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微生物蛋白酶对玉米皮蛋白水解作用的研究

2012-08-23 3页 pdf 123KB 29阅读

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微生物蛋白酶对玉米皮蛋白水解作用的研究 ③ ⋯⋯ ⋯⋯ ⋯岫 :州¨ 帅 微 生物蛋白酶对玉米皮蛋白水解作用的研究 一 I 王 遂 尤 旭 (哈尔滨师范大学化学系,哈尔滨 l 5O08O) (哈尔滨医科大学,哈尔滨 1 ⋯ 一 ⋯ 一 ● ● 2弓7 ss 摘 要 研究了1398中性蛋白酶对玉米皮蛋白的水解效果.并研究了酶用量、底物浓度、水解时问对该酶水解效 果的影响。结果表明.最佳工艺条件为:温度4O℃、pH7.5时.底物浓度 10 ,酶用量3000u/g,水解时间为 3h时.蛋白 质溶出率量高选9O.30 ; 、 美-...
微生物蛋白酶对玉米皮蛋白水解作用的研究
③ ⋯⋯ ⋯⋯ ⋯岫 :州¨ 帅 微 生物蛋白酶对玉米皮蛋白水解作用的研究 一 I 王 遂 尤 旭 (哈尔滨师范大学化学系,哈尔滨 l 5O08O) (哈尔滨医科大学,哈尔滨 1 ⋯ 一 ⋯ 一 ● ● 2弓7 ss 摘 要 研究了1398中性蛋白酶对玉米皮蛋白的水解效果.并研究了酶用量、底物浓度、水解时问对该酶水解效 果的影响。结果表明.最佳工艺条件为:温度4O℃、pH7.5时.底物浓度 10 ,酶用量3000u/g,水解时间为 3h时.蛋白 质溶出率量高选9O.30 ; 、 美-词三苎墨兰 !竺苎皇 蔓眸_ 1耋 板车 Al~tract Hydrolysis effects of 1398 protemases on cornhran protein was studied.Effects of influencing parame ters,including enzy1~le does,suhstrate concentration and hydrolytic time on hydrolysis of Prot~nases was also investi— gated.Resultsindicatethatthe best combination of parametersfor1398 Proteinasesin 4O℃,pH 7.5,10 substrate, 3000 u/g enzyme and 3h.In such conditions 90.3O of the protein in cornhran was hydrolyzed. Key rd5 cornhran protein‘neutral proteinase+hydrolysis 玉米种皮是玉米淀粉生产中的一种主要副产品, 其质量分数为玉米的 12 ,其蛋白质含量为玉米皮 的 l 2 左右,目前主要作为饲料廉价出售,造成蛋白 资源的极大浪费,鉴于玉米种皮含有丰富的淀粉、蛋 白质、粗纤维及矿物质、维生素,突破其单一的用途, 研究开发一些高附加值的麸皮产品是很有意义的。 本文将采用生物技术方法研究 1398中性蛋白酶 对玉米皮蛋白的水解,使其转变为可溶性多肽,最终 达到分离提取蛋白的目的 玉米皮蛋白经酶水解后, * 黑龙江省青年基盘费助项 目 其功能特性可得到明显改善,因为水解生成的驮及氨 基酸易被人体消化、吸收,因此水解蛋白适用于老年 人、病人及儿童食用。而传统的化学法提取蛋白其功 能特性远不如酶水解提取的多肽类蛋白。因此,本项 研究为玉米皮的进一步开发和应用提供了理论依据。 1 与方法 1.1 材料与仪器 玉米皮 黑龙江省肇东金玉集团提供 ;1398中 性蛋 白酶 无锅酶制剂厂提供,经测定酶活力为 l1 万u/g;酪蛋白 生化试剂;其它试剂均为分析纯试 剂 等)与质地特性的关系口 I而低温领域的科学家则主 要从工程角度出发,研究漂烫、冻结和冻藏的传热传质 及冰晶生长等细胞结构的影响与果蔬质地特性的关 系 ]。事实上,这是一个问题的两个方面,要系统地研 究果蔬在加工过程的质地下降的机理以及预防其恶化 的方法,应将加工过程中果胶酶活性变化、果胶的脱酯 和细胞超徽结构变化三者结台起来研究。换句话说,果 蔬质地的变化主要与细胞壁和细胞膜完损及强度有 关,而细胞超徽结构变化与细胞壁及细胞间质的果胶 组分变化密切相关,果胶酶又是引起果胶组分变化的 主要原因之一。另外,研究盐类(如CaCl。等)预处理对 果蔬质地的影响,光用从盐类与果胶脱酯产物形成网 状凝胶结构来解释质地特性的改善是不够全面的,也 应该研究这些盐类对果胶酶的活性以及果胶溶解性的 影响。这些均是我们课题组目前研究的内容。 ·22· ●考文献 1 AhBrtz M .D.,Morillo M J.and Caner W .Optimisatioa of freezing process with pressure steaming of potato tissues (CV Monalisa) J.Sci.Food Agric,1999(79):1237~1248 2 Mcfeeters R.F.Fleming H.P.and Thompson R.L. Pectinesterase activity, pectin methylation,and texture changes during storage of blanched cucumber slices.J.Food Sci.,1985(5O):201~205,219 3 Tijskens L.M.M +Rodos P.S.,Hertng M.L.A.T.M.。 Proxenia N.and叫 k C.V Activity of pectin methyl esterase during blanching of peaches.J.Food Eng.,1999(3。):lfi7~ 177 4 Pre stamo G.,Fuster C.and Risueno M.C.Effects of bXanching and freezing on the structure of carrots calls and their implications for food processing.J.Sci.Food Agric.1998 (77):223~ 229 维普资讯 http://www.cqvip.com 《食品工业科技》 Science and Technology of Food Industry Vo1.21,No.4,2000 微量凯氏定氮仪 上海玻璃仪器厂;CHS 1型 恒温水浴 湘西仪器仪表总厂;TJ82—3型离心机 天津市医疗器械三厂;TG328A分析天平 上海分析 天平仪器厂;721型分光光度计 上海第二分析仪器 厂 。 1.2一测定方法 蛋白质含量测定 按照 GB5009.5—85微量凯 氏定氮法进行 ; 淀粉含 量测定 GB5009.9—85食品 中淀粉含 量的测定方法; 水分测定 按 GB5009.3—85常压烘干法进行; 酶活力 测 定 按 照 QB/T1803--93福林 酚法 进行: 脂 肪泐 定 按 照 GBS009.6~85索 氏抽提 法 进行; 氨基酸 态氮 的测 定 按照 GB/T5009.39—96 甲醛法进行; 水解程度(DH)的测定 以水解液中游离氨基氮 /每克原料×100 计算; 蛋 白 质 溶 出 率 ( ) 一 舞 原料中蛋白质含量×原料质量⋯⋯ 1.3 实验方法 1.3.1 样品厦其制备 将 玉米皮粉碎过 100目筛, 备用。 1.3.2 蛋 白酶水解工艺 。目筛样品 酶解液等酶 解产 残渣用 50℃蒸馏水 洗涤 氧基态氮舍量 / 洗液并入酶解产物—! , 刹/ \ , 蛋 白质含量 1.3.3 操作要点 1.3.3.1 称过 100目筛样品 3g,加水,调pH,配成 一 定物料浓度的溶液。 1.3.1.2 酶解 将蛋白酶按一定的量直接加入反应 器中,在 40℃水解 1.3.1.3 灭酶 活 将 水解完 毕 的水解 液加热 至 90C,保持 10mln。 1.3.1.4 离心分离 将水解后样品离心,再 以50℃ 蒸馏水洗残渣,一并定容至一定体积,得水解产物。 1.4 提高蛋白水解率的探讨 称 样品二份,加水,配成相同的物料浓度,调 pH7 5 其中一份加酶在 40℃下水解 1h 另一份在 90℃下加热 30min,使其热变性 ,降温至40"C,加相同 的酶量,40℃水解 1h。比较水解结果 。 2 结果与讨论 2.1 玉米皮成分的测定 玉米皮水 分 11.I ,脂肪 9.6 ,蛋 白 13.6 , 淀粉 20.8 。 2.2 最佳酶法水解蛋AT艺条件的鞠定 根据以往的实验结果,1398蛋白酶的最适 pH 为 7.5,最适温度为4O℃,因此我们仅考察酶用量、酶解时 间及底物浓度对蛋白水解度及蛋白质溶出率的影响。 我们采用 ( )正交表,拟出试验来考察三 个因素对水解的影响,见表 l、表 2。 袁 1 玉米皮蛋白木耳正变试验 由表 2可见,蛋白质溶出率高的工艺组台为 A B c 。极差计算显示影响蛋白质溶出率的因素主 次关系为:A>B>C。蛋白质水解度高的工艺组台为 AzB C ,极差计算显示影响蛋白质水解度的因素主次 关系为 C>B>A 袁2 正变试验的枉盖计算 K.:i水平上三十试验结果之平均 2.3(拟)提高蛋白质水解率的实验结果 袁 3 热 变性对蛋 白质客出率厦 蛋白质水解度的移响 原料经 901C热变性处理 30rain,蛋白酶的水解率 较正常酶解有所提高,但提高的不多,而蛋白质水解 ·23 · 维普资讯 http://www.cqvip.com ⑩ 食品工业科技 k 。。。 。 F 。 。。.:。,N。. ,:。帅 ,一一 月季花抗氧化作用的研究 胡迎芬 胡博路V孟 洁 杭 瑚 ,7_ 胡迎芬 胡博路 孟 洁 杭 瑚 f --———一 ,—————一 I (青岛大学化学系.青岛 266071) 2一 ⋯ . 1⋯ ⋯ 一 一 ●~ ● ⋯ ·● ⋯ 一 ● ⋯ 一 擅 宴 分别用DPPH法、硫代巴比妥酸法、Na S O 一I 滴定法测定了月季花提取物的抗氯作用 结果表明,不同 溶剂的月季花提取物对 DPPH 自由基均有一定的清除作用,其清豫率大小依擞为 95 乙醇、水、6O%乙醇、乙馥乙謦 提取物 随着月季花提取物浓度的增加,对猪油和亚油酸的氧化抑制作用增强,其中以95 乙醇提取物对猪油的抗氯 化作用最强 美t词 月季花 清唇鲁自由基 AI~tract Antioxidant action 抗氧化作用 碳 物 ,- ,,7 A ll of Chinese rose were studied by 1.1~liphenyl一2 picrylhydrazyl (DPPH)free radical method,thiob arbitunic acid method and the Na2S 0 I:titrimetric method .The results showed that all the extracts of Chinese rose obtained by different extraction solvents had scavenging effects on DPPH radical and the scavenging percent decreases in the order of 95 ethanol solution>pure water>60%ethanol solution>ethyl acetate.The resistance to the oxidation of linoleic acid and lard are strengthened whe n increasing the usage of extracts and 95 ethanol extracts showed the highest acti ties on the antioxid,~tion of 18rd. Key words Chinese rose;radical scavening:antioxidant action 食用抽脂由于含有不饱和脂肪酸,在光、热或金 属离子催化剂的活化下.发生自动氧化反应。所以太 多数禽用抽或含油脂食品等往往需要加^一定的抗 氧化剂防止其发生自动氧化。月季花_I 为蔷薇科蔷薇 属植物月季的花,其根、叶也入药。月季花性温、味甘- 具有活血调经、散毒消肿的功能。 本文测定了不同溶剂月季花提取物清除 自由基 * 本]煎日系山东省 自燕科学基盒壹助项 目.Y98D02050 的能力,并以亚油酸和猪油为底物,对其抗氧化活性 进行了初步研究。 1 材料与方法 1.1 实验材料 月季花 购于青岛银海大药店。3O℃鼓风干燥, 粉碎过 40目筛备用;猪油 市售新鲜板油文火熬{ij, 过滤后备用;茶多酚 福建松溪生化工厂,纯度> 95 ;TBHQ 法 国罗地 亚公 司食 品级抗 氧化剂t DPPH(二苯代苦昧酰自由基) 东京化成工业株式 度却因蛋白质变性而降低。考虑到实际应用中能源消 耗 问题,以不进行热变性处理为宜。 3 结论 3.1 本试验证明以 l398中性蛋 白酶水解玉米皮制 取玉米皮蛋白产品是可行的,最佳水解玉米皮蛋白的 水解条件为 40℃,pH7.5时,底物浓度 1O ,酶用量 3000u/g,永解时间 3h,蛋 白质格 出率为 9O.30 ;在 酶用量 2000u/g,水解时间 lh,底暂浓度 5 时.蛋白 质水解度(DH )为 0.1504。 3.2 蛋白质溶出率与蛋白质水解度的影响因素的主 次关系并不是正比关系。这是由于蛋白质涪出率是指 所水解出总氮的多少,与肽链长短无关。而蛋白质水 解度是指蛋白质水解为氨基氮的数目,与肽链长短有 关 因此要想制备具有不同生理功能的不同低肽类蛋 白产品,还需在蛋白质溶出率高的条件下进一步研究 蛋白水解度 的影响因素 (包括酶种筛选 ,各种酶水解 · 24· 适宜条件及不同种酶之筒的协同作用,现正在研究) 3.3 热变性处理 玉米蛋白热变性处理对玉米皮蛋白的溶出率并 无明显提高,对蛋白水解为低肽类物质有抑制作用。 参考文蕾 l 王酶.答文荚 .酶解玉米黄粉蛋白匍备可褡性肽 蕞抽食 品科技,l999(】) l~3 2 王志民、煮永俊、张艳萍辱 .水解动物蛋白的酶法制备及 应用.食品工业科技,1998(5):l2~14 3 王璋编 .食品酶 学 .轻工业 出版牡 .1990 4 昊建平、丁霄霖.食品蛋白质降血压肚的研究进展 .中国 粮油学报 +1998,13(5):10~13 5 冉谦 .酶水解法制取食用花生蛋白的研究 .食品与发酵 工 业 ,1998,24(6):1~5 6 翟璃文、李雁群、珠子l林等 .玉米揸中蛋白质的酶水謦 , 食 品工业科技 ,1997(5):38~40 维普资讯 http://www.cqvip.com
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