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中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保护作用

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中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保护作用中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保护作用 中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保 护作用 时珍国医国药2010年第21卷第10期LISH1ZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VO L.21NO.10 成分为迷迭香酸,大黄提取液主要成分为大黄酸,大黄酚,大黄素 等游离蒽醌”.这些物质均为酸性,配伍后不易发生反应.实[8] 验结果证实,配伍后6h内配伍液的pH变化不大. 参考文献: [1J徐在品.抑制血管内膜增生的血流动力学和血液流变学机理研究 [D].重庆大学博士论文,...
中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保护作用
中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保护作用 中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保 护作用 时珍国医国药2010年第21卷第10期LISH1ZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VO L.21NO.10 成分为迷迭香酸,大黄提取液主要成分为大黄酸,大黄酚,大黄素 等游离蒽醌”.这些物质均为酸性,配伍后不易发生反应.实[8] 验结果证实,配伍后6h内配伍液的pH变化不大. 参考文献: [1J徐在品.抑制血管内膜增生的血流动力学和血液流变学机理研究 [D].重庆大学博士论文,2005.… [2]徐在品,卢占军,陈眷华,等.大黄醇提液抗家兔实验性高脂血症及 脂肪肝的实验研究[J].中国应用生理学杂志,2007,23(3):375. [3]陈眷华,卢占军,徐在品,等.大黄醇提液抗家兔实验性动脉粥样硬… 化作用的病理形态学研究[J].畜牧兽医,2007,38(7):728. [4]陈眷华,谭建民,徐在品,等.紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化的 实验研究[J].时珍国医国药,2008,19(11):2651.… [5]徐在品,高俊波,王清字,等.紫苏叶注射液的制备[J].安徽农业科- 学,2008,36(35):155l1. [6]徐在品,彭广能,郑静,等.石油醚萃取结合pH沉淀法制备大黄… 游离蒽醌注射液[J].山地农业生物,2008,27(4):340.’. [7]国家药典委员会.中国药典,?部[s].北京:化学工业出版社, 2005:附录62 刘春山,裴广柱.关于中药配伍现代化[J].数理医药学杂志,2009, 22(5):592. LiuXJ,SuSBStudyofcombinationmethodsforformulacompositionof Chineseherbalmedicinesandtheircomponents[J].ZhongXiYiJieHe XueBao.2009Jul;7(7):601. HaoHP,ZhengCN,WangGJ.Thoughtsandexperimentalexploration onpharmacokineticstudyofherbalmedicineswithmuhiple——compo? nentsandtargets[J].YaoXueXueBao.2009Mar;44(3):270. WangMJ.Combinationofeffectivecomponents,thenewpatternofdrugs derivedfrommodernChineseherbalmedicine[J].ZhongguoZhongXi YiJieHeZaZhi.2008Jan;28(1):73. 黄汉明,熊增慧,刘辉,等.银杏叶和丹参提取物与单味银杏叶提 取物对心脑血管的保护作用比较[J].中国临床康复,2005,9(35): l9O. 卢艳花.中药有效成分提取分离技术[M].北京:化学工业出版社, 2005.】50 中药莪术对四氯化碳所致急性肝损伤的保护作用 孙长海,王瑜一,徐明亮,方洪壮,李守君 (1.佳木斯大学药学院,黑龙江佳木斯154007;2.哈药集团制药总厂,黑龙江哈尔滨150086) 摘要:目的考察莪术对四氯化碳(CC1)所致大鼠急性肝损伤的保护作用.方法将40只Wistar大鼠随机分为4组,即 正常对照组,模型对照组,联苯双酯组及莪术给药组,分别灌胃等容积(15mL/kg)的生理盐水,联苯双酯(13mg/m1)和莪 术溶液(6.3mg/m1),连续7d,1次/d.末次给药后,除正常组外其他各组腹腔注射CC1(2mL/kg)原液1次,造成大鼠急 性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶(A),谷草转氨酶(AST),考马斯亮蓝蛋白,丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶 (SOD)水平.结果与模型组比较,莪术给药组ALT,AST及MDA含量均明显降低(P<0.01),SOD活性明显升高(P<0. O1);莪术给药组与联苯双酯组比较,AST,ALT及MDA,SOD水平无显着差异(P>0.05).结论中药莪术对CC1所致大 鼠急性肝损伤具有保护作用. 关键词:莪术;肝损伤;四氯化碳 DOI标识:d0i:10.3969/i.issn.1008—0805.2010.10.018 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1008-0805(2010)10.2460-02 ProtectiveEflfect0fRhizomeCurcumaExtractonAcuteLiverInjuryInduce dbyCC1in Rats SUNChang—hai,WANGYu’,XUMing—liang,FANGHong—zhuang,LI Shou—inn (CollegeofPharmacology,JiamusiUniversity,Jiamusi,154007,China) Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofRhizomecurcumaonacuteliverinjmyinducedbyCCI4inrats.Methods40 Wistarratswererandomlydividedintofourgroups:thenormalcontrolgroup,themodelcontrolgroup,theRhizomeCurcumagroup andthebifendategroup.TheywereadministeredwithNS,RhizomeCurcuma(6.3mg/m1)andbifendate(13mg/m1)atthee— qualvolume(15ml/kg)oncedailyforsevendays.Afterthelastadministration,allgroupsexceptthenormalgroupwereinjected withCC14(2ml/kg)stocksolutiontoinduceacutehepaticinjurymode1.Fivebiochemicalindexesweredetected,includingAIJT, AST,PROTEIN,MDAandSOD.ResultsComparedwiththemodelgroup,thecontentsofALT,AST,PROTEINandMDAwere remarkablydecreased(P<0.01),theactivityofSODwasremarkablyimproved(P<0.O1).ThecontentsofAST,ALTand MDA,SODintheRhizomeCurculnagroupweresimilartothoseinbifendategroup(P>0.05).ConclusionRhizomeCurcuma hasprotectiveeffectsonacutehepaticinjuryofratsinducedbyCC14. Keywords:RhizomeCurcuma;Hepaticinjury;CC14 收稿日期:2009.12,26;修订日期:2010-05-19 基金项目:黑龙江省自然科学基金(No.D200918) 作者简介:孙长海(1974.),男(汉族),黑龙江佳木斯人,现任佳木斯大学 药学院副教授,硕士学位,主要从事中药分析与计算药物分析工作. ? 2460? 莪术为姜科姜黄属植物蓬莪术CurcumaphaeocaulisValeton, 广西莪术CurcumakwangsinensisS.G.LeeetC.F.Liang和温莪术 CurcumawenyujinY.H.ChenetC.Ling的干燥根茎.’.中医理论 认为莪术辛,苦,温,归肝,脾经,具行气破血,消积止痛的功效,主 要成分为挥发油和姜黄素两大类成分,挥发油中所含p一榄香 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010V OL.21NO.10时珍国医国药2010年第21卷第lO期 烯,吉马酮,莪术二酮,莪术酮等成分且具有较强的生理活性,在 抗肿瘤,抗菌,抗病毒等方面有较好的作用,且有保肝利胆的功 能.近年研究发现中药莪术可作用于HSCT6细胞,使基因 TMP2,L一6,TGF一131,P450a表达下调,从基因水平解释莪术具 有抗肝损伤作用,但对于CC1所致大鼠急性肝损伤的保护作 用暂无报道.本文研究了莪术对CC1造成的大鼠急性肝损伤的 保护作用,以探讨其作用机制,为临床应用莪术治疗肝损伤提供 实验数据. 1材料与方法 1.1动物健康Wistar大鼠,体质量(1804-20)g,雌雄随机. 佳木斯大学动物实验中心提供. 2.2莪术对大鼠肝组织考马斯亮蓝蛋白含量,超氧化物歧化酶 (SOD)活性,丙二醛(MDA)含量的影响模型组与正常组比较, 肝组织匀浆考马斯亮蓝蛋白含量,SOD明显降低,MDA水平明显 升高;与模型组比较,联苯双酯组和莪术药材组SOD升高与MDA 水平降低,有显着差异(P<0.01).实验结果表明,药物莪术药 材组能对肝脏产生保护作用,减轻四氯化碳对大鼠肝脏的损伤; 可以降低肝组织蛋白含量,抑制脂质过氧化反应MDA水平,提高 抗过氧化酶SOD活性的功能.结果见表2. 由表2莪术药材对垦墅堡堡里鱼墅兰 1.2材料与仪器莪术购自哈尔滨市世一堂药材公司,药典标 注人体用药量为6—9g,按大鼠体表面积计算:945mg生药量/ .将过筛后的莪术粉末用0.9%NacL配置成6.3mg/ml莪术 混悬溶液.联苯双酯滴丸(BPD):浙江万邦药业限公司,批号 090509.ALT测定试剂盒,批号20091106;AST测定试剂盒,批号 20091115;SOD测定试剂盒,批号20091107;MDA测定试剂盒,批 号20091118;考马斯亮蓝测定试剂盒,批号20091109,均购自南 京建成生物工程研究所. 1.3仪器BT815A型半自动生化分析仪(上海三科仪器有限公 司);723可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);80—2B离 心机(湖南星科科学仪器有限公司);HH一2电子恒温水浴锅(苏 州威尔实验用品有限公司);FA20004电子分析天平(上海恒平 科学仪器有限公司). 1.4动物分组与处理大鼠40只,称重,随机分为4组,即正常 对照组,联苯双酯组,模型对照组和莪术给药组,每组10只.正 常对照组和模型对照组每日灌胃15ml/kg生理盐水;联苯双酯 组,根据成人用量以K折算系数法换算确定灌胃15ml/kg的 联苯双酯溶液,质量浓度为13mg/ml,给药剂量为200me,/kg;莪 术给药组,按15ml/kg莪术溶液灌胃,1次/d,连续7d.末次给 药后,除正常对照组外,其余均按2ml/kg腹腔注射CC1原液1 次,建立急性肝损伤模型,给药量由实验确定,为文献报道的2 倍.禁食24h后,称体质量,乙醚麻醉大鼠,腹腔肝门静脉取血, 3500r/min离心10min分离血清,待测;取肝组织作病理学指标 检测. 1.5数据处理方法数据处理源程序采用MATLAB7.0.1编写. 实验数据均采用面?s表示,组间比较采用t检验,各组间数据比 较采用方差分析,P<0.05有显着性差异. 2结果 2.1对CC14肝损伤大鼠血清ALT和AST活性的影响正常对 照组血清ALT,AST水平明显低于模型对照组(P<0.O1),说明 肝损伤模型造模成功.与模型组比较,联苯双酯组与莪术药材组 A,AST水平均显着降低(P<0.01),与正常对照组比较,联苯 双酯组与莪术药材组A,AST水平无显着性改变(P>0.05), 联苯双酯组与莪术药材组AIJT,AST水平无显着性差异,且在 AST水平上莪术给药组低于联苯双酯组.实验结果表明,莪术有 降低肝损伤大鼠血清酶AIJT,AST水平的作用,对GEl肝损伤大 鼠肝脏有保护作用;实验中此剂量莪术保护肝损伤的效果强于联 苯双酯.结果见表1. 表1莪术药材对CC1肝损伤大鼠血清ALT和AST活性的比较(?s) U?mgprot 与正常组比较,P<0.O1;与模型组比较,P<0.01;n=10 与正常组比较,P<0O1;与模型组比较,’P<0.01;n=10 2.3动物肝组织病理学检查镜下可见:正常组大鼠的肝小叶结 构完整,肝细胞索结构清晰可辨,核膜清晰,核大而圆;模型组动 物肝细胞大片坏死,肝组织充血,肝细胞坏死,肝小叶结构被破 坏,炎症细胞浸润较明显.莪术药材组大鼠的肝组织损伤明显减 轻,肝小叶结构较清晰,肝组织轻微变性,肝细胞有再生现象.联 苯双酯组大鼠肝损伤基本恢复,肝小叶病变不明显,结构清晰,肝 细胞再生明显. 3结论 CC1所致肝细胞损伤的主要机制是CC1在体内的活性代谢 作用和直接的膜溶解作用.CC1进入体内后,在肝细胞内质网 中经细胞色素P450~依赖性混合功能氧化酶的代谢,生成活泼 的三氯甲基自由基和氯自由基.这些自由基可与细胞内和细胞 膜的大分子共价结合,使酶的功能丧失,细胞膜脂质过氧化,胞浆 ca浓度升高,导致肝细胞损伤.在活体动物上应用CC1复制 急性肝损伤模型是一个经典方法’.中医理论认为莪术归肝, 脾经,具行气破血,消积止痛的功效,其主要成分具有较强的生理 活性,可作用于HSCT6细胞,使基因P450c~表达下调.研究结果 表明:中药莪术明显地降低大鼠血清AST和ALT,稳定肝细胞 膜,促进实验性急性肝损伤大鼠血清ALT,AST恢复的作用;具有 清除自由基,抑制脂质过氧化,提升肝组织中蛋白含量,抑制肝组 织MDA的升高,阻止SOD的损耗,提高SOD活性,与避免肝细胞 的损害呈明显的量效关系,可作为护肝药物.本研究为莪术临床 用药提供了实验依据. 参考文献: [1]国家药典委员会.中国药典,I部[s].北京:化学工业出版社, 2005:230. [2]李国栋,许付,沈爱军.莪术油的研究进展[J].中国药学杂志, 2002,37(11):80. [3]聂广,江远,李泽松,等.4种莪术有效成分对肝星状细胞T6基 因表达的影响[J].中国中西医结合急救杂志,2005,12(3):135. [4]陈斌,孙克伟,谢凤英,等.莪术治疗慢性肝损伤时的肝毒性作用 研究[J].中西医结合肝病杂志,2003,13(1):20. [5]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000: 726—727. [6]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学,第3版[M].北京:人民 卫生出版社,2001:1346. [7]NagoevBS.LPOandfree—radicaloxiationparametersinpatientswith acuteviralhepatitis[J].BullExpBiolMed,2002,134(6):557. [8j刘建文,药理实验方法学一新技术与新方法,第2版[M].北京:化 学工业出版社,2008:206. ? 2461?
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