【doc】胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶
达的改变
胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素
1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变
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28?2006年2月第22卷第1期ChinJEndocrinolMe讪丝!:!
?糖尿病与心血管疾病的联系?
胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1,
内皮型一氧化氮合酶表达的改变
刘颖何金刘志民赵瑛刘会敏
【提要】高糖饲料喂养SD大鼠建立胰岛素抵抗(IR)模型.12周时IR大鼠心室肌
内皮素(矾')-1
蛋白及mRNA表达升高,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白和mRNA表达降低.表
明高糖膳食诱导的IR
大鼠在IR早期已存在心肌ET一1与eNOS平衡的异常.
【关键词】胰岛素抵抗;内皮素1;一氧化氮合酶;心肌
AlterationofmyocardialET-1andeNOSgeneexpressionsininsulin-resistantratsduringnormalglycemia
stageuUYing'.HEJin.UUZhi—min,ZHA0Ying,uUHui—
min.DepartmentofEndocrinology,
ChangzhengHospital,TheSecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai200003 Correspondingauthor:LIUn,Email:Zung@6618@yahoo.con.cn
【Summary】
Insulin.resistant(IR)ratmodel(rt:10)WaSestablishedbyfeedinghish-slucosediet.SD ratsfedwithnormaldiet(rt=10)wereusedascontrol(CN)group.Bythe12thweek,thelevelsofendothelin-1
(ET.1)proteinandmRNAofmyocardiuminIRgroupwerehigherthanthoseinCNgroupwhilelevelsofeNOS
proteinandmRNAinIRgroupwerelowerthanthoseinCNgroup.showingtheimbalantebetw
eenET-1andeNOS
inmyocardiumofhigh.glnoosedietinducedIRratsduringearlyIRstage.
【Keywords】Insulinresistance:Endothelin.1:Nitrie.oxidesynthase;Myoeardium
(ChinJEndocrinolMetab.2oo6,22:28-29)
血管内皮功能异常在胰岛素抵抗(IR)发病机制中具有重 要作用.但是目前二者关系的研究多集中在胰岛素作用组织, 而对于与IR密切相关的重要器官心脏,在IR早期的血管内皮 功能研究甚少.本研究采用高糖饲料诱导的IR大鼠模型,研 究血糖正常阶段心肌内皮素1(ET-1),内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)表达的改变,并探讨其在IR发生,发展中的意义. 一
,材料与
1.IR大鼠模型的复制及动物分组:IR大鼠模型的复制参 见参考文献[1].随机分为二组:对照组(CN组)10只喂普通 饲料.IR模型组(IR组)13只喂高糖饲料.6周时检测IR组 血脂,血糖及血胰岛素(Ins)水平,符合IR模型要求的(10只) 继续喂高糖饲料6周.
2.组织学观察:12周末取心室肌分别置于液氮和制成石腊 标本.石腊切片HE染色,光镜下观察心室肌组织学变化. 3.半定量免疫组化检测心室肌ET.1,eNOS蛋白表达:采用 Envi8i0n二步法.利用Axioplan2imaging显微图像
系统, 以阳性着色面积(%)×平均吸光度计算ET-1,eNOS相对表达 量.
4.半定量RT.PCR检测心室肌ET.1,eNOSmRNA表达:采 用一步法RT-PCR检测心室肌ET-1,eNOSmRNA表达.根据 基金项目:上海市卫生局医学发展基金重点项目资助课
[2001ZD002(3)]
作者单位:200003上海,第二军医大学附属长征医院内分泌科(刘 颖,刘志民),病理科(何金,刘会敏),神经内科(赵瑛)
通讯作者:刘颖.Email:liuying6618@yahoo.corn.cn
文献报道的ET.1,eNOS及13一aetin序列合成引物,以目的基 因与B—actin电泳条带吸光度比值作为目的基因的相对表达 量.
5.统计学处理:所有数值以?5表示,显着性分析采用二 组间均数比较t检验.
二,结果
1.各组大鼠心室肌组织学观察:光镜下IR大鼠心肌表现 为心肌纤维横纹模糊,小动脉壁增厚,心肌间质轻度纤维组织 增生.
2.各组大鼠心室肌ET.1及eNOS蛋白表达免疫组化半定 量检测结果:ET?1和eNOS均表达于各组大鼠心肌的动脉及毛 细血管内皮细胞胞浆中,阳性显色为红色(图1,4).半定量 分析表明:IR组心室肌ET.1蛋白表达显着高于CN组(22.99 ?2.78f)51.35?0.24,P<0.01);eNOS蛋白表达显着低于CN 组(2.05?0.52仍24.34?2.97,P<0.01). 3.各组大鼠心室肌ET.1及eNOSmRNA表达检测结果:IR 组心室肌ET-1mRNA的灰度比显着高于CN组(0.92?0.07tIs 0.17?0.02,P<0.01);eNOSmRNA的灰度比显着低于CN组 (0.32?0.03f)51.87?0.13,P<0.01). 三,讨论
本研究采用高糖膳食诱导的IR大鼠模型,在喂养12周时 检查,IR大鼠血糖在正常范围,但出现血脂,血压的异常,血清 Ins水平升高…;本研究进一步观察可见心肌组织学的异常改 变;心肌ET-1与eNOS间的平衡出现异常.ET和eNOS对心脏 的作用是多方面的.冠脉内ET-1生成过多可引起心肌缺血缺
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参考文献
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