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局灶性脑缺血再灌注致大鼠大脑皮质tau蛋白异常高度磷酸化

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局灶性脑缺血再灌注致大鼠大脑皮质tau蛋白异常高度磷酸化局灶性脑缺血再灌注致大鼠大脑皮质tau蛋白异常高度磷酸化 第 , , ,卷 第 ,期 第 , ,页 华 中科 技 大学 学 报 (医学 版 ) ( , (, , ,,, , ,, ,( , , ,, ,月 ,, 年 , , , ,, , , ,,, , , ,; , , , , ; ; , ,, , , , , ,, , ; , , ,, ( , , 局灶 性 脑 缺 血 再 灌 注 致 大 鼠大 脑 皮 质 ,, , 蛋 白异 常 高度 磷 酸 化 , 王 海 均 赵 洪 洋? 熊 南 翔 黄 俊 红 姚 东 晓 赵心同 ...
局灶性脑缺血再灌注致大鼠大脑皮质tau蛋白异常高度磷酸化
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, , ? , 医 华 中 科技 大 学 学 报 ( 学 版 ) , , 年 , 第 , 第 ,期 ,, ,月 ,卷 ,,,, , ,,, , , ,检测 液 , ?避 光孵 育 , , , ,洗 涤 ,, 材 料 与 方 法 封 应用 免疫荧光 显微 镜照相 。 阳性 细胞计数 次 , 片,,, ( 主 要 试 剂 和 仪 器 采 用每 只大 鼠取 ,张切 片 ,同一倍 数 下 每 张切 片计 , —, ,, , ,, ,, ,、,, , , , , , , , — ,, , , , — , , , , , 、, , , , , 、 总 数 ,个视 野 的阳性 细胞 , 和 除 以 ,作 为该 切 片 的 , ,,, ;,,,抗 体 购 自 ,, , ,,公 司 ,, —, , , 、 抗 ,,, ,, , 兔 取 阳性细胞 计数 , 平均值 。 ,, , ,, , ,大 鼠 , ,, 单克 隆抗体 购 自 , , ,, , 公 司 ;罗 ( , , , 蛋 白 印迹 技 术 检 测 ,,蛋 白 的磷 酸 化 水 平 丹明 ( , , ,,,标 记 的羊 抗兔 ,, 和羊 抗小 鼠荧 , ,, ,) , 腹腔 注射麻 醉后 立 即冰 上断头 取右侧 顶叶皮质 二光 二 抗 、 喹 啉 甲 酸 ( , 蛋 白检 测 试 剂 盒 、 ,, , ,) , ,— 放 于 一,,?冰箱 内备 用 。取 出标 本加 入 细 胞 裂解 , ,, ,,,,, 化学发 光试剂 盒 购 自 ,,; 公 司 。原 位末 , , 液, 匀 , , ,离心 , , 取上 清 , 冰上裂 解 、 浆 , ,, , ,,, , 端标记 (,,,, ) 亡 检 测 试 剂 盒 购 自 碧 云 天 公 , 凋 , , , ,法 测蛋 白浓 度 。, 聚丙 酰 胺 凝 胶 电泳 后将 ,,,公 司 。,,司 。化 学试 剂 购 自 ,, ,,,,,荧 光 , 蛋 白转移 至 硝 酸纤 维 膜 上 。 以 , 牛 血 清 白蛋 白 显微镜 、 , ,, 电泳仪 和转膜仪 购 自 , ,,, ,公 司 ,冰 , ,) ( , 封 闭后 加 入 一抗 孵 育 过夜 ,常温 下辣 根 过氧 冻 切 片 机 购 自 , ,,,公 司 。 ,, , ,, 化 物 酶标 记 的 ,,二抗 孵育 ,, , ,显 色 ,扫描后 , , 实 验 动 物 分 组 ( ,, , 用 , , 计 ,软件分 析 系统定 量 , 算灰 度值 ,实验 重 清 洁 级 雄 性 , ,, ,, ,,, , 大 鼠 , ,, ,— , , ( ,) ,只 , 复 ,次 。 由华 中科技大学 同济 医学 院 实验 动 物 学部 提供 ,质 ( , , , 不 溶 性磷 酸 化 ,,蛋 白 的检 测 , , , , ,量 , , , , , 饲 养 温 度 , , , 。 湿 度 , , ,,, , ,,,加 入 , , , , 将 大 鼠右侧 额顶部 皮质 , , — , , 自由摄食 与饮水 , 夜 节 律 , , , 昼 ,, 大 ,,:, , 鼠 , 缓 冲 液 ( , ,,,, , ,, , , , , ,, , , ,, ,, — , , ( , , , ,,禁食 不禁 水 。 随机 分 为 ,组 : 照 组 (术前 , 对 即 ,,,, ,, , ,,,, ,,,, , ,, ,, , , ,, , ,, , ,, ,, ,, , , ,组 ) 缺血 再 灌 注 模 型 (, 依 据 脑 缺 血损 伤 .
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