分光光度计测定汽水,果汁中的合成色素

分 光 光 度 计 测 定 汽 水， 果 汁 中 的 合 成 色 素 ￡ g 去永青 、 摘要 ‘ 本文根据千拢曲线扣除浩，利用分光光嚏}P对汽水，果汁中的磬一合成 色素和双拼色 合成色素进行了定量研究：j开究结果表明，色素呵收率除靛兰较低外，其它均在9,1％～ 10§ 之间。测定样品的精密窿较高，重复性好 前言 ． ． 一 食玎j色嘉具有色泽鲜艳，性暖稳宜，成本低廉等优点 晦箭严亳月{享食 着色。 食品中的色素测定，一般用高压液相色谱，薄层色谱，双波长分光宽度计等。但这些 仗器较复杂，价格昂贵：疆们利用分光光度计对传素进行了测定，同样达剜满意的教果 仗器和试射 (I)721可见光光分光度讣 (上海产 ) ： (2，也玻砂璃斗和普通妊璃鼹 ． ‘ (3)2 0％柠糅酸溶掖 (分析纯) (4)0．5％NaOH~ (分析纯) ’ ’ (5)乙醇： 氨水g：1(分析纯) (G)甲醇 ：甲酸 (60：40) (分析纯、 (7 聚酰胺耪 (100~120目) (8)食用色素 (上海染料研究所)Jj【5i脂红，苋菜红、柠檬黄、蘸兰 亮兰 (9)食 色素标准溶液：分别称取柠檬冀，聃脂红，苋菜红，靛兰名O．1000克，亮 兰O．0500克，用。蒸馏水定容于0 5升容量瓶巾。上述五种色素需置暗处保存。靛兰因久放易 褪色，需经常配制。 ：、千拢曲线扣除法原理 j{ 一 般情况下 单色可以直接川分光光度计测定。拼色划因溶渡中有两种色素存在而J 生平拢，一般不能用单波长分光光度计进行直接测定，而需采用千拢曲线扣除法。 埘予双擗色， 分为三种情况 ( l2 两1种单色股收峰相互分离，’慢收戗互不千拢：如图一府示，这种情境可直接按 也分_舄fj测定。 ‘ ⋯ 一 (2)两种单色的吸 峰部分重r 。 I pA色被B笆干拢，而B色刚 受A色 干 拢 。 如阁所示，选种情况 j干扰I拍 扣除法测定两种包素的含量。 一：。。 先测}}1 、旧帔收值E： ，减去B色对A色I {J-f：拢值Ei t~IIE, h 一E： 即为A包 维普资讯 http://www.cqvip.com D ^I车 ，∞ m h； 6 J0nm 圈一 图二 的直正吸收值，而不千拢的B色则可按单色直接}9II定。 (3)两种单色f 暇收峰相互干拢。这种情况则需利用分_兜光计计算公式计算。如图 三 所示 。 三、标准曲线和干拢曲线的绘制 1．标准曲线的绘制 分别吸取柠檬萤，咽脂红，觉菜红，靛兰标准色素溶液 (20Oug／ 1) ：兜兰 标 准。 色紊溶液 (1OOug／／m1) l ml，2 ml， 8 m1， 4 ml， 5 m1于】O0m1容鼍瓶中， Hj蒸馏永 定容摇匀。 将以上配制好的一系列标准系列溶液，J『j分光光度计在各 自的特征波长处 测 其 吸 收 值，以浓度为横坐标 ，吸收假为纵坐标，用直线回归方程，绘制标准曲线。 (特征波长，~ 430n rn，胭脂红51Onm，苋 菜 红520nm，靛 兰6】O n， ． 兰 “20nm) 2．干拢曲线绘制 川分光光度计对上述各种系列浓度的B色素测定其相 拼包的最大吸收波长 ：^的吸 收 值，即B色对A色的干拢吸收值。以浓度为横坐标，干拢吸收值为纵座标，用直线回 归方 程，绘制千拢曲线。 如圈四所示： a为苋菜红标准曲线，b为靛兰在52Onm处对苋菜红的千拢II}1线 。 D 尉三 四、实验结果与讨论 D ． U● ／砒 圉目 ’ 维普资讯 http://www.cqvip.com 1．回收实验 <1 >单色回收率实验 将白糖粉碎混匀， 取五份，每份 5克，分别加 6 mI配制的五种标准色素溶液 ， 用 蒸馏水定容于100ml容量瓶中，调PH=6，用快速滤纸过滤后铡定 。结果 如 表 1： 表 1；单色回收率 色素名称 j 加入量(Ⅱg) j 测得值(ug) 回收率( ) 柠 檬 黄 l一 1000 —■———1-丽 ———．_——— 丽 胭 脂 红 i000 g50 95 一 照 盎丑 一二 一 960 96 靛 兰 1000 910 91 亮 兰 1000 1030 103 <2 >拼色回收率实验 将 白糖粉碎混匀，称取四份，每份5克，加入两种配制的标准色素溶掖，用蒸馏水定 容于100ml容量瓶中，调 PH=6，用快速滤纸过滤后涮定 结果如表 2： 表 摹I双拼色回收率 颜色 色 豢 加 入量(ug) 钡f得值(ug) 回收率 ( ) ， 一 檬 黄 ’ 400 4】2 103 ⋯ ． 胭 脂 红 1000 — 1020 102 { I 柠 檬 黄 1000 102D 102 一 ⋯ i 胭 脂 红 660 一 Sl8 105 ～ 紫红 J一羹一幕堑 1 000 940 94 200 212 106 I 苋 菜 红 1000 f 950 95 l 亮 些 400 398 99 以含天然色素的单一合成色素的汽水和不含天然色素的双拼色的汽水傲精密度试验 。 含零竺璺妻 汽水用聚酰胺吸附法，除去天然色素和杂质，测其精密度。不含天然色素的 汽水采用直接比色利用千拢皓 线扣除法删其双拼色素的精密度。结果如表 3，表 4所示 。 表 8．柠檬汽水的精密度 · 直接测定：不含天然色素 的饮料，置于电炉中加热至沸 ， 除去cO 冷却至室温 53 维普资讯 http://www.cqvip.com 取25mI样液于l~0ml容量瓶 li’川2O％柠檬酸；fI1O．5％NaoH}~液 调P¨=6，定 荐 l¨ 快速滤纸过滤后测其吸光值。 2．经吸腌}处理话再进行测定：凡含有天然色素_的饮料 ，除同上面样l晶处理以外， 巫 需进行聚酰胺嗖附来消腺舞然色素的午拢。具体步骤如下： 。 (1 >将直接法的样液州PH=4，加入活牝慧浸湿的聚酞黩粉 1兜．搅拧，使 也 誊 完垒吸附。 。- <2 >用G 玻砂漏斗过滤上述试液，瑚40tu PlI=G昀70。C水洗。 < 3>用20ml甲醇：甲酸 (60：40)再洗两次 <4：．>最后用200m1PH=0约7 0。C水洗至PH=6。 <5 > 20m[乙醇：氨 ( 1)溶液解吸色素，解吸液I¨j20 柠檬艘调PH=6，转入 lOOmI容量瓶中定容，用快速滤纸过滤删其吸光值。 对于含有 一色素 的汽水，直接测其色素含量。对于含有双拼色的汽水，9JII晦川 I 拢 曲线扣除珏测典色豢含量。结果如表6： ’ ⋯ ’ ‘ 麦5．试样结果 。 汽水 类别 柠檬汽水 枯子汽水 试样处理 色 表 吸 附 I 柠 檬 萤 ．未． 附～ 藩髫 酶在食品工业中的应用 食品工业 扣主要用的酶羹及这些酶类的应川范围列十表 1巾。Reed已对食品 业 J}j的 酶类做过垒面回顾。目前Godfrey~llReich elt又编辑出版了一本更加广泛论及酶类及其 工业中琦用的专著。 。 ． 表1食品揣 崩 酶娄． 。 - ， 酶 ，N 作 ．j1{ 蛋白酶 ： ： ‘ 微生物 一 蛋自质分解 } - 植物 l 动物J a一淀粉酶 淀粉液化 ’ 淀粉液化 B一淀粉酶‘ ； 淀粉糖化 淀粉葡萄糖苷酶 淀粉糖化： 果胶酶 果胶分瓣 葡萄糖异构酶 用葡掰糖生产粜糖 葡萄糖氧化酶 0 z或葡萄 蛳去除 脂酶 。 H 油兰醑 水解 转化酶 糖转化 乳糖 酶 乳糖水 解 lUB：}j丑际生物化学会 54 源 l IuB编号。I 由用拯围 器‰ 一测4 4 5 维普资讯 http://www.cqvip.com