临床病例分析-猪副嗜血杆菌

null猪副嗜血杆菌病猪副嗜血杆菌病乔静巧 201130312005null 副猪嗜血杆菌病又称猪格拉瑟氏病（Glasser's disease）是由副猪嗜血杆菌引起的一种以纤维素性浆膜炎、多发性关节炎、胸膜炎和脑膜炎为特征的猪呼吸道传染病，严重危害各年龄段的猪群，病死率较高。 该病于1910年由德国学者Glasser首先报道， 现已在全球范围内广泛分布，成为影响养猪业发展的主要细菌病之一，给养猪业造成了巨大的损失。主要内容主要内容病原 流行病学 致病机理 临床症状 诊断方法 药敏试验与耐药性 综合防控措施病原病原巴氏杆菌科嗜血杆菌属，革兰氏阴性短小杆菌。 菌落形态：小而透明，在血液培养基上无溶血现象。 形态：多形态，球状，丝状。通常可见荚膜。null副猪嗜血杆菌接种于鲜血平板，与金黄色葡萄球菌同时培养, 在该菌两侧生长良好。 生长特性： 需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD或V因子) 不需要X因子(血红素或其它卟啉类物质) 血液培养基\巧克力培养基\葡萄球菌菌台猪副嗜血杆菌血清型：猪副嗜血杆菌血清型： 副猪嗜血杆菌有很多血清型，其中 4 和 5 流行最广（但也有不能分型的菌株15.2~41%），基因型11个（A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K）。流行的菌株血清型我国猪副嗜血杆不同血清型的频率分布菌血清型：我国猪副嗜血杆不同血清型的频率分布菌血清型：null不同血清型的毒力有所差异：高毒力：引起急性死亡 血清型1，5，10，12，13，14 中等毒力：浆膜炎和关节炎 血清型2，4，8，15 低毒力：不引起临床症状 血清型：3，6，7，9，11流行病学流行病学1.易感动物： 只能感染猪，HPS可以侵袭2周龄到4周龄的猪，主要是在断奶前后和保育阶段发病，HPS可以使新生仔猪（未获得免疫）迅速致死。 感染HPS后，可引起猪的高发病率和高死亡率，在5~8周龄的猪发病率一般可以达到40%，严重时可以达到50%，而且可以影响到猪的各个生产阶段。 null2. 传播途径： 猪副嗜血杆菌病主要寄生在鼻腔等上呼吸道内，能从健康动物的鼻腔、鼻分泌物、器官和扁桃体中分离到，属于条件性致病菌，当饲养不当或环境改变时，可以诱发。 患猪或带菌猪主要通过空气、直接接触感染其他健康猪，其他传播途径如消化道等也可以感染。患猪和带菌猪是本病的主要传染源。null3. 在我国的流行情况：我国已从北京、黑龙江、辽宁、河南、河北、湖南、湖北、山东、上海、福建、广东、宁夏等省市分离出副猪嗜血杆菌。采用该间接血凝检测方法从2005年3月到2005年12月对全国七个省份共血清1665份的抽检结果阳性784份，阴性881份，阳性率47.1%。null据报道，该病容易与其他的病发生混合感染。 Li J X等对从2003年到2006年462例病例进行分析，结果明与猪繁殖与呼吸综合征病毒，圆环病毒2型共同感染的比例分别为19.2％(89)、3.0％(14)。 在2006年我国爆发的“高热症”中，副猪嗜血杆菌在细菌分离率中列第3位，在该病的继发感染中起到了重要作用。 但现在仍无法在活体中证明这两者之间的关系。致病机理致病机理猪副嗜血杆菌有毒菌株鼻内接种剖腹产未吃初奶仔猪鼻窦和气管內分离本菌接种12h后血液培养物中可分离出该菌接种30h后接种36h-108h后全身组织中可分离出该菌vahle等报道（1955年）化脓性鼻炎、病灶处纤毛丢失以及 鼻粘膜和气管粘膜的细胞急性膨胀菌血症十分明显，肝、肾和脑膜上的瘀斑和瘀点构成了;血浆中可检测到高水平的内毒素，许多器官出现纤维蛋白血栓。多种浆膜表面复制产生了典型的纤维蛋白化脓性多浆膜炎、多关节炎和脑膜炎。null致病机理的研究进展： OlveraA等研究表明，在HPS感染寄主的过程中，为逃避巨噬细胞等的作用，一些细胞成分，比如蛋白质类似因子起着十分重要的作用，另外，HPS可能合成具有抑制寄主微管合成的因子。 Pina S等分析了HPS在吸附到寄主组织中的关键基因VtaA(virulence-associated trimeric autotransporters)的组成、结构、功能，以及起源等，认为VtaA基因在HPS的感染过程中起着重要作用。nullHPS加膜多糖（cps）抗原菌体结构抗原多糖磷壁酸外膜蛋白(OMP)脂多糖(LPS)细菌荚膜具有型特异性与细菌毒力相关nullOgikubo Y等发现脂多糖（LPS）可能导致寄主免疫组织的淋巴细胞凋亡，破坏寄主的免疫反应。Ruiz A等从健康仔猪和患病猪分离到OMP存在不同，具特征临床症状的猪分离的HPS中外膜蛋白(OMP)基本相同，说明毒力和细菌特定蛋白质之间存在联系。nullRuiz A等副猪嗜血杆菌外膜蛋白的基因型、表型与菌株分离部位之间的关系： 多发性关节炎病猪全身各部位； 健康猪呼吸道分离株的异源性较高； 肺炎病猪呼吸道的分离株比健康猪呼吸道分离株的异源性更高。Xie Q等研究显示，在离子缺陷的情况下，副 猪嗜血杆菌的基因调控会发生变化。在细胞表面蛋白、DNA代谢蛋白、能量代谢蛋白、糖代谢、氨基酸和DNA合成蛋白，转运和结合蛋白这6种蛋白的表达过程中发生了表达明显增高的情况。临床症状临床症状急性型：首先发生于膘情良好的猪，表现为发热、 食欲减退、精神沉郁、呼吸困难、耳稍发紫、腕 跗关节肿大，共济失调，临死前侧卧或呈划水样。 急性型后遗症：母猪流产、公猪跛行、仔猪和育肥猪可遗留呼吸道症状和神经症状。 慢性型：多见于保育猪，主要表现为食欲下降、 咳嗽、呼吸困难、被毛粗乱、四肢无力或跛行。null病猪食欲下降，消瘦， 大小差异明显null精神沉郁、被毛粗乱nullnull腕跗关节肿大，跛行null呼吸困难，末梢循环障碍 耳尖多发蓝紫色null四肢无力，共济失调， 临死前侧卧或呈划水样null病理变化：胸腔内有大量的淡红色液体及纤维素性，渗出物并与胸壁粘连。 肺表面覆盖有大量纤维素性渗出物，多为间质性肺炎，部分有对称性肉样变，肺水肿。 腹腔积液或内脏气管粘连。 典型变化：纤维素性浆膜炎、多发性关节炎、 胸膜炎和脑膜炎null心包炎，心包积液，心包内常有干酪样甚至豆腐渣样渗出物，室外膜与心脏粘连在一起，形成“绒毛心”。心肌有出血点。 全身淋巴结肿大呈暗红色，切面呈大理石花纹。 脾脏肿大，有出血性梗死关节肿大，关节腔内有浆液性渗出性炎症。null多发性浆膜炎null胸膜炎：有淡黄色纤维素性渗出物，胸膜增厚，与胸壁粘连。null心包积液：心包中有大量棕黄色液体null绒毛心，心包积液null间质性肺炎null淋巴结肿大,切面呈大理石样变null脑膜炎：脑膜充血出血null关节炎：关节肿胀、有大量纤维素样渗出物nullnullnullnull诊断方法诊断方法初步诊断 微生物学诊断 血清学诊断 分子生物学诊断 null初步诊断：根据流行病学调查，临床症状，作出初步诊断。流行情况：只在猪发生，各年龄段都有发病。 呼吸道典型症状。 临床剖检：纤维素性浆膜炎、多发性关节炎、 胸膜炎和脑膜炎等。null微生物学诊断：细菌学检查：取病猪的费、心血、肝、肾、淋巴结涂片革兰氏染色镜检。 分离培养：将所取病料接种于琼脂平皿和肉汤中置37度温箱内培养24 h 后观察。涂片染色。 培养特性实验：将心血、肺、肝中分离的病菌接种于巧克力琼脂平皿，经纯化增菌培养后，看是否有溶血现象，卫星现象。null生化特性：null血清学诊断：主要用于菌落筛选和流行病学研究。补体凝集试验（CF） 单抗技术间接ELISA（主要用于HPS抗体检测） 缺点：不能进行血清型的分类。间接血凝 特点：可以检测血清型，比协同凝集反应更 敏感、更特异。 null分子生物学诊断：PCR方法检验基因序列。 特点：可以避免血清学实验中常见的交叉反映和 自身凝集引起的不可分型问题。核苷酸特定捕获杂交(OS—CPH） 原位杂交（地高辛标记的探针）16s-/tbp PCR：只检测副猪嗜血杆菌耐药性与药敏试验耐药性与药敏试验 猪副嗜血杆菌可能是当前猪场所有致病菌中 耐药性产生速度最快的一种细菌。一种敏感的抗生素，使用半年后就开始耐药，一年后完全失效。 耐药性：耐药性产生的机理： 耐药质粒（四环素耐药质粒）的存在，耐药性的诱导。 是否与长期低剂量的使用抗生素有关？ 生物被膜的形成有关？敏感菌株占检测菌株的百分比敏感菌株占检测菌株的百分比不同省份2007年HPS分离株的药物敏感性：敏感菌株占检测菌株的百分比敏感菌株占检测菌株的百分比null一般敏感： ++ 链霉素敏感： +++ 红霉素、庆大霉素、四环素非常敏感： +++++ 阿奇霉素、头孢噻肟不敏感： + 环丙沙星较敏感： ++++ 氯霉素、阿莫西林、左氟沙星 猪副嗜血杆菌对抗生素的敏感性： 一般敏感： ++ 链霉素 综合防控措施综合防控措施免疫预防措施：血清特异性的灭活疫苗：世界上大多数国家采用的策略 弱毒疫苗：AroA基因缺失的菌株 自然感染：3日龄之内感染5型菌株：在母源抗体水平与 接种菌量之间的平衡华中农业大学从1999年根据该病的流行病学和临床，结合动物试验筛选出两种优势血清型的菌株（4型和5型），研制出副猪嗜血杆菌病灭活疫苗。 null母猪接种后可对4周龄以内的仔猪产生保护性免疫力，而在这个阶段再用含有同一血清型的灭活疫苗激发仔猪的免疫力，可以对断奶后的仔猪产生保护力。副猪嗜血杆菌病的免疫程序：初产母猪：首免:产前8－9周； 二免:产前 4～5周。 经产母猪：产前4～5周。 仔 猪： 首免:14日龄； 二免:35日龄null母源抗体不干扰对哺乳仔猪的免疫效果null药物预防措施：对副猪嗜血杆菌有效的药物：很多易产生耐药性 阿莫西林、氟喹诺酮类、先锋类、氟甲砜霉素 在发病前用药如： 断奶后连续添加支原净100 ppm + 先锋4号100 ppm 或枝原净100 ppm + 氟甲砜霉素 80 ppm 或枝原净100 ppm + 环丙沙星 250 ppm ppm(百万分之)null饲养管理措施：强化营养，解除免疫抑制，提高猪只自身免疫力和抵抗力。加强饲养管理，减少应激。 保持合理的饲养密度，处理好通 风与保温。保持较好的空气质量， 注意天气变化，减少热应激防重于治，养防相结合null注意环境卫生和日常消毒， 建立猪场生物安全体系。定科学而符合猪场实际的免 疫。猪群发生副猪嗜血杆菌病时 应及时做好处理工作。null 将猪舍内的痢猪挑选到隔离舍，对僵猪或严重病 猪采取淘汰的方式。 2. 加强保暖工作，改善猪舍通风条件。 3. 适当的饲养密度，严禁或减少混养，实行全进全出。 4. 将猪舍冲洗干净，严格彻底消毒。 5. 采取敏感药物如头孢类、氟苯尼考等拌料或饮水给 药群防群治猪群发生副猪嗜血杆菌病时应及时做好处理工作。请大家批评指正，谢谢！请大家批评指正，谢谢！