三种促超排卵方案体外受精- 胚胎移植

·论著· 三种促超排卵体外受精 - 胚胎移植 临床妊娠率的 3 张慧琴 ,邓晓惠 ,于红玲 ,闫 　　 ,孔北华 ,江 　森 ,杜丽娟 ,洪凡真Ξ (山东大学齐鲁医院妇产科 ,济南 　250012) 【摘要】　目的 :分析 3 种促超排卵方案 (tropic hyperovulation programme ,THOP) 体外受 精 - 胚胎移植 ( IVF - ET)的临床妊娠率。方法 :不孕症 136 例分为 3 组 :1 组 51 例 ,应用高 纯促卵泡成熟激素 (HP - FSH ,商品名 Metrodine - HP) ,递减给药促超排卵 ,应用促性腺激 素释放激素兴奋剂 ( GnRH - a ,商品名 Buserelin)长方案降调节 ,从月经第 3 天开始递减 HP - FSH。2 组 50 例 ,HP - FSH和人绝经期促性腺激素 (hMG) 联合递减给药的促超排卵长 方案降调节。3 组 35 例 ,hMG递增给药促超排卵。分析 3 种 THOP 的平均取卵数、受精后 卵裂数、移植数、临床妊娠数及 IVF - ET移植周期的临床妊娠率。结果 : (1) 1 组 ,平均取 卵数 10. 13 ±4. 49 ,卵 受 精 数 7. 83 ±4. 13 ,受精率 77. 29 % ,卵裂数 7. 62 ±4. 19 ,移植数 3. 88 ±1. 17 及临床妊娠数 18 ,临床妊娠率 35. 29 % ; (2) 2 组 ,平均取卵数 9. 16 ±5. 49 ,卵受 精数 6. 84 ±4. 23 ,受精率 74. 67 % ,卵裂数 6. 5 ±4. 22 ,移植数 3. 68 ±0. 99 及临床妊娠数 15 ,临床妊娠率 30. 0 % ; (3) 3 组 ,平均取卵数 11. 31 ±7. 64 ,卵 受 精 数 7. 89 ±5. 36 ,受 精率 69. 82 % ,卵裂数 7. 75 ±5. 94 ,移植数 3. 68 ±1. 08 及临床妊娠数 15 ,临 床 妊 娠 率 42. 86 %。1 组与 2 组用药安瓿比较 ,差异有高度显著性 ( P < 0. 001) ,2 组与 3 组比较 ,差 异亦有高度显著性 ( P < 0. 001) 。3 组 IVF - ET 临床妊娠率无统计学差异。结论 :3 组促 超排卵用药方案 IVF - ET的临床妊娠率差异无显著性。国产 hMG可用于 IVF - ET的超 促排卵方案。多囊卵巢综合征 ( PCOS) 患者采用 IVF - ET ,可减少卵巢过度刺激综合征 (OHSS)的发生 ,明显提高妊娠率。 【关键词】　体外受精 ,胚胎移植 ;促超排卵 ;妊娠率 中图分类号 :R321. 3 　文献标识码 :A 　文章编号 :1004 - 7379 (2001) 04 - 0288 - 03 Analysis of the clinical pregnancy rate of in vitro fertilization and embryo transfer with three tropic hyperovulation programmes. Zhang Huiqin , Deng Xiaohui , Yu Hongling , et al . Depart2 ment of Obstetrics and Gynecology , Qilu Hospital , Shandong University , Jinan ,250012 【Abstract】Objective :To determine on the clinical pregnancy rate of in vitro fertilization and embryo transfer ( IVF - ET) with three tropic hyperovulation programmes ( THOP) . Methods :136 cases with sterility were performed with three THOP for IVF - ET and divided into 3 groups : Group 1 ( n = 51) ,high - purified follicle - stimulating hormone ( HP - FSH ,goods name :Metrodine) de2 creased progressively for tropic hyperovulation and GnRH - a (goods name :Buserelin) was used for long programme and down regulation. HP - FSH was decreased progressively from the 3rd day of menstruation. Group 2( n = 50) ,HP - FSH + hMG were combined to decrease progressively for long programme and down regulation for tropic hyperovulation. Group 3( n = 35) ,hMG was used to in2 crease progressively for tropic hyperovulation. The three programmes of tropic hyper ovulation were 882 现代妇产科进展 2001 年 7 月第 10 卷第 4 期 　Prog Obstet Gynecol ,Jul. 2001 ,Vol. 10 ,No. 4 Ξ 国家教育部归国人员科研基金资助项目 ( EJ980131) analysed for the average number of ova obtained ,fertilized cleavage of oocytes , implantation , and number of clinical pregnancy ,clinical pregnancy rates in IVF - ET cycles. Results :Group 1 ,average number of ova obtained was 10. 13 ±4. 49 ,number of fertilized ova 7. 83 ±4. 13 ,rate of fertilization 69. 82 % ,number of cleavage 7. 75 ±5. 94 ,number of transferred embryos 3. 68 ±1. 08 ,and number of cleavage 7. 62 ±4. 19 ,number of transferred embryos 3. 88 ±1. 17 ,and number of clinical preg2 nancy 18 ,clinicalpregnancy rate 3 5 . 2 9 % . Group 2 , average numberof ova obtained was 9 . 1 6 ± 5. 49 ,number of fertilized ova 6. 84 ±4. 23 ,rate of fertilization 74. 67 % ,number of cleavage 6. 5 ± 4. 22 ,number of transferred embryos 3. 68 ±0. 99 ,and clinical pregancy 15 ,clinical pregnancy rate 30. 0 %. Group 3 ,average number of ova obtained was 11. 3 ±7. 64 ,number of fertilized ova 7. 89 ± 5. 36 , rate of fertilization , 7 7 . 2 9 % , number of clinical pregnancy 1 5 , clinical pregnancy rate 42. 86 % ,drug used in group 1 and group 2 ,there was signifiant difference in drug used in group 1 and group 2 ( P < 0. 01) ,in group 2 vs group 3 ,there was significant difference too. In the three groups of clinical pregnancy rates of IVF - ET ,there were no statistical difference among dinical pregnancy rates of IVF - ET of the three groups. Conclusions :Clinical pregnancy rate for IVF - ET is high and no difference was found in all three groups. hMG is used for tropic hyperovulation for IVF - ET reveals significantly deceased OHSS and high pregnancy rate in 26 patients with polycystic ovary syndrome (PCOS) . 【Key words】　Fertilization in vitro ; Embryo transfer ;Tropic hyperovulation ;Pregnancy rate 　　我们在 IVF - ET周期中随机采用了 3 种促超排 卵方案 ,为了解 3 种促超排卵方案的临床妊娠率 ,回 顾分析了我院 136 个 IVF - ET移植周期的情况 ,报 告如下。 1 　资料与方法 1. 1 　临床资料 　1999 年 8 月至 2000 年 11 月在山东大学齐 鲁医院生殖中心进行 IVF - ET 136 个胚胎移植周期 ,其中原 发不孕症 69 例、继发不孕症 67 例。IVF - ET指征为双侧输 卵管梗阻 85 例、多囊卵巢综合征 ( PCOS) 26 例、子宫内膜异 位症 ( EMs) 8 例、原因不明不孕者宫腔内人工授精失败 16 例、席汉氏综合征 1 例。患者平均 30. 76 ±3. 86 岁。临床妊 娠的定义按欧洲人类生殖及胚胎学会 ( ESHRE) 规定 ,即 血 hCG升高与 B 超检查示有妊娠囊 ,胚胎及原始胎心搏动。 1. 2 　3 组促排卵方案 1. 2. 1 　(1) 1 组 51 例 :应用高纯促卵泡成熟激素 (FSH - HP , 商品名 Metrodine - HP ,瑞士 Serono 产品) 递减给药促超排 卵 2 ,于前一周期月经第 21 天开始应用 Buserelin 降调节长 方案 ,在月经的第 3 天开始应用 FSH - HP ,用药第 1～3 天 300IU/ d(上午 2amp ;下午 2amp) ,第 4～6 天减量为 225IU/ d (上午 2amp ;下午 1amp) ,第 7～10 天减量为 150IU/ d (上午 1amp ;下午 1amp) ,于用药第 6、8、10、12 天测定血清雌二醇 (E2)和经阴道超声监测卵泡 ,于用药第 10 天开始测定尿中 黄体生成激素 (LH) ,每 12h 查一次。当血清 E2 持续升高 ,优 势卵泡的最大直径 ≥18～20mm 时 ,停用 FSH - HP 和 GnRH - a ,当晚 21 时注射人绒毛膜促性腺激素 (hCG,商品名 : Pro2 fasi ,瑞士 Serono 产品) 6 000IU 诱导卵泡最后成熟 ,并在 35～ 36h 后取卵。如卵泡反应差 ,增长缓慢 ,可延长用药时间 ,最 长应用 FSH - HP 13d ,或增加用药量 (于第 8、9、10 天增加 FSH - HP 75IU/ d) ; (2) 2 组 50 例 :应用 FSH - HP和 hMG(丽珠 集团产)联合递减给药 ,促超排卵。同时应用 GnRH - a 降调 节长方案。递减给药方法 :上午与 1 组 FSH - HP 用量相同 , 只是下午 FSH - HP均改为 hMG 75IU。监测卵泡成熟方法与 给予 hCG时间同 1 组 ; (3) 3 组 35 例 :hMG促超排卵递加给药 短方案。应用 hMG 促超排卵 ,于月经的第 3 天开始应用 hMG 150IU/ d ,第 6 天根据血清 E2 浓度和卵泡大小调整用药 量 ,如血清 E2 持续升高和卵泡增大 ,继续应用 hMG 150IU/ d , 如卵泡增长缓慢 ,增加 hMG 75IU/ d 或 FSH - HP 75IU/ d。监 测卵泡成熟方法与给予 hCG时间同第 1 组。6 例 PCOS患者 血睾酮值高 ,于促超排卵前 1 个月 (5 例) 或 2 个月 (1 例) 应 用口服避孕药 Ⅱ号 ,1 例席汉综合征患者应用戊酸雌二醇 (Progynova ,Schering产)和黄体酮 1～2 个月的人工月经周期 , 同时应用中药女金丹和四物合剂调整月经 2 个周期。3 组 1 例发生过早 LH峰 ,注射 hCG 24h 后 ,取卵 6 个 ,2 个卵受精 , 但未妊娠。 1. 2. 2 　处理精液方法 　采用 mHTF(美国 Santa Ana 产) ,上游 30～40min 后 ,取上游液加入 HTF45°倾斜置于 CO2 孵箱内第 2 次上游备用 ,取卵 4～6h 时 ,以 10 万条精子/ 滴 ,进行体外 受精 ,置 5 % CO2 、37 ℃孵箱内培养。于受精后 16～20h ,在显 微镜下观察受精结果。受精卵移入 P1 培养液中 ,培养 54～ 56h ,选择 Ⅰ级和 Ⅱ级胚胎 3～4 个进行 ET。ET时手法轻柔 , 避免钳夹宫颈与放置时出血。 1. 2. 3 　黄体期支持 　于取卵日下午开始肌肉注射黄体酮 , 50mg/ d ,于 ET后第 1、4、7、10 天各注射 hCG 1000IU/ d。PCOS 患者注射 1 次 hCG后 ,如出现腹胀 ,即停止注射 hCG。 1. 3 　统计学处理 　所有数据和指标编码后输入计算机 ,采 用 SPSS - PC - V3. 0 进行单因素χ2 检验和 t 检验。 2 　结 　果 982 现代妇产科进展 2001 年 7 月第 10 卷第 4 期 　Prog Obstet Gynecol ,Jul. 2001 ,Vol. 10 ,No. 4 2. 1 　HP - FSH ,HP - FSH + hMG与 hMG 3 组促超排 卵方案比较 　HP - FSH 组与 hCG 组 , HP - FSH + hMG组与 hMG组年龄差异均无显著性。用药安瓿 数差异均有显著性 ( P < 0. 001) 。见表 1。 表 1 　3 种用药方案患者的年龄、用药安瓿数比较 ( €x ±s) 组别 IVF - ET周期 ( n) 年龄 (岁) 用药安瓿 (amp) HP - FSH 51 29. 76 ±2. 95 29. 94 ±6. 23 HP - FSH + hMG 50 31. 64 ±4. 79 29. 44 ±6. 35 hMG 35 30. 88 ±3. 84 13. 38 ±6. 78 3 3 　　3 3 P < 0. 001 　vs 　HP - FSH ,HP - FSH + hMG 2. 2 　3 种用药方案促超排卵的平均取卵数、受精率、卵裂数、移植数、妊娠数、IVF - ET的临床妊娠率比较 　见表 2。3 组 IVF - ET 临床妊娠率差异无显著性。临床妊娠中单胎 37 例 (其中 1 例只取 1 个卵 ,受精后发育良好 ,56h 移植 1 个 8 细胞胚胎妊娠) ,双胎 8 例 ,三胎 2 例减胎为双胎 (1 例因席汉综合征移植 4 个胚胎 ,35 周双胎早产 ,两女婴健康) ,1例 5 胎减胎为双胎 (因在当地两次 IVF - ET失败 ,移植 5 个胚胎 ,5 胎妊娠减胎后 ,36 周双胎妊娠 ,早产一健康男婴 ,出生体重 1900g ,一婴胎死宫内) 。共有6 例流产 ,流产率为 12. 5 % ,1 例宫外孕。 表 2 　3 组用药方案体外受精胚胎移植临床妊娠率比较 ( €x ±s) 组别 n 取卵数 ( n) 受精率 ( %) 卵裂数 ( n) 移植数 ( n) 临床妊娠数 ( n) 妊娠率 ( %) HP - FSH 51 10. 14 ±4. 50 77. 29 7. 63 ±4. 20 3. 89 ±1. 18 18 35. 29 HP - FSH + hMG 50 9. 16 ±5. 49 74. 67 6. 50 ±4. 22 3. 68 ±0. 99 15 30. 00 hMG 35 11. 31 ±7. 64 69. 82 7. 75 ±5. 94 3. 69 ±1. 08 15 42. 86 2. 3 　OHSS 的发生 　HP - FSH 组 2 例重度 OHSS , HP - FSH + hMG组 3 例重度 OHSS。5 例重度 OHSS 的发生均与卵泡增长缓慢 ,延长用药时间 (2 例应用 13d 促超排卵药)和增加用药量 (3 例于第 8、9、10 天 因卵泡小 ,加用 hMG 75IU/ d) 有关。hMG组 1 例中 度 OHSS。 3 　讨 　论 3. 1 　HP - FSH ,HP - FSH + hMG组采用降调节长方 案 ,递减给药促超排卵的意义 　在促超排卵早期 , FSH在一定阈值水平上 ,可以募集多个卵泡 ,然后应 用低剂量 FSH 维持卵泡成熟 ,明显提高了妊娠率 , 文献报道与本结果一致 3 。3 组用药安瓿数差异有 显著性。hMG组用药的安瓿数少 ,3 组 IVF - ET 临 床妊娠率差异无显著性。 3. 2 　PCOS 患者用 IVF - ET 的优点 　较人工授精 (用促超排卵药后)成功率高。人工授精一次成功率 只有 10 %左右 , PCOS 患者用促超排卵可致多个卵 泡生成 ,人工授精致多胎率高 ,OHSS 的例数大增 , IVF - ET可抽出卵泡液 ,选择约 3 个胚胎移植 ,或在 此周期不移植 ,胚胎冷冻 ,从而减少了多胎率及 OHSS的发生 4 。 参 　考 　文 　献 1 　张丽珠 ,魏志新 ,刘平 ,等. 体外授精胚胎移植中影响临 床妊娠的因素 - 附 559 个周期分析 J . 中华妇产科杂 志 ,1998 ,33 :727 2 　Hugues JN ,Cedrin - Dumerin I ,Avril C ,et al. Sequential step - up and step down dose regimen :An altermative method for ovulation induction with follicle - stimulating hormone in polycystic ovarian syndromeJ . Hum Reprod ,1996 ,11 :2581 3 　Simon C , Garcia Velasco JJ ,Valbuera D ,et al. Increasing u2 terine receptivity by decreasing estradiol levels during the preimplantation period in high responders with the use of a follicle - stimulating hormone step - down regimen J . Fertil Steril ,1998 ,70 :234 5 　Homburg R ,Berkovitz D ,Levy T ,et al. In vitro fertilization and embryo transfer for the treatment of infertility associated with polycystic ovary syndromeJ . Fertil Steril ,1993 ,60 :858 (收稿日期 　2001 - 02 - 26) 第一作者简介 :张慧琴 (1952 - ) ,女 ,山东大学齐鲁医院妇产 科生殖医学中心 ,教授 ,硕士生导师 ,主要研究方向 :生殖医 学。 092 现代妇产科进展 2001 年 7 月第 10 卷第 4 期 　Prog Obstet Gynecol ,Jul. 2001 ,Vol. 10 ,No. 4