定,结果绿原酸与黄芩苷峰面积的RSD为0.51%(n=5) 和1.06%(n=5),表明供试品溶液在24h内稳定. 2.8加样回收率试验精密量取已知含量的同一批样品0.5 rrd共9份,分别置25rrd量瓶中,精密加入绿原酸对照品和黄芩 苷对照品适量,按2.2项下方法制备供试品溶液,按上述色谱 条件分析,测定样品中的含量,计算回收率,结果见表2和表3. 表2绿原酸加样回收率试验结果(n=9) 2.9样品测定取金黄连口服液3批样品(20090101, 20090201,20090301),按2.2项下方法制备供试品溶液,按上 述色谱条件分析,测定样品中的含量,结果见表4. ? 48?JoumalofGuangxiTraditionalChineseMedicalUniversity2011.Vo1.14 No.3 表4样品含量测定结果(n=4) 3讨论 3.1取供试品一份,于210,400nm范围内测定色谱图,根据 扫描结果显示,在318nm处绿原酸和黄芩苷均有较大吸收,因 此选择318砌作为测定波长. 3.2本试验采用梯度洗脱法,在同一色谱条件下,同时测定 金黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量,较采用不同的色谱 条件分别测定绿原酸和黄芩苷[1-3],既减少了有害试剂的用 量,又大大减少了分析时间,提高了工作效率,达到绿色环保, 经济适用的要求. 参考文献 [1]中华人民共和国药典编委会.中华人民共和国药典[s].一 部.北京:化学工业出版社,2005:132—136. [2]边向阳,江希连.高效液相色谱法测定麻杏口服液中绿原 酸和黄芩苷的含量[J].海峡药学,2010,22(5):75—76. [3]张成志.高效液相色谱法测定复方芩兰口服液中绿原酸和 黄芩苷的含量[J].时珍国医国药,2008,19(4):939—941. (编辑陈明伟) HPLC法测定鼻窦炎合剂中盐酸麻黄碱的含量 杨辉 (广西壮族自治区南宁食品药品检验所,广西南宁530001) 摘要:[目的]建..~.I-IPLC法测定鼻窦炎合剂中盐酸麻黄碱的含量.[方法]用HypersilODSz色谱柱(25oininx4.6inIn,5m), 以甲醇一0.O1mol/L~酸二氢钾缓冲液(用磷酸调至pH2.5)(15:85)为流动相,柱温为30?,流速为1.0ml/min,检测波长210nm. [结果]盐酸麻黄碱进样量在2,10g内线性关系良~ff-(r----O.9995,n=5),平均加样回收率为97.9%,RSD=1.46%(n=6).[结论] HPLC法操作简便,结果准确,可用于鼻窦炎合剂的质量控制. 关键词:鼻窦炎合剂;盐酸麻黄碱;HPLC法 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编 号:1008—7486(2011)03—0048—03 鼻窦炎合剂由麻黄,龙胆草,川芎,黄芩等十五味中药组 成,具有清热除湿,宣肺利气,益气活血之功效,用于急慢性鼻 窦炎【”.原质量标准只是对制剂的性状,检查项下的相对密 度,其它项进行检验,没有对制剂主药麻黄中的麻黄碱进行含 量测定.为了更好地控制药品质量,保证公众用药的安全有 效,笔者参考相关文献[2-3],采用HPLC法对鼻窦炎合剂中盐酸 麻黄碱的含量进行测定,经方法学考察结果令人满意. 1仪器与试药 1.1仪器LC一2010AHT型高效液相色谱仪(日本岛津公 司),LC—Solution色谱数据工作站(日本岛津公司);AE240电 子天平[梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司]. 1.2药品药材购自南宁市医药连锁药店,并经本所中药室 鉴定为现行药品标准收载品种;鼻窦炎合剂(广西中医学院第 一 附属医院制剂,桂药制字Z01060045);盐酸麻黄碱对照品 (110714—9903,中国药品生物制品检定所,供含量测定用). 1-3试剂甲醇为色谱纯;乙醚,磷酸,磷酸二氢钾,氯化钠 收稿日期:2011-05—25 作者简介:杨辉,男,副主任药师,研究方向:药品检验,药物分析 等试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1对照品溶液制备精密称取在105干燥至恒重的盐酸 麻黄碱对照品20.0mg,置25IIll量瓶中,用0.01mol/L磷酸二氢钾 缓冲液(用磷酸il~iSpH2.5)(下称缓冲液)溶解并稀释至刻度. 2.2供试品溶液的制备精密量取鼻窦炎合剂20IId,置50IIll 烧杯中,加水lOIIll,摇匀,加1.0mol/L的氢氧化钠溶液调pH值 为12,再加氯化钠3.0g,超声处理10min(功.25ow,频率33kHz), 加乙醚萃取5次(20,20,10,10,10m1),合并乙醚液,置已盛有 缓冲液约10Illl的蒸发皿中,挥干乙醚,再加缓冲液适量,置5OqC 水浴锅上溶解,移至25rnl量瓶中,冷却,再用缓冲液稀释至刻 度,摇匀,备用. 2.3阴性对照溶液的制备按桂药制字Z01060045批件所附 质量标准规定的处方比例及制备要求配制不含麻黄药材 的阴性对照样品,照2.2项下供试品溶液的制备方法制成阴性 对照溶液.