【doc】益康胶囊的鉴别方法研究

【doc】益康胶囊的鉴别方法研究 益康胶囊的鉴别方法研究 中国药事2004年第l8卷第5期 益康胶囊的鉴别方法研究 赵志军,李敬荣,赵志强(河北省药品检验所,石家庄市050011;?石家 庄四药股份有限公司) 中图分类号:R286;R284.1文献标识码:A文章编 号:1002—7777(2OO4)05—0296—02 益康胶囊为卫生部药品标准收载的品种,由人 参,黄芪,何首乌,丹参,甲基橙皮苷等十三味药 组成.原标准项下有六项鉴别,但均为试管鉴别反 应,欠缺专属性.本实验对方中主要组成药物人 参,黄芪,何首乌,丹参及甲基橙皮苷成分分析的 基础上,建立了薄层鉴别方法,提出了薄层鉴别指 标,为控制益康胶囊的内在质量提供依据. I材料与试药 人参皂苷,黄芪甲苷,何首乌对照药材, 大黄素对照品,丹参酮?对照品(中国药品生物 制品检定所).甲基橙皮苷(唐山市龙山药业有限 公司).所用试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1人参,黄芪的薄层鉴别 供试品溶液的制备:取益康胶囊内容物7g, 加甲醇25ml加热回流1小时,放冷,滤过,滤液 蒸干,残渣加水15ml使溶解转移至分液漏斗中, 用水饱和正丁醇萃取3次,每次2Oml,合并提取 液,用1%氢氧化钠溶液洗涤2次,每次30ml,弃 去氢氧化钠溶液层,再用正丁醇饱和的水洗涤2 次,每次30ml,弃去水层,分取正丁醇层,蒸干, 残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液. 对照品溶液的制备:取人参皂苷,黄芪甲 苷对照品,分别加甲醇制成每lml各含0.5mg的溶 液,作为对照品溶液. 阴性对照液的制备:按益康胶囊处方分别除去 被测药材人参,黄芪,剩余药材按制备工艺制得, 并按供试液制备方法分别制成人参,黄芪的阴性对 照液. 薄层层析:吸取上述供试品溶液和阴性对照液 各5,10,ul,对照品溶液5/~tl,分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以正丁 醇一乙酸丁酯一水(8:1:5)的上层溶液为展开剂, 在展开槽的另一侧放入5ml的氨水饱和,展开约 12cm,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在 105~C烘约l0分钟至斑点显色清晰.供试品色谱 中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的 斑点,见图1. 图1人参,黄芪的TLC图谱 1.人参皂苷l’,gl对照品;2.黄芪甲苷对照品;3.供试品 4.人参阴性对照;5.黄芪阴性对照 2.2何首乌,丹参的薄层鉴别 供试品溶液的制备:取益康胶囊内容物4g,加 甲醇25ml超声提取20分钟,滤过,滤液蒸干,残 渣加水20mI使溶解,用稀盐酸调节pH值至1—2, 用醋酸乙酯提取二次,每次20ml,合并提取液, 蒸干,残渣加甲醇lml使溶解,作为供试品溶液. 对照药材溶液的制备:取何首乌对照药材3g, 加醋酸乙酯20ml超声提取3O分钟,滤过,滤液蒸 于,残渣加甲醇lml使溶解,作为对照药材溶液. 对照品溶液的制备:取大黄素,丹参酮?对 照品,分别加甲醇制成每lml各含lmg的溶液,作 为对照品溶液. 阴性对照液的制备:按益康胶囊处方分别除去 被测药材何首乌,丹参,剩余药材按制备工艺制 得,并按供试液制备方法分别制成何首乌,丹参的 阴性对照液. 薄层层析:吸取上述对照品溶液,对照药材溶 液和阴性对照液各5,供试品溶液1O,分别点 于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层 板上,以石油醚(30,60c(=)一甲酸乙酯一甲酸溶液的制备:取甲基橙 皮苷对照品,加 甲醇制成饱和溶液,作为对照品溶液. 薄层层析:吸取上述对照品溶液5ul,取阴性 对照液和2.2何首乌,丹参的薄层鉴别项下供试品 溶液各1O,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘 合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯一甲醇一水 (100:19:13)为展开剂,在1O?以下展开,取出, 晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,在105~C烘干, 置紫外光灯(365nm)下检视.供试品色谱中,在 与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑 点,见图3. 图3甲基橙皮苷的TLC图谱 1.甲基橙皮苷对照品;2.供试品;3.阴性对照 3讨论 本文所述2.1法能将人参,黄芪同时在同一块 薄层板上检出,所述2.2法能将何首乌,丹参在同 一 块薄层板上同时进行薄层鉴别,方法简便,快速. 本文所述几个鉴别斑点清晰,分离效果好,专 属性强,而且均进行阴性对照实验,阴性对照液中 无干扰. 参考文献: [1]卫生部药品标准Is].ws3一B一26O5—97 RP—HPLC法测定海马强肾丸中毛蕊花糖苷的含量 旭红,乌云,林燕(内蒙古药品检验所,呼和浩特市010020) 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1002—7777(2004)05—0297—02 中成药海马强肾丸主要由肉苁蓉,人参,山茱 萸,鹿茸,补骨脂,海马等三十味药材制成.本文 采用反相高效液相色谱法测定了该药中肉苁蓉主成 分毛蕊花糖苷的含量,经方法学考察和对3批样品 的测定结果表明,本法操作简单,方法专属性强, 重现性好,结果准确可靠. 参照《中国药典》2000年版一部肉苁蓉项下 的含量测定方法,对海马强身丸中肉苁蓉的主要成 分毛蕊花糖苷建立了含量测定方法,作为本制剂生 产及检验的质量控制指标. 1仪器与试药 LC一6AHPLC泵(岛津),AlhechUVIS一200 型检测器,CHROM1TEK色谱工作站. 乙腈,甲醇均为色谱纯,水为高纯水.其它试 剂均为分析纯. 毛蕊花糖苷对照品(批号:1530—200101,中 国药品生物制品检定所). 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:PhenomenIrregularCI8(200mmX 4.6mm,10tun);流动相:乙腈一甲醇一1%醋酸 (10:15:75);流速:1.0ml?min,;柱温:室温;检 测波长:250nm.理论板数按毛蕊花糖苷峰计算, 应不低于2000. 2.2供试品溶液及对照品溶液的制备 2.2.1供试品溶液及阴性对照液的制备 取本品约9g,剪碎,精密称定,置100ml棕色 量瓶中,精密加入流动相50ml,密塞,称定重量