HPLC法测定芍芪双苷软胶囊中芍药苷的含量

2003年 7月第 10卷第 7期 中国中医药信息杂志 ·37· HPLC法测定芍芪双苷软胶囊中芍药苷的含量 桂双英 (安徽中医学院 合肥 230038) [提 要] 目的：建立芍芪双苷软胶囊中芍药苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法(HPLC)，VP—ODS 柱：流动相：甲醇一0．5mo1／L磷酸二氢钾 (40：65)；检测波长：2 30nm。结果：芍药苷在 0、14～0．70 g呈良好 线性关系，r=O．9999，平均回收率 97．72％，RSD=i．67％(n=9)。结论：本法简便、准确、灵敏度高、重复性好，可 用于该制剂的含量测定。 [关键词] 芍芪双苷软胶囊 芍药苷 HPLC 大孔吸附树脂 Dc~rminafion of Paeoniflorin in Shaoqishuanggan Soft Capsul~ by 日PLC Gui Shuangying rAnhui University of TCM,Hefei 230038) Abstract Objective：To estabhsh a method of HPLC determination of Paeoniflorin in Shaoqi- shuanggan Soft Capsules．Metlxxl：HPLC analysis was carried out on VP-ODS coktrrna and in methanol一 0．5mol／L Lpotassium dihydrogen phosphate (40 ：65)as the mobile phase．The detection wave length was 230nm ．Re． It： The meth od was linear at th e range of 0．14～ 0．70 g,r=0．9999，and the average recovery was 97．72％，RSD was 1．67％ (n=9)．Concl~ m：The method is simple， accurate， higrdy sensitive an d reproducible． It m ay be used for th e quantitative determination of Paeoniflorin in Shaoqishuan ggan Soft Capsul es． Keywords Shaoqishuanggan SoftCapsul es：Paeoniflorin；HPLC；Macroporous resin 芍芪双苷软胶囊是由赤芍和黄芪的有效成分赤芍总苷和 2．i 色谱条件[2 黄芪总皂苷制备而成，具有益气活血之功效，临床可用于预防 色谱柱：VP—ODS 150mm×4．6mm(日本 岛津)；流动相： 和治疗冠心病、脑溢血后遗症等。为了控制该产品的质量， 甲醇一0．5mol／L磷酸二氢钾 (40：65)；检测波长：23Onto； 保证临床用药效果，笔者采用 D 大孔吸附树脂分离两个有 流速：0．80mL／min。 效部位，并参照文献[t]方法测定其有效成分芍药苷的含量， 2．2 供试液的制备 为芍芪双苷软胶囊的质量控制提供有效的测定方法。 对照品溶液的制备：精密称取减压干燥 (6O℃)至恒重的 1 实验材料 芍药苷 5．4mg，加甲醇溶解并定容至 lOmL，精密移取 1mL，用 仪器：HPLC系统 由LC-10A泵(日本)、7125型进样阀(美 赤芍流动相稀释至 25mL，得每 lmL含 0．0216mg芍药苷 的对 国)、SCL一10A控制器(日本)、浙江大学 N2000色谱工作站 (浙 照品溶液。 江大学)及 SPD—IOAV检测器 (日本)等组成。20 L微量进样 供试品溶液的制备：取芍芪双苷软胶囊物约 0．5g， 器为上海科艺学仪器厂产品。 精密称定，加适量水稀释，上已处理好的 D 大孔吸附树脂柱 试药：芍药苷对照品由中国药品生物制品检定所提供； (内径 l_5cm，填充高度 lOcm)。先用 3Oral水洗脱，弃去水洗 甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。D 型大孔吸附树脂 脱液，再用 lOOmL 20％乙醇洗脱，收集 20％乙醇洗脱部分，水浴 为天津农药厂产品。 蒸干，残渣加 甲醇溶解并定容至 25OraL，精密移取 lmL，用赤芍 2 实验方法与结果 流动相稀释至 25mL，得供试品溶液。 表 1 回收率试验结果 实验结果表明，采用分光光度法直接测定本 品中灵芝多 糖的含量，方法简便快捷，准确度高，精密度好，可做为本制剂 的质控方法。 由于使用的溶剂是浓硫酸，在比色测定时，注意将比色皿 壁上的硫酸擦尽，比色管用完后应洗净烘干再用。整个实验过 程应规范，否则会影响实验结果。 (收稿 日期：2002-10-I4) 维普资讯 http://www.cqvip.com · 38· 中国中医药信息杂志 2003年 7月第10卷第 7期 阴性对照溶液的制备：取除赤芍的阴性对照软胶囊 内容 物 0．5g，精密称定，依照供试品溶液制备方法制备阴性对照 溶液。 }’ 妻 ； ； ^ 按照上述色谱条件测定，分别进样 20 L，结果表明芍药 苷与其它组分能达到很好的分离，阴性对照溶液 中的组分不 干扰芍药苷的测定 (见图 1)。 l I I 5 ； J ． l 图 1 芍芪双苷软胶囊的 HPLC图 注：A．芍药苷对照品；B．供试品；C．阴性对照品；1 ． 芍药苷 2．3 线性关系的考察 精密移取芍药苷对照 品溶液 1、2、3、4、5mL ，分别加 流动相稀释至 lOmL。分别进样 2O L。以峰面积为纵坐标、 芍 药 苷 量 为 横 坐 标 绘 制 标 准 曲 线 ，得 回 归 方 程 ： Y=3869310．114X-8052．7，r=O ． 9999。表明芍药苷在 0．14～ 0．701．i g范围内呈良好的线性关系。 2．4 精密度试验 取同一份供试品溶液 (批号 020311)重复进样 5次，测得 峰面积 RSD为 0．46％。 2．5 稳定性试验 取芍药苷对照品溶液及供试品溶液，在 6h内每隔 2h进 样测定 1次，测得对照品与供试品中芍药苷的峰面积 RSD分 别为 0．49％和 0．93％。 2．6 重复性试验 取批号为 020311的同一批样品 6份，按供试品溶液制备 方法制备样品溶液，并按样 品测定方法，测得峰面积 RSD为 1．01％。 2．7 回收率试验 精密称取已知芍药苷含量的样品内容物，加入芍药苷对 照品适量 (3种不同水平，各 3／9)，依法制备供试品溶液 ， 分 别进样2OlI L，测定峰面积，计算回收率，结果见表 1。 2．8 样品测定 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20 L，按上述色 谱条件进行测定。3批样品中芍药苷的含量测定结果详见表 2 3 ■ 表 1 回收率实验测定结果 芍芪双苷软胶囊内容物用流动相稀释直接液相色谱测定 ， 杂质峰较多，分离差。通过上 D 。 大孔吸附树脂柱 ， 使样品纯 化，克服了分离度差的问题。本法简便、准确、灵敏度高、 重复性好，可用于该制剂的含量测定。 参 考 文 献 1 卫生部药典委员会．中华人 民共和国药典 (一部)． 北京： 化学工业出版社，2000．125 2 姜换荣，裴旭红，胡海伟．大孔吸附树脂用于赤芍总苷分离 方法的探索．中成药，1999，21(12)：644 (收稿 日期：2002—12—05) 新叠颗粒等入选抗 SARS中药 由中国中医研究院牵头的 “十五”、“863，’重大项 目的分课题 《治疗SARS中药筛选研究》，在 17天内 ，建立 了 9种筛选模型，经过 85次筛选了 118种药物。第一批入选的 30种中药已出结果，证明新雪颗粒、川芎嗪注射液、血塞 通、灯盏花素、清开灵等中药在对抗内毒素、消除肺炎、抗 肺纤维化、改善呼吸窘迫等方面有效，为临床用药提供 了依 据。 (本刊通讯员) l ；l I l一嘲 维普资讯 http://www.cqvip.com