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【doc】胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变

2017-11-29 6页 doc 19KB 6阅读

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【doc】胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变【doc】胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变 胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素 1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变 ? 28?2006年2月第22卷第1期ChinJEndocrinolMe讪丝!:! ?糖尿病与心血管疾病的联系? 胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1, 内皮型一氧化氮合酶表达的改变 刘颖何金刘志民赵瑛刘会敏 【提要】高糖饲料喂养SD大鼠建立胰岛素抵抗(IR)模型.12周时IR大鼠心室肌 内皮素(矾')-1 蛋白及mRNA表达升高,内皮型一氧化氮合酶(eNO...
【doc】胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变
【doc】胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶达的改变 胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素 1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变 ? 28?2006年2月第22卷第1期ChinJEndocrinolMe讪丝!:! ?糖尿病与心血管疾病的联系? 胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1, 内皮型一氧化氮合酶表达的改变 刘颖何金刘志民赵瑛刘会敏 【提要】高糖饲料喂养SD大鼠建立胰岛素抵抗(IR)模型.12周时IR大鼠心室肌 内皮素(矾')-1 蛋白及mRNA表达升高,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白和mRNA表达降低.表 明高糖膳食诱导的IR 大鼠在IR早期已存在心肌ET一1与eNOS平衡的异常. 【关键词】胰岛素抵抗;内皮素1;一氧化氮合酶;心肌 AlterationofmyocardialET-1andeNOSgeneexpressionsininsulin-resistantratsduringnormalglycemia stageuUYing'.HEJin.UUZhi—min,ZHA0Ying,uUHui— min.DepartmentofEndocrinology, ChangzhengHospital,TheSecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai200003 Correspondingauthor:LIUn,Email:Zung@6618@yahoo.con.cn 【Summary】 Insulin.resistant(IR)ratmodel(rt:10)WaSestablishedbyfeedinghish-slucosediet.SD ratsfedwithnormaldiet(rt=10)wereusedascontrol(CN)group.Bythe12thweek,thelevelsofendothelin-1 (ET.1)proteinandmRNAofmyocardiuminIRgroupwerehigherthanthoseinCNgroupwhilelevelsofeNOS proteinandmRNAinIRgroupwerelowerthanthoseinCNgroup.showingtheimbalantebetw eenET-1andeNOS inmyocardiumofhigh.glnoosedietinducedIRratsduringearlyIRstage. 【Keywords】Insulinresistance:Endothelin.1:Nitrie.oxidesynthase;Myoeardium (ChinJEndocrinolMetab.2oo6,22:28-29) 血管内皮功能异常在胰岛素抵抗(IR)发病机制中具有重 要作用.但是目前二者关系的研究多集中在胰岛素作用组织, 而对于与IR密切相关的重要器官心脏,在IR早期的血管内皮 功能研究甚少.本研究采用高糖饲料诱导的IR大鼠模型,研 究血糖正常阶段心肌内皮素1(ET-1),内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)表达的改变,并探讨其在IR发生,发展中的意义. 一 ,材料与 1.IR大鼠模型的复制及动物分组:IR大鼠模型的复制参 见参考文献[1].随机分为二组:对照组(CN组)10只喂普通 饲料.IR模型组(IR组)13只喂高糖饲料.6周时检测IR组 血脂,血糖及血胰岛素(Ins)水平,符合IR模型要求的(10只) 继续喂高糖饲料6周. 2.组织学观察:12周末取心室肌分别置于液氮和制成石腊 标本.石腊切片HE染色,光镜下观察心室肌组织学变化. 3.半定量免疫组化检测心室肌ET.1,eNOS蛋白表达:采用 Envi8i0n二步法.利用Axioplan2imaging显微图像系统, 以阳性着色面积(%)×平均吸光度计算ET-1,eNOS相对表达 量. 4.半定量RT.PCR检测心室肌ET.1,eNOSmRNA表达:采 用一步法RT-PCR检测心室肌ET-1,eNOSmRNA表达.根据 基金项目:上海市卫生局医学发展基金重点项目资助课 [2001ZD002(3)] 作者单位:200003上海,第二军医大学附属长征医院内分泌科(刘 颖,刘志民),病理科(何金,刘会敏),神经内科(赵瑛) 通讯作者:刘颖.Email:liuying6618@yahoo.corn.cn 文献报道的ET.1,eNOS及13一aetin序列合成引物,以目的基 因与B—actin电泳条带吸光度比值作为目的基因的相对表达 量. 5.统计学处理:所有数值以?5表示,显着性分析采用二 组间均数比较t检验. 二,结果 1.各组大鼠心室肌组织学观察:光镜下IR大鼠心肌表现 为心肌纤维横纹模糊,小动脉壁增厚,心肌间质轻度纤维组织 增生. 2.各组大鼠心室肌ET.1及eNOS蛋白表达免疫组化半定 量检测结果:ET?1和eNOS均表达于各组大鼠心肌的动脉及毛 细血管内皮细胞胞浆中,阳性显色为红色(图1,4).半定量 分析表明:IR组心室肌ET.1蛋白表达显着高于CN组(22.99 ?2.78f)51.35?0.24,P<0.01);eNOS蛋白表达显着低于CN 组(2.05?0.52仍24.34?2.97,P<0.01). 3.各组大鼠心室肌ET.1及eNOSmRNA表达检测结果:IR 组心室肌ET-1mRNA的灰度比显着高于CN组(0.92?0.07tIs 0.17?0.02,P<0.01);eNOSmRNA的灰度比显着低于CN组 (0.32?0.03f)51.87?0.13,P<0.01). 三,讨论 本研究采用高糖膳食诱导的IR大鼠模型,在喂养12周时 检查,IR大鼠血糖在正常范围,但出现血脂,血压的异常,血清 Ins水平升高…;本研究进一步观察可见心肌组织学的异常改 变;心肌ET-1与eNOS间的平衡出现异常.ET和eNOS对心脏 的作用是多方面的.冠脉内ET-1生成过多可引起心肌缺血缺 —巫Jl??】l】6—|l 生mlU上!I_罅11粒盟 氧心…-J心珊,l凡l幔LL,~Jl厩化【】产1的,':, 卷?l『lM】墩,陴雌:造成心内盥似植的m管甜伥J能+ 下降ICI】相tNIl掏成H啊t敢麻血管请物匝.儿 :首平新竹破坏?f咂垃弗}遥静f一OIIIL害n艟生啦,,? 近,k-|;!^!惰岛采Ifit管内虚为幢岛索】盐^间艟? , ,女, 一 图I忱批虮心JlJI心事Ii>j舞JI免峦纽化2Il1) "小.LL叭f,券1【I矗f免疫化×:?) 图2刊 圈4州IIG21t心~IL1.q应氧化氨丹酶篮丧r《位难他x 2011】 I'l~J谴对』蒯节胰,隶被感封1:山rh盟fb'进帛索 司鹰l纽的转运j埔曙11j主血驾损怕吲 ,f造成M管性辅]gt7slLr详.哺%扩血管作Hj撼似毛细 育血{少.这衅因素他梅岛索作刑碱低葡曲黼在圳,用的 摄取和利用少从而甘弛胰岛隶抵抗的艇L在高精膳食 堵甘帅I1i凡吼4同时阡惴?I女采例的皿_管舒帐厦麻 降低岗体行骼肌脯末刺礅n葡精辅哇话肚FI唪奉奠 驻中.霞大鼠心审肌E/Iit高件常i~N,q仵II1i(1 不他幢岛翥作Jlj在III累眭的蓝露一肌也 出现J臀,业J能异常.蚪可能成为H肝精i'.,JllL@发生 钓潸砬害【l{时骨出拍i的饥制尚下明确些Iq索包 括1巾蒜情惯氧化f1织映m缺氧脂I【纽采1t17~111胞Ir f【?镊机末和游离脂9哺?j椎墼与J发 总之水研兜l高1I{i膳?西导的114托血Ill早期的心 JIJ1.F/IL骨is1戊功异离丧liJJI胰岛紊敏感?"91器官Jn诅 内拟伤一个新角噜排r忏IhI虚异与l】i的联 乐舟IIItD,J~ll血管内废功能异常口{珩腻捕心肌情 痫t街在作用.1H醴f此』iL仃悍护【0l管'内应的于预清 n雇.芷均得进研究 参考文献 -I域K?目帛抵抗日?忡一 .J?怍?f{南#察牛*?甜化{女!I.21l21)0-2112 2mII:辉唧*{J'1吨术肆矗选柠々讲 北-_1H女摧.J99426.2428 N~ldliIhI.hilippe?AmnIIFnalul儿_I1…wIl?u|_n? highllldIli1w[…RIq679:g75{77 4{ll1Ml?Ell_?IIIA?}IInrIlinI:^1iill~ IJrT】v…JIuLIlIfv…h1hIm'hc?nl?…^rtlHJ】n 5VinJ…M^.?】_【imf_I?…TMJMfJitJ,l1"" -l1J,I?i【_?1lCurlDiubI{i?20033:279288 …iII_lrlM『??lh^vlljhl,I|_I…rinI1in…I?I? l11ghun?rIIlJ…I_}…iii【…rTli"n~enalbhInI一【r}m} 圈3:6熏抗一LL,IJILI,JJ.化弧舟胁蛋白彘沾纯痤7::i.:W:.odll~)k…hl? e-etldo["fit.ffd'nd'I 化x帅?‰l_l?!?3J764n f2111)4,08I? ? .-? . . .. 1.^. ,, , . .I 一 一 . 0
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