饮料中合成色素的测定方法研究

分析检测 饮料中合成色素的测定方法研究 搞 一 主要针 对合成 色素检剥 法 中国家标 准方法未提 到的 内 容 ，根据 自己 年的3-作 经验 ，巷姑 出造台 于忮抖 中告成 色素 的测定分析万法 关■诩 饮 料 音成色素 圳定方 击 中图分类号：TS202 3 文献标 识乇l5： ^ 文 章 蝙 号 ：l002—0306r2002)03一IK]66一O2 测定合 成 色 素 的方 法 很多 ．常 用 的有 纸 层 析法 、 薄 层 层 析 法 梓 层 析 法 、改 变 pH 溶 出 法 以 及 多 种 溶 剂 分 别 抽 提 法 、 电 泳 法 等 国 家 标 准 (；13／ "I"5009．35—— 1996《食 品 中合 成 着色 剂 的测 定方 法》 中 规定 的方 法 勾高 效 液 相 色谱 法 (第 一 法 )，薄 层 色 谱 法 (第 = 法 ) 上 述 测 定 方 法 虽 然 稳 定 性 高 、重 现 性 好 ．但 由于 需用 仪器 (如 高 效 液 相 色谱 仪 、薄层 涂 布 器 、紫外 检测 器 等 )价 格 昂贵 、成 本高 ，在一 些 小 型实 验 室 特 别 是 生 产 企 业 不 易 推 广 和 普 及 。 本 文 介 绍 的 用纸 色谱 法 测 定饮 料 中的 合 成 色素 ，简 便 易操 作 ，重 现 性 好 ，成 本 低 ，适 合 各 种 类 型 的 实 验 室 及 生 产 企 业 操作 ，改善 了上 述方 法的 弊端 1 原理 聚酰 胺 是具 响= 级 l生的化 合 物 ，水 溶 性 的 酸性 合成 色素 在 酸 条 件 下被 聚 酰胺 吸 附 在 碱性 条件 下解 吸附 。由于 聚酰胺 能在很 稀 的溶 液 中吸附 色素 ， 且对 人工 合 成 色素 吸 附牢 固 ，对 天 然色 素 吸 附不 紧 密 ，能 用 甲 醇 一 酸 洗 脱 天 然 色 素 因 此 经 提 取 、浓 缩 、分离 后 与标 准 比较 定性 、定 量 即可测 定 出 饮料 中 的合 成色素 的 含 ：本法 最低 检 出限量 为 500．g。 2 材料与方法 2 1 材料与仪器 实验 方 法 -p所 用 的水 系 指 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 ， 试 剂 均为分 析纯 ； 聚 酰 胺 粉 (尼 龙 6) 60～80 目 ： 甲 醇 一 甲 酸 溶 液 6：4； 乙 醇 一 氨 溶 液 取 hnl氨 水 ，加 乙 醇 (70％ )至 收稿日期 ：2001—12 10 作者筒舟 ：橱 国先(1963一)女 ．师 ．研究方向：食品监督检驻 (贵州省产品质量监督检验所，贵阳550003) 杨国先 100rtd； 乙 醇 50％ ； 柠 檬酸溶 液 200g／L； pH6的水 水加柠檬 酸溶 液(200g／L)调 pH到 6； 合 成 色 素标 准溶 液 准确 称 取按 其 纯 度折 算 为 100％质 量 的柠 檬 黄 、日落 黄 、苋 菜 红 、胭 脂 红 、亮 蓝 、 靛 蓝 各 0．100g，用 pH6的 水溶 解后 穆 人 100ml容量 瓶 中 并 加 pH6 的 水 至 刻 度 。 此 溶 液 每 ml相 当 于 1 0mg合 成 色素 ，靛 蓝 溶液 需在 暗处保 存 ； 合 成 色 素标 准使 用 液 I临用 时吸 取 色 素标 准 溶 液各 5．0ra1．分 别 置于 50ml容量 瓶 中 ，加 pH6的水 稀 释至 刻度 。此溶 液 每 ml相 当于 0．10mg合成色 素 ； 展 开 剂 I 正 丁 醇 一无 水 乙醇 一1％ 氨 水 6：2：3； 展 开 剂 Ⅱ 甲 乙 酮 一丙 酮 一水 7：3：3。 微 量 注 射器 或定 量 毛细吸 管 ，层 析 缸 ，中速 滤 纸 ，真 空 泵 2 2 实验方法 2．2．1 样 品处 理 称 取 50 0g均匀样 品 (汽水需 加 热 除 去 = 氧 化 碳 ， 含 酒 精 的 饮 料 需 加 热 驱 除 乙 醇 )于 】00ml烧 杯 中 ．加 热 至 70℃ ，加 入 0．5～1．0g聚 酰 胺 粉 充 分搅拌 ，用柠檬 酸溶 液 (200g／L】调 pH至 4，使 色素 完全 被 吸 附 (如溶 液还 有 颤 色 ，可再 加 一些 聚酰 胺 粉 充分 搅拌 )。将 吸 附色素 的聚 酰胺 全部转 入 岛 垂 融漏 斗 中抽滤 用柠檬 酸 (200g／L)酸化 至 laH4的 70℃水 反 复洗涤 ，每次 20ml。边 洗边 搅拌 。再用 甲醇一 甲 酸 溶液 (6：4)洗 涤 1～3次 。除 去 天 然 色素 ，每次 20ml。至 洗液 无色 为 止 。再 用 70℃水反 复洗 涤 至 流 出的溶 液 为 中 眭，洗 涤过 程 中必须 充分搅 拌 。然后 用乙醇一 氨 溶液 分 次解 吸全部 色 素 ，收集 全 部解 吸 液 。于水 浴 上 驱 氨 并浓 缩 至 约 2ml后 移 人 5ml容量 瓶 中 ，用乙 醇 (50％ )洗 涤 容 器 ，洗 液 并 人 容 量 瓶 中 并 用 乙 醇 (50％ ) 稀 释 至 刻 度 。 2．2．2 合成 色 素 的测定 2．2 2 1 点 标 准 色 斑 取 色 谱 用 纸 ，在 距 底 边 2em 的 起 始线 上 分 别点 1-2p．1(按 标 准 值 计算 )各 种 色素 标 准溶 液 ，制 成单 一标 准 色斑 。 2 2 2 2 点样 另取一 色谱 用纸 ，在距底 边 2em 的起 始线 上分 别 点 3-1013．1样 品溶液 ，也可 与 标 准色 斑 在 维普资讯 http://www.cqvip.com 分析检测 Vo 1 ．23，No．3，2oO2 孚鳢；产 晶 徽殿囊 缝生泰 管量昀溯霆 (杭州高成生物营养技术有限公司，杭州310012) 冯莉萍 摘 ■ 舟绍 了檄 腔囊型堆 生素音勺相 关背号．主要 研览 了谊娄维 生素的拴剥方 1击 美■订 撮睫 囊 植 测 牲生 音 中图分类号 ：TS20| 2+4 文献标识码 ：B ： I 一0306f2002)03—0067-02 维 生 紊 目前 已成 为 食 品 工 业 中 最 重 要 的 营 养 强 化 剂 之一 由 于维生 素类 产 品性 质 较 为活泼 ，在 不同 收璃 日期 ：2002-0 1—15 怍者简 介：冯莉萍 (1954—1．士．高衄工程师 ．研 充方向；药特帆剂 檄 胶囊技木的研究厦应用 同 一纸 上 进 行 = 2．2．2．3 展 开与 观 察 将 点 有 标 准 色 斑 和 样 品 的滤 纸 挂 于 盛 有 展 开 荆 I或 展 开 剂 Ⅱ的 层 析 缸 中 ，预 饱 和 30rnin，用 上 行 法 展 开 ．待 色 素 斑 点 明显 分 离 后 ．(溶 剂 前沿 展至 约 15 m处 )股 出 ，于空 气 中 自然 凉干 ，与 标 准色斑 比较 ，如 主色点 的 比移 值与标 准 色斑 相同 即 为 同一色素 。再 比较 色斑 的深浅 ，如样 品色斑浅 于标 准 色斑或 颜色一致 ．则 样 品中合成 色 素含 量小 于或 等于 值 ；如样 品色斑 深 于标 准 色 斑 ，则样 品 中合成 色 素含量 大干标 准 值 ．这 时应根据 其 色斑 的深 浅估 计减 少 滴 加 的 微 升 数 或 将 样 液 稀 释 后 再 滴 加 不 同 微 升 数 ． 直至样 液点 的色 斑与标 准色斑 颜 色深浅 一致 为止 22．3 计 算 = -A ～ ×10(30 — ■ 玑 式 中 ：x— — 样 品 中 合 成 色 素 含 量 ，g／kg； A— — 测 定 用 样 液 中 色 素 的 含 量 ，mg； n 样 品 质 量 ，g； V．— — 样 品解 吸后 总体积 ，ml； V厂 点样 用 样液体 积 ， 。 2．3 操作要点 的工 艺条 件 及储 存 过程 中 ，损 失 比较 大 ；其次是 有 些 维生 素之 间会 相互拮抗 降低 其效价 为解 决上 述 问 题 ．稳 定 型维生 素应运 而 生。 目前在维 生素 的稳 定方 面大 致 有 两 种 方 法 ：化 学 方 法 和 物 理 方 法 。化 学 方 法 就 是用 化学 结 合 的方 式增 加维 生紊 的稳 定性 ；物理 方 法 就是通 过 微 胶囊 的方 法使 维 生 紊稳 定 化 ；通过 选 择合 适 的囊 材 ，控 制囊 心物 在 消 化道 的 释放 时 间 ， 从 而 达到 缓 释 控释 的效果 ，既有 利于 核心 物 质 的吸 收 ，叉可 以降低对 胃肠道 等 的副作 用 。 在 判 定微 胶囊 型维生 紊 稳 定性 的过 程 中 ，一 个 重要 的方 面是这类 维 生紊 的检测 方法 。目前 ，大 多数 维生 素 单体 的检测 方法 已经 建立 ．但 微胶 囊 型 维 生 2．3．1 展 开 剂 的选 择 一 般 选 用 展 开 剂 I；靛 蓝 在 碱 性条件 下易褪色 ，选 用展开 剂 lI可 防止靛蓝褪 色。 2 3 2 预 饱 和 展 开前 层 析 缸 必 需 预 饱 和 (大 约 30min)，否 则 色 斑 分 离 不 好 一 2．3．3 色 谱 用 纸 需 经 活 化 点 样 前 将 滤 纸 放 于 100~C烘 箱 中“活 化”20rmn后 取 出现用 。经烘 干 的滤 纸 农 分降纸 ，检测 灵敏 度增 高 。 2 3 4 点样 时斑 点应 尽 可 能小 斑 点越 小 ，样 品越 集 中 ，检测灵 敏 度增 高 2．3．5 点 样 时应 尽 可能 快 些 点样 快 ，吸 水 少 ，检 测 灵 敏度增 高 。 3 结论 经 长期 工作 实 践验 证 ，本 方法 灵 敏度 较 高 ，重 现 性 好 ．成 本 低 ，试 验 过 程 简 便 易操 作 ，适 合 饮 料 中 合 成 色 素 的 测 定 。 参考文献 1 中单人 民共和 国国 末标准 《食 品卫生检验 方击 理 化部 舟》．中国标准 出版社 ，1997 2 中国食品添加荆生产应用工业协套糖．食品摹加荆分析检 验手册．中国轻 工业出版社 ，1999 维普资讯 http://www.cqvip.com