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甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒

2017-09-20 3页 doc 14KB 48阅读

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甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒 (酶联免疫法)说明书 ◎试剂盒名称: 通用名:甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒(酶联免疫法) 英文名:Diagnostic for Alpha-fetprotein ◎概述: AFP是胚胎血清中的一种主要蛋白,属于肿瘤相关抗原,主要由胎肝合成,出生后急剧下降,新生儿在出生后几个月至一年内降至正常水平(20ng/ml)。AFP为一单一肽链,分子量65000~70000。正常妊娠中期AFP含量可达90~500ng/ml。在畸形妊娠(如:无脑儿、脊柱裂)时,孕妇血清AFP异常升高;当患有原发性肝细...
甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒
甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒 (酶联免疫法)说明书 ◎试剂盒名称: 通用名:甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒(酶联免疫法) 英文名:Diagnostic for Alpha-fetprotein ◎概述: AFP是胚胎血清中的一种主要蛋白,属于肿瘤相关抗原,主要由胎肝合成,出生后急剧下降,新生儿在出生后几个月至一年内降至正常水平(20ng/ml)。AFP为一单一肽链,分子量65000~70000。正常妊娠中期AFP含量可达90~500ng/ml。在畸形妊娠(如:无脑儿、脊柱裂)时,孕妇血清AFP异常升高;当患有原发性肝细胞癌、畸胎瘤时,血清中AFP含量异常升高。正常人血清中AFP含量?20.0ng/ml。 ◎原理及用途: 本试剂盒采用针对不同抗原决定簇的双单克隆抗体分别制备成包被板和酶结合物,利用ELISA双抗体夹心法大批量检测人血清中AFP含量。适用于原发性肝细胞癌及胎儿神经管发育异常(脊柱裂、脑积水)的早期限辅助诊断。 ◎试剂盒组成: 1、 标准品:(20,400)ng/ml,各1瓶(使用前每瓶加入1ml蒸馏水,待完全溶解后使用,溶解后标准品4?可保存1个月)。 2、 包被条:48T 3、 洗涤液:1瓶×8ml 4、 酶结合物:1瓶×6ml 5、 底物:1瓶×4ml 6、 显色剂:1瓶×4ml 7、 终止液:1瓶×6ml 8、 说明书:1份 ◎样本要求: 病人标本无需特殊制备处理,采用正确医用技术收集全血标本,离心分离后,提取血清用于检测。待测血清存放于4?冰箱,采血后24小时内测定。若需长时间保存,则应冻存于-20?以下,避免反复冻融。使用前恢复到室温,轻轻摇动混匀。若标本有沉淀物形成,应离心除去,并确定未变质方可使用。溶血或脂血标本不能使用。 ◎操作步骤: 1、 加样:将包被孔编号,留1孔作空白对照,其余局限性用微量加样器依次加入标准 品及待测样品各100μl。 2、 孵育:置37?温育30分钟。 3、 洗涤:甩去孔内液体,在各孔中加入洗涤液2滴,轻轻震荡3-5次,弃之,然后用 蒸馏水加满各孔,甩掉,反复5次,最后在吸水纸上拍干。 4、 加酶结合物:每孔加入酶结合物100μl(2滴),空白孔不加。 5、 孵育:置37?温育15分钟。 6、 重复步骤“3”。 7、 显色:每孔加底物50μ(l1滴),再加显色剂50μ(l1滴),充分混匀,室温(18-25?)避光反应2-5分钟。 8、 终止:每孔加终止液50μl(1滴)终止反应。 ◎结果判定: 1、 目测:若被测孔显色浅于或等于20ng/ml对照孔可判为?20/ml或阴性 若被测孔显色深于或等于400ng/ml对照孔可判为?400ng/ml或阳性。 若被测孔显色较20ng/ml深又较400ng/ml浅可判为20-400ng/ml或弱阳性。 2、 酶标仪检测:选择波长450nm,用空对照孔校零,在终止反应的10分钟内测定各 孔OD值。 ◎正常参考值: 1、 建议实验室建立自己的正常AFP范围。 2、 参考值:健康成年人?20.0ng/ml。 3、 对AFP含量在20~400ng/ml之间者,建议动态观察。 4、 AFP含量大于400ng/ml的样品,若需半定量检测,请系列稀释后重做。 ◎注意事项: 1、 操作前请仔细阅读说明书,应严格控制反应温度和时间。 2、 试剂盒使用前要充分恢复到室温。 3、 洗涤要彻底,防止假阳性,但不可洗涤过猛增过急而致假阳性。 4、 试剂瓶盖切勿盖错,不同批号的试剂不能混用。未用完的板条及时封存于易填封袋 中。 5、 请在有效期内使用。 ◎贮存与有效期: 试剂盒置于2~8?避光贮存,有效期10个月。
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