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三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究

2017-12-01 7页 doc 21KB 15阅读

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三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究 三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白 吸附方式的研究 . - 1?. ?lO3? 三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究., 喻钒陈治清 摘要采用虹外光谱技术,研究r轻基磷灰石,生物玻璃陶瓷和羟基聚磷酸钙钠吸附人 体白蛋白后,蛋白与材料的结合方式.结果表明羟基磷灰石主要是靠氢键结合;生物玻璃陶瓷 则主要靠静电引力结合,lg如果吸附的蛋EI质较多,所吸附的蛋白质可依据吸附方式的不同至 少分为两层:结掏变化较大,紧贴材料表面的底层和结掏变化不明显的...
三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究
三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究 三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白 吸附方式的研究 . - 1?. ?lO3? 三种人体硬组织替代材料对人血浆白蛋白吸附方式的研究., 喻钒陈治清 摘要采用虹外光谱技术,研究r轻基磷灰石,生物玻璃陶瓷和羟基聚磷酸钙钠吸附人 体白蛋白后,蛋白与材料的结合方式.结果表明羟基磷灰石主要是靠氢键结合;生物玻璃陶瓷 则主要靠静电引力结合,lg如果吸附的蛋EI质较多,所吸附的蛋白质可依据吸附方式的不同至 少分为两层:结掏变化较大,紧贴材料表面的底层和结掏变化不明显的顶层.羟基聚磷酸钙钠 和蛋白质的结合方式还难以推断; 关键词羟基磷灰石生物玻璃陶瓷 有研究报道,吸附有白蛋白和7球蛋 白的羟基磷灰石植入动物骨组织后,骨组织 的修复明显加快作者认为可能是由_F材料 表面吸附蛋白质后,各种细胞易于沉积的缘 故.还有作者在研究其它用于心血管系统 的生物材料时发现,吸附有蛋白质的材料表 面更易使血小板沉积,且这种加速血小板沉 积的作用和所吸附的蛋白种类与数量都有关 系.因此,人体硬组织替代材料与蛋白质 的相互作用规律是材料生物相容性的'个瞩 要方丽.本课前一部分已经系统地研究r 不同材料对不阿血浆蛋白吸附量的变化规 律结果表明,不同材料对蛋白质的吸附能力 是不同的,车实验采用红外光谱技术,研究人 血白蛋白被羟基磷灰石(HA),羟基聚磷酸 钙钠(HP)和生物玻璃陶瓷(BGC)吸附后,蛋 白质和这些材料的结合方式以及被结合的赞 白构象的变化.为进一步说明人体硬组织替 代材料的生物相容性.探索材料表面连接蛋 白质的提供理|仑依据. 1.材料与方法: 1.1.材料:冻=f正常人血清白蛋白.卫生 部上海生物制品研究所提供.HP,中国科学 院成都化学研究所提供.HA,BGC,本研究 室合成F1一IR20sxB红外光谱仪,美国 Nicolet产. 1.2.方法:将蛋亡『质用pH7.4的磷簸缓 羟基聚磷酸t , Jitt~I光谱 冲液稀释成4.5和0.5的溶液.将上述二 种材料研细,180~200目过筛.三种材料各 称5g分别放人30ml稀释后的蛋白溶液中, 37C条件下缓慢电磁搅拌吸附10分钟取出. 之后离心,去掉上清液.沉淀加30rnl蒸馏水 洗涤,离心.去掉上清液.所得沉淀放入硅胶 干燥器中干燥.干燥后的群品KBr压片,进 行红外检测.检测条件:分辨率为~cm,,扫 描次数为2O次,扫描范围为4000, 400cm,. 2.结果与讨论:图1为固体白蛋白的红 外光谱图3307cm是NH的l伸缩振动峰. 1657cm是酰胺峰I.1541cm是酰胺峰II. 1451cm__是酰胺峰I1I.622.43cm-t.是酰胺 峰1v _ 图2为纯HA的红外光谱图.3572cm 为羟基峰.罔3为嗳.附0.5自蛋白的HA 的红外光谱图和图2相比多出两个峰,165S 和1554cm一这分别为酰胺峰I和II.和纯 蛋白相比,这两个峰分别升高8和I3cm一. 酰胺峰I主要为c一的伸缩振动(占80), 其次是c,N伸缩振动和N—H的面内振动 (各占1O) 作为固相的蛋白质,分子间的距离小,分 子中的羰基和氢可在分子间形成氢键.溶解 唯者单位:610041华西医科大学中腔腻学院材料 学教研室' ?104? .. 田1固体臼嚣臼的红外光谱图 并吸附在材料表面上后,由于吸附量少,分子 间的氢键受到破坏,造成酰胺峰I的波数升 高口]蓦E胺峰II来自N—H面内弯曲振动 (占60)和c—N的伸缩振动(占40).这 个峰的渡数和c—N—H的缔台状态有关. 当它和周固的物质形成氢键后.渡散会随着 升高口].因此可以推测,当HA吸附较步的白 蛋白时,原来分子间羰基和氢形成的氢键受 到破坏.而c—N—H则和材料的亲水部分 发生氢键结合.引起酰胺峰II的波数升高. 图4是HA吸附4.5的蛋白质后的红外光 谱图从图中可看出,酰胺峰I,?,Iu分别和 纯蛋白的波数一致.渡数小于1395c_m的一 些小峰.在这个图中看不到,可能是由于被 HA本身的峰所掩盖所以可以认为吸附较 多的蛋白质时,所测到的蛋白质结构没有明 显变化. 图5是纯BGC的红外光谱图.图6是吸 附了0.5白蛋白的BGC红外光谱图.和图 5相比明显多出1650和1428.8cra两个 峰.说明有蛋白质被吸附.[650cm可能为c — O和BGC上的OH一形成了氢键造成波 数略有下降的酰胺峰I.而1428.8则是由丁 蛋白质上的羧基与BGc上的金属离子形成 r金属盐,由COO所产生的峰].图7是 吸附4,5白蛋白的BGC的红外光谱图该 l刳i昔和4幸H似.监门质的儿个l耍峰的ft 口 置都无明显变化因此所测的蛋白质结构无 显着变化. 田2纯羟基碑灰石的红外光谱圈 ??最甜4.5自蛋白的翌基肆灰石的虹井光谱圈 图8是纯HP的红外光谱图.图9是吸 附0.5白蛋白的HP红外光谱图,和图8相 比.上面明显多出1659.?cm峰.这是酰胺 口腔材料器械杂志1997年第6卷第3期 圈6吸附O.5白蛋白的BGc的红外光谱图 圉7吸附4.5白蛋白的BGc的红外光谱图 峰I.该峰的位置和纯蛋白的酰胺峰I的位置 一 致.酰胺峰II,III可能由于所吸附的量较 少,未能显出.由于酰胺峰1的位置基本未 变,又无酰胺峰II,III,因此对HP和白蛋白 的结合方式还难以推断.图1o是吸附4-5 白蛋白的HP的红外光谱图.几个主要的酰 ?105? 胺峰位置都无变化,因此蛋白质的结构无明 显变化. 一 . 田9吸附0.5白蛋白的HP的红外光谱囤 圈10吸附4.5白蛋白的I-IP的红外光谱囤 3.小结:白蛋白被HA吸附后,主要是 靠氢键结合的;而BGC的吸附剐主要是靠 离子的静电引力结合的.而且这两种材料吸 (下转第114页) 人行脱敏治疗,近期疗效肯定,远期疗效有待 进一步观察. All—Bond?粘合剂对牙髓较小刺 激].美国查尔期?考柯斯博士报道用 37磷酸半胶体处理牙釉质牙本质,用All — BondI粘合剂及复合树脂修复牙体,在猴 子的牙髓器官中没有发现急性,慢性炎症.我 科采用All—BondI粘台剂治疗牙意外穿 髓.但牙髓没有炎症的患者行牙体修复4例, 其中2病人随访没有牙过敏或牙髓炎症状,2 例病人发生过敏和急性牙髓炎症状.深度窝 嗣27例中的4例发生牙髓过敏或牙髓炎症 状,中度窝洞46例中的1例发生牙髓炎,牙 髓炎症状一般在牙体修复半年内发生.浅的 窝洞12例没有牙髓炎症状.故建议在近髓窝 洞垫底. 我们对Al1一BondI粘合剂临床使用 观察时间较短,有待进一步作远期观察. 口腔材料器械杂志1997年第6卷第3期 参考文献 1.ByomlglSub.,FrankA.CLncione.All—bond3:the Eourthgenerationhondiogsystem.Estheticdentistry update.1992;3c3):61. 2AJohnGwlnnett.Deatinbo柚strengthafterairdrying andrewettJng.AmericanJournalofDentistry.1994j7 (3):144. 3.ByoungISubAll——bond————FouthGenerationDentin BondingSy8ternJournalofestheticdeatisty?1991}3 (4)}l39. 4.WhiteKC,CoxCF.KancaJ.eta1.Histologeal地 spongesofacidetchingvitaldeatin-JDentRes?l992 71188. 5Johnkanca.Resinbondingtowetsuhstrate.1.bonding todeatin.Quintessenceinternation1992|23(1):39. 6.Chnarie~F.coK,ShiroSuzuki.BiologicalupdateofCA (OH)2haBes+linersandrwadhesivesystems.Esthetic dentistryupdate1994;j(2):39. (收穑l996一l0—30修回:1997一O{一29) (上接第105页) 附较多的白蛋白时,所吸附的蛋白质至少可 分为两层,繁靠材料表面的蛋白质由于蛋白 质和材料相互作用造成蛋白质的结构有所变 化;而上面一层则是由于重力等因素造成的 物理沉积,结构基本未变.HP吸附自蛋白 后,由于本实验的数据有限,还难以确定蛋白 质和材料结合方式以及蛋白质被吸附后构象 的变化,还有待于进一步研究确定. 参考文献 l_邱静,陈治清.张敏等.植^材料表面哑附蛋白质对生物 相窖性髟响.(生物医学工程通报1994~6(1):120? 2lamesH.Silver,Horng--Banl,StuaxtL.C~per, Effectofproteinadsorptiono13.theblood--contacdngre spongeofsulphonatedpolyurethanes?Bionmt1993I14 (11);834. 3.WardC.A..StangaD.,B~ologicalactivity0f(ihlSno genadsorbedonsyntheticmaterials,T.ColloM-Inter faceSc】.1986'1l4333. 4.LindonJ.N..mcmanam8G.,KushnerL.,eta1.Does theconfornmtioaofadsorhrinogendictat~platelet interactionswithartificialsurIaees?Blood1986I68; 355. 3.BryndaE..Cet~ovaN.A.,StolEquilibriumad— sorptionofhuman8erul2lalbumin?Ildhumanfihrlnogen oRhrdmCaoble&Ildhydmp~icsur~B,B[omed- Mater.Res.1984ll8:885. 6SanterreJ.P.}TenHoveP.,VanderhampN.Het alEffect.fsulEonationofsegmentedpolyurethance~on thetransientadsorptionoffibfin~enfromplasm~}pos— siblecorrelationwithanti~agulantbehavior}J BiomedM~.terR1992;36{39. 7.E.J.Castillo.J1.Koemg.J.M.Andersonetal Proteinadsorptiononsoftcont&4~tlenses.Bioraat. 1986I7{9 8谢晶曦着.缸外光谱在有机化学和药枋化学中的应用- 韩学出板社,第一版,1987:8i295? (收穑l996一O6—05)
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