【2017年整理】庆大霉素生产工艺

【2017年整理】庆大霉素生产工艺 硫酸庆大霉素生产工艺流程 班级08药剂 姓名汪骏 学号08314028 培养48小时左右，培养24小时左右， pH自然无菌接入，36-3pH6.8-7.47?发酵用小一级种子二级种子三级种子单胞菌罐罐罐 培养24小时左右， pH6.7-7.4培养4天，洗涤洗脱酸化中和四级种子分离漂洗脱色交换罐34-35? 洗脱收率?98% 浓缩收率?88%调pH至5.0-5.8浓缩成盐脱色压滤 炭脱收率?95% 进塔温度:116-135? 喷速:20-80L/h产品喷雾干燥喷雾收率?90% 硫酸庆大霉素工业发酵的总流程图 孢子悬浮液的制备流程及工艺要求 设备: 蒸汽灭菌柜 双人净化工作台 操作步骤 1.分装纯化水至三角瓶，每瓶装150mL左右。 2.组装接种瓶及接种皮管，组装严密，包扎结实。 3.以上器材及接种用具灭菌，125?1?C，60min。 4.在缓冲间穿好无菌衣，戴上无菌口罩，进入洁净室，符合人流)物流进出程序。 5.用酒精棉球擦拭超净台面)双手，先擦台面，后 擦手。 6.开启超净台通风，观察风速是否正常，将接种瓶、皮管、无菌水、接种铲及斜面摆在洁净台上。 7.将灭菌纯化水倒入茄子瓶中，一瓶纯化水倒两只 茄子瓶。 8.用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液，用力适 度，勿刮出培养基碎屑。 9.打开接种瓶瓶口，将孢子悬浮液全部倒入接种瓶 中，注意不要倒在瓶口处，然后重新组装好接种瓶及接种皮管。 10. 制备完毕关闭洁净台，出洁净室，符合人流、 物流进出程序。 物料指标 物料编物投产数号 料名称 量 纯06010150-2013 0ml 化水 子4支 --- 斜面孢子 一级种子发酵培养 实际培养参数控制 培养参数控制 培罐罐空空搅养时间 温 压 气压力 气流量 拌时间 43003-8小时7度 .06MPa .1MPa 0m*3/h - 左右 镜检 镜检步骤 1.取样 打开蒸汽阀先灭菌，然后关蒸汽阀，打开取样阀取样。取样完毕后关阀，再次打开蒸汽阀灭菌，关闭。 2 用载玻片沾取一薄层发酵液，加热以使发酵液固定在载玻片上，然后滴加美兰溶液进行染色，在显微镜下观察目 的菌的菌丝形态。 3.配制酚红肉汤培养基，在培养基中加入发酵液在恒温箱中进行培养。一定条件下观察培养基颜色的变化来判断是 否染菌。 4.另取样用粘度计测粘度。 一级种子镜检 1.正常标准 菌丝形态:实团，网团，边散，伸展，原生质充足。 无菌度: 正常，即无杂菌污染。 3.实例 批号21011097 一级种子镜检生长指标 生菌菌杂长时间 丝形态 丝数量 菌情况 小量正2 2h 网、分支短 少 常 网量正3 0h 团、实团 一般 常 网量正3 8h 团、较伸展 较多 常 实量正4 6h 团、边散 多 常 实量正5 1h 团、伸展 多 常 二级种子的培养 进料状况 4 二级种子培养进料状况 物物投生批 料编号 料名称 料量 产单位 号 淀卫010 101009 50Kg 609014 粉 辉玉兰公 司 玉自040101006 0 Kg 907001 米粉 制 豆自010101007 00 Kg 907009 饼粉 制 蛋滑020101003 5 Kg 906013 白胨 云东升公 司 硫中040101002 Kg 906004 酸铵 石化岳阳 公司 硝交000101004 .4 Kg 903002 酸钾 城晋盛公 司 轻焦020101001 5 Kg 905003 质碳酸钙 作兰冠耀 公司 氯上030103272 0 g 90309 化钴 海先金公 司 泡开000101016 .6L 905013 敌 封树脂厂 饮03 601007 .2t 用水 二级种子镜检 1.正常标准 菌丝形态:网团，边散，伸展，连片、原生质充足。 无菌度: 正常，即无杂菌污染。 2.实例 批号 21011097 表5 二级种子镜检生产指标 生菌菌杂长时间 丝形态 丝数量 菌情况 散量正4 h 网、连片 多 常 大量正8 h 网片、伸展 多 常 大量正1 2h 网片、伸展 多 常 大量正1 6h 网片、伸展 多 常 实际培养参数控制 表6 二级培养参数控制指标 培罐罐空空搅 养时间 温 压 气压力 气流量 拌时间 23001- 4小时7度 .03MPa .7MPa 70m*3/h - 左右 三级种子发酵 进料状况 表7 三级种子培养进料状况 物物投生批料编号 料名称 料量 产单位 号 淀卫050101009 50Kg 609004 粉 辉玉兰公 司 玉自010101006 20Kg 907001 米粉 制 豆自030101007 60Kg 907009 饼粉 制 蛋滑060101003 0Kg 906013 白胨 云东升公 司 硫中010101002 0Kg 906004 酸铵 石化岳阳 公司 硝交010101004 Kg 903002 酸钾 城晋盛公 司 轻焦070101001 5Kg 905003 质碳酸钙 作兰冠耀 公司 氯上010103272 20 g 90309 化钴 海先金公 司 淀北010102034 50g 904003 粉酶 京东升公 司 泡开030101016 L 905013 敌 封树脂厂 三级种子镜检 1. 正常标准 菌丝形态:散网、伸展，连片、量多。 无菌度: 正常，即无杂菌污染。 2.实例 批号 301/327 表9 三级种子镜检生产指标 生菌菌杂 长时间 丝形态 丝数量 菌情况 散量正3 h 网、连片、伸多 常 展 大量正7 h 片散网、伸展 多 常 大量正1 1h 片散网、伸展 多 常 大量正1 5h 片散网、伸展 多 常 提炼车间生产概况和流程 提炼组的任务是将庆大霉素从来自发酵车间的发酵液中提炼出来，同时也负责本车间低单位稀氨洗脱液和成盐炭脱车间活性炭滤饼中庆大霉素的提取，并最终得到含庆大霉素的 洗脱液，送入浓缩岗位浓缩。 庆大霉素与其他物质的分离采用阳离子交换树脂，这是基于庆大霉素的弱碱性实现的。用浓氨解析，阴离子交换脱 色。 发酵液 回收 套用下一批酸化罐氨回收罐 树脂分离器分离树脂复合物 漂洗罐回收,套用下一批除杂质 稀氨洗涤生物效价低于200u/ml低单位收集罐 阳离子交换柱 浓氨洗脱 低于600u/ml阳串阴 回收脱色提炼车间流程图 测定生物效价洗脱液贮灌高于600u/ml酸化、中和 加树脂吸附分离漂洗 发酵液阳离子交换柱酸化罐树脂分离器漂洗柱饱和树脂通空气 赶气泡 回收、氨捞(再吸附)含部分庆大霉素的洗脱液饮用水 疏松0.08-0.12M稀氨洗浓氨 稀酸洗4.5%-5.3%1:20VVM-1:40VVM 洗脱纯化水冲洗0.05M盐酸、0.02M氯化铵pH8.5-9解析除蛋白质等杂质除氯离子除钙离子、镁离子 调节pH值至碱性 旋光效价解析完毕后水洗使树脂再生需要时收集压回酸化罐旁的树脂计量槽再生树脂 9500-12000L 200-1000u/mL 旋光效价>1000u/mL 加入浓氨水作阳离子交换柱洗脱液低单位洗脱液贮罐3000-4000L 酸洗、碱中和阴离子交换树脂再生 经阳串阴管道进入阴离子交换柱 高单位洗脱液脱色洗脱液贮罐送入浓缩车间流速1:100-150VVM 提炼车间流程简介 酸化、中和 操作方法 1.备好酸化用盐酸、中和用10mol/LNaOH，压 备用树脂入计量槽; 2.接发酵液20吨左右入酸化罐，缓缓加入盐酸(约1.5吨)，调pH1.4-3.0，加入泡敌消沫，计量体积。该过程目 的在于裂解菌丝体，释放其中的庆大霉素，以提高收率。 3. 加适量饮用水稀释(20%左右)，用 10mol/LNaOH中和pH6.4-6.8; 4.按6.5万u/mL(50吨、45吨罐)或6万u/mL(30吨、65吨罐)计量加入732阳离子交换树脂。30min后复测pH，控制在6.4-6.8。交换吸附5-8h。取样送化验组测 生物效价。 庆大霉素的洗涤 操作方法 1. 配制0.5 mol/L HCl与0.2 mol/LNH4Cl混 合液，0.08-0.12mol/L的稀氨。 2. 每柱装饱和树脂1100-1500L，用饮用水及空气疏松树脂并用饮用水赶走气泡。3. 通入稀酸洗涤液至无钙、镁离子，完成后用饮用水冲洗至无Cl-，再用0.08,0.12mol/L 稀氨水洗至pH 8.5,9.0。 庆大霉素的洗脱和脱色 操作方法: 1. 配制4.5-5.3%的浓氨。 2. 用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。 3. 用4.5%-5.3%浓氨水解吸至洗脱液旋光效价 控制在1000 u/mL。 4. 第2罐透光度低于70%时，用2mol/L HCl 和2mol/L NaOH对711脱色树脂进行再生，使其可以循环使用。注意洗脱收率在98,以上。 5(树脂吸率的:树脂吸率(%),树脂 投量/总回收树脂 洗脱收率=洗脱总亿,发酵总亿 庆大霉素的洗脱和脱色 操作方法: 1. 配制4.5-5.3%的浓氨。 2. 用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。 3. 用4.5%-5.3%浓氨水解吸至洗脱液旋光效价 控制在1000 u/mL。 4. 第2罐透光度低于70%时，用2mol/L HCl 和2mol/L NaOH对711脱色树脂进行再生，使其可以循环使 用。注意洗脱收率在98,以上。 5(树脂吸率的计算公式:树脂吸率(%),树脂 投量/总回收树脂 洗脱收率=洗脱总亿,发酵总亿 庆大霉素的成盐碳脱 成盐 配置人员穿好防护用品，先抽入总体积2/3的纯化水，在夹层冷却下再缓慢抽入1/3的浓硫酸，搅拌均匀，冷却应在0.5小时以上。上批装塔的浓缩液与本批浓缩液混合后压入成盐炭脱罐。在不断搅拌及夹层通冷却水冷却下缓慢加入6mol/L的硫酸液，调pH至5.0-5.8，当pH在5.0左右时取 样检测。 炭脱 成盐液温度降到45?以下时，加入767型针用活性炭进行炭脱，加炭量为成盐液体积的5,左右，在搅拌及夹层通蒸汽加热下，升温至65?5?，保温45min后，压缩。第一遍炭脱液由储罐压入成盐炭脱罐调pH在5.3左右，同法进行第二遍炭脱。滤饼用预热的纯化水清洗至尾样在500 u/mL以下，浓缩至比重1.10-1.13，套用于下一批。炭脱脱率在95,以上。 浓 浓缩液 盐脱缩车间 滤碳液 器 脱储酸罐罐 储精罐压 成炭 炼车间 硫 透 光率 庆大霉素的炭脱流程图 《92% 浙江大学17春16秋浙大《家畜传染病学(乙)》在线作业 一、单选题(共 40 道试题，共 80 分。) 1. 感染猪传染性胃肠炎后，死亡率最高得猪是()阶段得猪 A. 10日龄以内的猪 B. 青年猪 C. 育肥猪 D. 怀孕母猪 正确答案: 2. 病毒性传染病主要用()进行预防。 A. 抗菌素 B. 疫苗 C. 中草药 D. 干扰素 正确答案: 3. 犬传染性肝炎与( )在免疫上可交叉保护。 A. ?型犬腺病毒 B. 犬瘟热病毒 C. 犬细小病毒 D. 流感病毒 正确答案: 4. 我国现阶段使用的猪瘟疫苗是通过( )的 连续传代后选育而成的。 A. 猪体 B. 猫体 C. 兔体 D. 羊体 正确答案: 5. 猫泛白细胞减少症由( )引起。 A. 细小病毒 B. 疱疹病毒 C. 轮状病毒 D. 冠状病毒 正确答案: 6. 猪丹毒主要发生于() A. 仔猪 B. 架子猪 C. 怀孕后期母猪 D. 香猪 正确答案: 7. 猪梭菌性肠炎，主要侵害()阶段的猪。 A. 1-3日龄的猪 B. 7-10日龄的猪 C. 10-30日龄的猪 D. 成年猪 正确答案: 8. 引起兔梭菌性下痢的病原是( )型魏氏梭菌 A. A B. B C. C D. D 正确答案: 9. 羊猝疽是由( )引起的一种疾病 A. 腐败梭菌 B. B型魏氏梭菌 C. 诺维氏梭菌 D. C型魏氏梭菌 正确答案: 10. 近20多年来，我国动物传染病的防制取得了显著进展，1996年1月16日，我国正式 宣布消灭了下面哪个疫病()，这是继牛瘟之后在我国第二个消灭的动物传染病。 A. 猪瘟 B. 鸡新城疫 C. 禽流感 D. 牛肺疫 正确答案: 11. 鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒疫苗接种的主要目的是() A. 防治鸡只感染野毒 B. 在后来感染野毒时，可以防治形成肿瘤 C. 诱发高水平母源抗体以保护其后代 D. 使体内产生保护力很强的中和抗体 正确答案: 12. 仔猪水肿病的特征病变为 A. 坏死性肠炎 B. 虎斑心 C. 雀斑肾 D. 胃壁和其他某些部位水肿 正确答案: 13. 鸡葡萄球菌病多发于()饲养阶段的鸡。 A. 10日龄以内 B. 10-20日龄 C. 30-60日龄 D. 产蛋鸡群 正确答案: 14. 对结核病进行检疫常采用() A. 沉淀反应 B. 变态反应 C. 补体结合试验 D. 平板凝集 正确答案: 15. 对于鸡败血支原体感染 A. 采用鲜血琼脂分离病原体 B. 常用青链素治疗 C. 特征性病变是喉头粘膜出血和糜烂 D. 可用全血平板凝集试验检出感染鸡。 正确答案: 16. 轮状病毒主要感染 A. 成年动物 B. 青年动物 C. 幼龄动物 D. 老年动物 正确答案: 17. 1956年，在我国宣布消灭了第一个动物传染病是()，为我国近代兽医史谱写了光辉的 一页 A. 猪瘟 B. 鸡新城疫 C. 牛瘟 D. 牛肺疫 正确答案: 18. 目前预防兔病毒性出血症常用的疫苗是() A. 弱毒苗 B. 中毒苗 C. 脏器组织灭活苗 D. 油乳剂苗 正确答案: 19. 某鸡场鸡群发生一种急性传染病，以结膜炎、呼吸困难、喀出带血的粘液等为主要的 临床特征，在诊断上应首先怀疑该病为 A. 鸡新城疫 B. 鸡传染性支气管炎 C. 鸡传染性鼻炎 D. 鸡传染性喉气管炎 正确答案: 20. 莱姆病的病原为() A. 支原体 B. 衣原体 C. 立克次氏体 D. 伯氏疏螺旋体 正确答案: 21. 下列( )措施属于治疗措施 A. 环境清毒 B. 注射活疫苗 C. 注射高免血清 D. 杀虫灭鼠 正确答案: 22. 猪喘气病是由()引起 A. 猪喘气病病毒 B. 猪丹毒杆菌 C. 衣原 D. 猪肺炎支原体 正确答案: 23. 兔病毒性出血症的病理变化主要在 A. 呼吸系统 B. 消化系统 C. 生殖系统 D. 泌尿系统 正确答案: 24. 喘气病容易在肺脏出现() A. 空洞 B. 表面有坏死区 C. 肉变区 D. 肺脏部分溶解 正确答案: 25. ()是鸡葡萄球菌的特征性临床症状 A. 呼吸困难 B. 腹泻 C. 败血症 D. 坏疽性皮炎 正确答案: 26. 珍珠病为 A. 布氏杆菌病 B. 结核病 C. 炭疽 D. 喘气病 正确答案: 27. 分离禽曲霉菌应用() A. 普通营养琼脂 B. 巧克力琼脂 C. 营养肉汤 D. 马铃薯营养琼脂 正确答案: 28. 羊快疫由( )引起 A. A型魏氏梭菌 B. 腐败梭菌 C. B型魏氏梭菌 D. 强直梭菌 正确答案: 29. 开产前蛋鸡出现两腿及翅膀麻癖，假如要确切诊断为鸡的马立克氏病，最后要依据 A. 凝集实验 B. HA及HI C. 组织学检查 D. 血清学检查 正确答案: 30. ()是由我国科学家在国际上首次发现的家禽传染病 A. 小鹅瘟 B. 鸭瘟 C. 禽流感 D. 新城疫 正确答案: 31. 被疯狗咬伤后，应() A. 立即打破伤风针 B. 立即打抗菌素 C. 立即打狂犬病疫苗 D. 不管 正确答案: 32. 急性猪肺疫的特征性病变是( ) A. 纤维素性肺炎 B. 坏死性肠炎 C. 脾肿大，边缘梗死 D. 坏死性肝炎 正确答案: 33. 山羊传染性胸膜肺炎由( )引起 A. 支原体 B. 衣原体 C. 多杀性巴氏杆菌 D. 溶血性巴氏杆菌 正确答案: 34. 鸡传染性鼻炎由()引起 A. 大肠杆菌 B. 支原体 C. 副嗜血杆菌 D. 巴氏杆菌 正确答案: 35. 鸭病毒型肝炎主要发生于( )饲养阶段的鸭。 A. 1-7日龄小鸭 B. 一月龄鸭 C. 3月龄鸭 D. 成年鸭 正确答案: 36. 下列病原中，只有一个血清型的有 A. 鸡新城疫病毒 B. IBDV C. IBV D. 鸭病毒性肝炎病毒 E. MDV 正确答案: 37. 猪伪狂犬病侵入一个猪场后，往往难以彻底根除，其根本原因是 A. 病毒毒力太强 B. 动物健康带毒 C. 病毒对外界环境抵抗力太强 D. 病毒可通过飞沫传播 正确答案: 38. 在猪病防制中，我国研制的()疫苗是目前世界上公认的比理猪病疫苗 A. 猪蓝耳病 B. 猪瘟 C. 猪流感 D. 猪伪狂犬病 正确答案: 39. ()又称“恐水症” A. 伪狂犬病 B. 狂犬病 C. 布氏杆菌病 D. 犬瘟热 正确答案: 40. 猪喘气病疫苗主要通过( )途径进行免疫。 A. 皮下 B. 肌肉 C. 胸腔 D. 饮水 正确答案: 浙大《家畜传染病学(乙)》在线作业 二、多选题(共 10 道试题，共 20 分。) 1. 下列()可引起猪出现呼吸道症状 A. 猪瘟 B. 猪巴氏杆菌 C. 猪支原体病 D. 结核病 E. PRRS 正确答案: 2. 下列家禽传染病中，( )有呼吸道症状。 A. 鸡新城疫 B. 鸡曲霉菌病病 C. 鸡传染性喉气管炎 D. 鸡马立克氏病 E. 鸡传染性法氏囊病。 正确答案: 3. 由沙门氏菌引起的传染病有 A. 猪副伤寒 B. 鸡白痢 C. 禽伤寒 D. 禽副伤寒 E. 仔猪白痢 正确答案: 4. 下列()可引起母猪出现繁殖障碍症状 A. 钩端螺旋体 B. 日本乙型脑炎 C. 细小病毒 D. 布病 E. 猪瘟 正确答案: 5. 下列微生物的变异中()与传染病的发生与防制直接相关 A. 毒力变异 B. 抗原变异 C. 形态变异 D. 生化特性变异 E. 耐药性变异 正确答案: 6. 气肿疽，() A. 由气肿疽病毒引起 B. 主要竟土壤传递 C. 肌肉丰富部位发生肿胀 D. 可用疫苗接种进行预防 正确答案: 7. 口蹄疫() A. 其病原具有七个血清型，但无血清亚型 B. 病原对外界环境的抵抗力强 C. 可感染牛、猪、等多种动物 D. “虎斑心”病变 E. 传染性极强 正确答案: 8. 下列传染病中，其流行具有季节性的有( ) A. 结核病 B. 炭疽 C. 牛传染性角膜结膜炎 D. 牛三日热 E. 鸡新城疫。 正确答案: 9. 鸭瘟在临床上主要表现() A. 头颈肿大 B. 下痢 C. 呼吸困难 D. 食道与泄殖腔粘摸有假膜覆盖 E. 两腿麻痹 正确答案: 10. 下列()可引起猪腹泻 A. 猪瘟病毒 B. 猪丹毒杆菌 C. 布氏杆菌 D. 喘气病 E. 猪细小病毒病 正确答案: