【word】 心复康口服液质量的评价

【word】 心复康口服液质量的 心复康口服液质量的评价 ?14? ? 论着? 主垦主堕堕堕盒璺塾垄查生箜鲞第1期ChinJTCMWMCritCare,January2011,Vo1.18,No.1 心复康口服液质量的评价 郭辉,曹雪滨,黄河玲.,赵清,杨梅.,韩媛媛,郭宏.,崔桂华 (1.河北大学中医学院,河北保定071000;2.解放军第--X2N院,河北保定071000; 3.保定市药品检验所,河北保定071008) 【摘要】目的建立心复康口服液的质量评价方法.方法采用薄层色谱法对心复康口服液中的主要药 味黄芪,人参,丹参,淫羊藿进行定性鉴别,并对其中的有毒药昧附子进行乌头碱的限量检查;在此基础上,采用 高效液相色谱法对方中君药人参的指标成分人参皂苷Rgl进行线性关系考察和稳定性,精密度,重现性,回收 率试验,并测定批号为20080406,20080527,20080618共3批心复康口服液中人参皂苷Rgl的含量.结果薄 层色谱法显示,心复康口服液中含有黄芪,人参,丹参,淫羊藿;有毒物质限量检查可知乌头碱在规定的剂量范 围.人参皂苷Rgl在194.4,5832.0ng范围内呈良好的线性关系;同一批供试品8h内峰面积的相对标准偏 差(RSD)为1.58,表明药物基本稳定;同一份人参皂苷Rgl峰面积的RSD为0.41%,表明精密度良好;同一 批样品人参皂苷Rgl峰面积的RSD为0.07,表明本法重现性良好;人参皂苷Rgl的平均加样回收率为 98.7O0A,RSD为1.71.批号为20080406,20080527,20080618心复康口服液人参皂苷Rgl的含量分别为 61.37,57.6O,42.27~g/ml,RSD为0.90,1.40%,1.90.结论本研究中建立的质量评价系统能够有效反 映心复康口服液的质量,可作为评价心复康口服液质量的有效手段. 【关键词】心复康口服液;薄层色谱;高效液相色谱法;质量评价 中图分类号:R286;R927.1文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.1008—9691.2011.01.004 AppraisingthequalityofXinfukangoralliquid(心复康口服 液)GUOH,CAOXue—bin,HUANG He—ling,ZHA0Qing,YANGMei,HANYuan—yuan,GU0Hong,CUIGui —hua.TraditionalChinese MedicineCollege,HebeiUniversity,Baoding071000,Hebei,China Correspondingauthor:CAOXue—bin,Email:cxb252@yahoo.corn.cn [Abstract]ObjectiveToestablishamethodofappraisingthequalityofXinfukangoralliquid(心复康 口服 液).MethodsThemainingredientsinthispreparation:Radixastragali(黄 芪),Radixetrhizoma ginseng(人参),Radixetrhizomasalviaemiltiorrhizae(丹 参),Herbaepimedii(淫羊藿)werequalitatively differentiatedbythinIayerchromatography(TLC),andthequantitativelylimitedexaminationwascarriedout foraconitineinitstoxicingredientofRadixaconitilateralispraeparata(附 子).Basedontheseexaminations, theindexcomponent,ginsenosideRgl,inthemonarchyingredient,Radixetrhizomaginseng,wasdetermined byhigh—performanceliquidchromatography(HPLC)tocarryouttheverificationoflinearity,testsof stability,precision,reproducibilityandrecoveryrate,andthecontentofginsenosideRglinthethreebatches ofXinfukangoralliquid(NO.20080406,20080527,20080618)wasalsomeasured.ResultsTheTLC revealedthatXinfukangora1liquidcontainedRadixastragali.Radixetrhizomaginseng,Radixetrhizoma salviaemiltiorrhizaeandHerbaepimedii.Thequantitativelylimitedexamina tionshowedthatthecontentof aconitine.atoxicsubstance,wasinthesaferange.GinsenosideRglintherange 5832.0nghad of194.4— good1inearity.Relativestandarddeviation(RSD)ofthepeakareasofthesamesamplein8hourswas1.58, indicatingthebasicstabilityofthismethod.TheRSDofginsenosideRglpeakareaofthesamesamplewas 0.41,revealingthattheprecisionwasgood,whilethatwas0.07,showingthereproducibilityofthe methodwasnice.ThemeanrecoveryrateofginsenosideRglwas98.70insampleswithadditionofit,and theRSDwas1.71.ThecontentofginsenosideRglinthethreebatchesofXinfukangoralliquidwithNO. 20080406.20080527and20080618was61.37,57.60and42.27ffg/mlrespectively,andtheRSD,0.90, 1.4O,1.9Orespectively.ConclusionThismethodcanvalidlyreflectthequalityofXinfukangoralliquid, anditcanbeaneffectivemeasuretoassessthequalityofthe1iquid. [Keywords]Xinfukangoralliquid;Thinlayerchromatography;High—perf ormanceliquidchromatogra— phy;Quality—appreciation 心复康口服液为解放军第二五二医院院内制 剂,由黄芪,人参,丹参,淫羊藿,附子(制),川芎等药 物组成,具有活血化瘀,益气温阳之功效,主要用于 基金项目:国家自然科学基金项目(30873398);全军”十一五”攻 关课资助项目(2006MAO74) 通信作者:曹雪滨,Email:cxb252@yahoo.corn.an 作者简介:郭辉(1981一),男(汉族),江西省人,医学硕士,助教. 治疗冠心病,心肌病,心肌炎等疾病,对各种原因引 起的心力衰竭具有较好的辅助治疗作用l1.].药理研 究同时表明,心复康口服液对缓慢心律失常和干预 心力衰竭大鼠心肌细胞葡萄糖转运蛋白4均有一定 的作用].为有效评价心复康I=I服液的质量,保证 用药安全有效,本研究从心复康口服液的鉴别,检 查,含量测定等方面进行综合评价,报告如下. 中国中西医结合急救杂志2011年1月第18鲞蔓塑一|n!!兰堡!』璺竺!.,..15. 1材料与方法 1.1主要仪器与药物:SCL—lOAvp数据处理机,岛 津LC一10ATvp高效液相色谱仪,SPD—lOATvp紫 外可见分光光度检测仪.心复康口服液由解放军第 二五二医院提供[批准文号:北制字(2006)F17003; 批号:20080406,20080527,20080618];黄芪甲苷 对照品(批号:110781—200613),人参皂苷Rgl对照 品(批号:110703—200726),人参皂苷Rbl对照品 (批号:110704—200420),原儿茶醛对照品(批号: 100—0810—9402),淫羊藿对照品(批号:110737— 200414),乌头碱对照品(批号:110720—20041O)均购 自中国药品生物制品检定所.乙腈为色谱纯,水为超 纯水,其余为分析纯试剂. 1.2药物的定性鉴别. 1.2.1黄芪:取心复康口服液15ml置于分液漏斗 中,用水饱和的正丁醇萃取2次,每次20ml,合并 正丁醇液,蒸干,残渣用1ml甲醇溶解即得供试品 溶液.另取黄芪甲苷对照品适量,加甲醇制成 1mg/ml的溶液,作为对照品溶液.严格按照本制剂 和供试品的制备方法进行,制备处方中无黄芪溶液 作为阴性对照. 1.2.2人参:取心复康口服液2Oml置于分液漏斗 中,用三氯甲烷萃取2次,每次15ml,弃三氯甲烷, 水层用饱和的正丁醇萃取3次,每次15ml,合并正 丁醇溶液;然后再用氨试液洗涤合并液3次,每次 20ml,再用正丁醇饱和的水30ml洗涤,分取正丁 醇层,蒸干,残渣用lml甲醇溶解,即得供试品溶 液.另取人参皂苷Rbl,人参皂苷Rgl对照品,加甲 醇分别制成含0.5mg/ml的混合溶液,作为对照品 溶液.严格按照本制剂的制备方法和供试品的制备 方法,制备处方中无人参溶液作为阴性对照 1.2.3丹参:取心复康口服液10ml置于分液漏斗 中,用稀盐酸调节pH值为2,用乙酸乙酯萃取3次, 每次10ml,合并乙酸乙酯液,将合并液蒸干,残渣 用1mJ乙酸乙酯溶解,即得供试品溶液.另取原儿 茶醛对照品适量,加乙酸乙酯制成1mg/ml的溶 液,作为对照品溶液.严格按照本制剂和供试品的制 备方法,制备处方中无丹参溶液作为阴性对照. 1.2.4淫羊藿:取心复康口服液30ml置于分液漏 斗中,用乙醚萃取3次,每次3Oml,弃乙醚,水层用 乙酸乙酯萃取3次,每次2Oml,合并乙酸乙酯液, 蒸干,残渣用1ml乙醇溶解,即得供试品溶液.另取 淫羊藿苷对照品适量,加乙醇制成0.5mg/ml的溶 液,作为对照品溶液.严格按照本制剂和供试品的制 备方法,制备处方中无淫羊藿溶液作为阴性对照. 1.2.5乌头碱限量测定:取心复康口服液20ml, 加氨试液调节pH值为11,用乙醚提取3次,每次 2Oml,合并乙醚液,蒸干,残渣用1ml元水乙醇溶 解作为供试品溶液.另取乌头碱对照品适量,加无水 乙醇制成1mg/ml的溶液,作为对照品溶液. 1.3鉴定方法:按照薄层色谱法试验,取黄芪,人 参,丹参,淫羊藿供试品溶液,对照品溶液,阴性对照 溶液各1Ol,分别点于同一硅胶G薄层板上.黄芪 以氯仿:乙酸乙酯:甲醇:水为12:40:22;10 比例,人参以三氯甲烷:甲醇:水为13:8:3比例, 丹参以环已烷:乙酸乙酯:甲酸为15:10:1比 例,淫羊藿以氯仿:丁酮:甲醇:水为6:4:6:1 比例为展开剂,展开后取出晾干.黄芪,人参喷以 1O硫酸乙醇溶液,丹参喷以10三氯化铁乙醇溶 液,淫羊藿喷以2%三氯化铝试液,105?C加热至斑 点显色清晰.黄芪,人参,丹参置日光灯下检视,淫羊 藿于365nm紫外光灯下检视,进行药物鉴别.精密 吸取乌头碱供试品溶液25l,对照品溶液5l,分 别点于厚500/Lm同一硅胶G薄层板上,以苯:乙酸 乙酯:三乙胺为14:4:1比例为展开剂,展开后取 出晾干,喷以稀碘化铋钾试液,进行色谱限量检测. 1.4人参皂苷Rgl测定 1.4.1对照品溶液制备:取人参皂苷Rgl对照品 适量,精密称定,加甲醇制成0.2mg/ml的溶液. 1.4.2供试品溶液制备:吸取心复康口服液30ml 置于分液漏斗中,用乙醚提取2次,每次30ml,弃 乙醚,水液用水饱和的正丁醇振摇提取4次(30,30, 30,20m1),合并正丁醇液,用氨试液洗涤3次,每次 30ml,弃氨液,再用正丁醇饱和的水洗涤3次,每次 30ml,弃水,正丁醇液水浴蒸干,残渣用5ml甲醇 使溶解,用D101型大孔吸附树脂柱(内径1.0am, 长20.0cm,湿法装柱)以水50ml洗脱,再用5Oml 20乙醇洗脱,弃洗脱液,继用75%乙醇80ml洗 脱,收集75%乙醇洗脱液,蒸干,残渣用甲醇溶解并 转移至5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀. 1.4.3阴性对照液制备:按处方比例制成不含人参 的心复康口服液,按照供试品溶液制备方法制备阴 性对照液. 1.4.4色谱条件:色谱柱为美国Phenomenex公司 产品[5uC18(2)1O0A,250.0mm×4.6mm3;柱温 25?;流动相为乙腈:0.05%磷酸溶液(20:80), 流速1ml/rnin,进样量101,检测波长203nm,理 论塔板值为3500. ?16?主垦!堕医笙金叁塾鳌查生旦塑1期ChinJTCMWMCritCare,January2011,V01.18,No.1 1.4.5线性关系考察:称取人参皂苷Rgl对照品 24.3mg,置25ml容量瓶中,用甲醇溶解,并稀释至 刻度,摇匀.再吸取0.1,0.25,0.5,1,2,3m1分别置 于5ml量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀.分别量取 对照品溶液各1O1,注入液相色谱仪,以峰面积为 纵坐标,以浓度为横坐标,绘制标准曲线. 1.4.6稳定性试验:取批号为20080618的同一批 供试品溶液,分别于配制后0,2,4,6,8h进行薄层 色谱测定. 1.4.7精密度试验:取同一份人参皂苷Rgl对照 品,进行薄层色谱测定,连续进样6次. 1.4.8重现性试验:取批号为20080618的同一批 样品进行薄层色谱测定,连续进样测定6次. 1.4.9回收率试验:采用加样回收率测定方法, 取已知人参皂苷Rgl含量的样品30ml(批号: 20080618,浓度42.27/~g/m1),加入人参皂苷Rgl 对照品0.85mg,按上法处理样品并测定含量. 1.4.10样品测定:按上述测定方法测定3批心复 康口服液中人参皂苷Rgl的含量. 2结果 2.1药物鉴别(图1) 2.1.1黄芪的鉴别:供试品色谱中,在与黄芪甲苷 对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性 无干扰.表明本制剂中含有黄芪,且本法可作为本制 剂黄芪的定性鉴别方法. 2.1.2人参的鉴别:供试品色谱中,在与人参皂苷 Rbl,Rgl对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的 斑点,阴性无干扰.表明本制剂中含有人参,且本法 可作为本制剂人参的定性鉴别方法. 2.1.3丹参的鉴别:供试品色谱中,在与原儿茶醛 对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性 无干扰.表明本制剂中含有丹参,且本法可作为本制 剂丹参的定性鉴别方法. 2.1.4淫羊藿的鉴别:供试品色谱中,在与淫羊藿 苷对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴 性无干扰.表明本制剂中含有淫羊藿,且本法可作为 本制剂淫羊藿的定性鉴别方法. 2.1.5乌头碱限量检测结果:供试品色谱中,在与 对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品 的斑点,表明乌头碱在规定的安全剂量范围. 2.2人参皂苷Rgl色谱图(图2):人参皂苷保留时 间为34.6rain,峰形较好. 2.2.1人参皂苷Rgl线性关系:绘制标准曲线得 回归方程为:一3×10z+16865,rl-康口服液中人参皂苷Rgl的高效液相 色谱图 . 【LJ510l52025303540455055f 时间(mir1) .. 鞭孥蕊 孥照 2 o #3 2 2 2 O0 2 2 ??.… 一f1罾)l旧唾掣嚣一 ?如加m0如 一f1《旨一器畦匪蓠一 中国中西医结合氢救查篁旦箜!鲞箜塑!!!ry,_l 2.2.2人参皂苷Rgl稳定性,精密度,重现性,回 收率结果:稳定性试验显示人参皂苷Rgl峰面积的 相对标准偏差(RSD)为1.58,表明供试品溶液 在8h内基本稳定;精密度试验显示,人参皂苷Rgl 峰面积的RSD为0.41,表明本法的精密度良好; 重现性试验显示,人参皂苷Rgl峰面积的RSD为 0.07,表明本法的重现性良好;回收率试验显示, 人参皂苷Rgl的平均加样回收率为98.7O,RSD 为1.71,表明本法的准确度良好. 2.33批药物中人参皂苷Rgl含量(表1):3批心 复康口服液含量范围为40,62~g/ml,波动范围较 小,质量稳定. 表13批心复康口服液中人参皂苷Rgl的含量 3讨论 本研究中通过鉴别心复康口服液中主要药物黄 芪,人参,丹参,淫羊藿来判断其真伪,同时通过控制 其有毒药物附子中指标成分乌头碱的含量来保证本 制剂的用药安全.在此基础上,为进一步评价本制剂 质量的优劣,本研究中采用了高效液相色谱法对其 君药人参的有效成分人参皂苷Rgl进行了含量测 定,并建立了一种精密度和重现性均较好的快速评 价方法.本研究结果表明,心复康口服液中含有黄 ?17? 芪,人参,丹参,淫羊藿;有毒物质限量检查可知乌 头碱在规定的剂量范围;人参皂苷Rgl在194.4, 5832.0ng范围内呈良好的线性关系;同一批供试 品8h内峰面积的RSD为1.58,表明基本稳定 同一份人参皂苷Rgl峰面积的RSD为O.41,表 明精密度良好;同一批样品人参皂苷Rgl峰面积的 RSD为O.O7%,表明本法重现性良好;人参皂苷 Rgl平均加样回收率为98.7O,RSD为1.71, 表明本法的准确度良好.因此,本研究中实现了较为 全面地综合评价心复康口服液的质量,这对保证本 制剂的用药安全具有极其重要的指导意义. 参考文献 r1]曹雪滨,胡元会,何建成.心复康口服液的药效学研究.现代中 西医结合杂志,2004,13(2):275—276. 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(收稿日期:2010…1227) (本文编辑:李银平) 中国科技信息研究所2010年版《中国科技期刊引证报告》(核心版) —— 总被引频次总排序表中前100位医学类期刊名单 ? 消息? 期刊名称总被引频次排位期刊名称总被引频次排位期刊名称总被引频次排位 中华医院感染学杂志84125中华放射学杂志413341中国现代医学杂志331676 中华护理杂志84086中国中西医结合杂志4l1343实用儿科临床杂志317179 中国组织工程研究与l临床康复72187中华流行病学杂志409644中国全科医学315680 WoRLDJOURNALOF60139中华儿科杂志406645解放军护理杂志313181 GASTR0ENTER0LoGY中华妇产科杂志397248中国药学杂志308483 中国实用护理杂志571715中华骨科杂志391052中国危重病急救医学302986 中草药563116中华内科杂志367456世界华人消化杂志300987 中国中药杂志554419护士进修杂志363558药学298188 中华结核和呼吸杂志529322中国妇幼保健363259中药材295690 护理研究518025中国实用妇科与产科杂志36176O中国骨与关节损伤杂志293891 中国误诊学杂志499728中华神经科杂志354861中华检验医学杂志293392 护理学杂志488129中国医学影像技术 345863CHINESEMEDICAL289196 中华外科杂志471530中国药房338168joURANL 中华心血管病杂志462331中国药理学通报337469现代中西医结合杂志288098 中国实用外科杂志449133中国矫形外科杂志336670第四军医大学287499 中国公共卫生433336中华肝脏病杂志336371中华实验外科杂志2865100