食用菌和酵母菌液体石蜡保藏法

抗j“食品科技l99蚌 第2期总第25期 f 3 翎 萄，醉 萄，瘸车石带，一 藏 和酵母茵液体石蜡保藏法 浙江省宁波啤酒厂 董新兰 凌志波 _ ’ 。 。 ～ 、 。 。 。 。 。 。 一 食用菌和酵母菌是生物教学中的重要实验材料，亦是工业生产的主要菌源，因此颇受人 们的重视，但是有了一抹好的菌种，怎样才能较 时间地保持其优良种性，这 是 人 们所十 分关注的问题。据笔者所知，肓较多单位由于保存菌种不得法，往往是年年买种 ，岁 岁 没 种，结果严重影响教育实验和工业生产。 实际上食用菌和酵母菌种保藏方法是很多的。如食用菌有固体斜面保藏法，液体石蜡保 藏法，白胶塞封口保藏法，麸皮保藏法、枝条保藏法、麦粒保藏法、营养液保藏法、担孢予 保藏法等等，酵母菌种有固体斜面保藏法，液体石蜡保藏法，液体试管保藏法，真空冷冻干 燥保藏法等，这些方法备有千秋，选择应用无苻不可。但笔者实践，上述诸方法中，液体石 蜡保藏法具有设备简单，操作方便，菌种存活率高，变异少，优 良种性能保持较长时间的优 点，散实用价值较高，值得推广，现将其有关事项阐述如下： 一 、 液体石■保瞳曹种的帆建 液体石蜡是无色透明呈油状的高级烷烃混合物，由于食用菌丝和酵母菌种不具有同化烃 类物质的能力，所以用液体石蜡保存上述两类菌种就有了前提 。液体石蜡在 日光下观察不 显 萤光或几乎不显萤光，在15℃时比重0．84 5以上，不溶于水与乙醇。用于保藏菌种时，由于 液体石蜡已经灭菌处理，且在使用时其液体位置高于斜面菌种的高度，从而既可防止培养基 干燥，又隔离了菌种与空气的接触，这就延缓了菌种的生命代谢活动节律，使菌种处于相对 稳定的条件，从而达到减慢衰退的目的。 =、液体石■保瞳菌种的鼓粜 食用菌种类颇多，我们选择了载培最广的平菇为实验材料，结果十分满意，具 体 情 况 是 ： J ‘ (一 )菌种生育状况 液体石蜡保藏菌种第一次转管后 (制母种 )，萤丝 就呈现洁白、粗壮、浓密、丰厚，十 分良好，但与组织分离菌种转管情况相比，出菌丝在时闯上要晚二天，即从菌丝吸收营养萌 发到布满整个斜而要七天时间，而第二次转瞥后就与组织分离的菌种毫无差异。翩成原种或 载培种则表现 为菌丝浩自，相壮、浓密，呈绵毛1扶，J胆琏莳筵彳娃多，生K速度亦快，与组织 分离菌种难分伯仲。 (二，、生物效率 为了搓定液体石蜡保藏菌种的生物效率，，我们还采用了组织分离菌种和白胶塞封口保藏 的菌种怍对照进行试验，其结果如下； 酵母菌种辩们以啤酒酵母为实验材料，其效果占L三方面可见分晓。 t (一)菌种存活翠高。液体石蜡菌种，虽然随着时间的推移，亦会逐渐死亡，但比例很 42 维普资讯 http://www.cqvip.com 杭州食品科技1992年第2期总第25期 平茹 菌种不同保藏法生物效率 (表一 ) 项 目 I生物效率(癌) 啤酒酵母存活情况比较(表二) 液体石蜡保藏菌种 105 组织分离菌韩 白腔塞封口保藏菡种 { 10。 少，低于低温斜面僳藏，据试验，二者差异是明 处 理 项 目 三 十 月 = 十 月 十二个月 浪控 蜡保藏 蚰 98 5 97 低温斜面保藏 驰 94 85曙 _ 从上表可见用液体石蜡保藏的啤酒酶母菌种存活率大大优于低温斜面保藏菌种，而更重 要的是优良种性亦能基本保持。 (二 )优 良种性衰退少，从如下试验中 可以充分说明这个问题： 注：试验项目为啤酒的理化指标。 上述情况可见，用液体石蜡保藏的菌种 完全能够保持其优良种性，完全适用于生严实践。 -2，液体石蜡挥藏菌种的具体操作方法 不同方法保藏 的菌种性状 试验 (表 三 ) 菌种保藏方怯 酒 精 度 真正发酵度 成品积 乙酰 ；茛体石 保藏菌种 4．030 6d．05 l 0 106ppm 低温斜面保藏菌种3 845％ j 61。339％ !o。l?gppm (一)培养好斜面原种；食用菌的母种宜采用PDA培养基 (即马铸薯琼脂培养基)，坦 备制时一定要特别仔细，母种培养基应采用纯麦汁12BX防培养基，备制时电需特别仔细，_为 防止菌种在保藏过程中产生过多的酸积累。在配制上述培养基时。可加入0．o2％磷酸氢二钾 作缓冲之用。接种后培莽时，无论食用菌或酵母菌温度都宜掌握偏低，在24℃左右，以使菌 丝健壮，菌苔丰满。 (= )备制好无 菌液体石蜡：选用cP级液体石蜡，液体石蜡的灭菌方法有二剥一。可任选 一 种 ，效果均可。 (1)蒸汽灭菌种，将液体石蜡置于锥形瓶，塞上未脱脂棉花，外包牛皮纸，于 0．1PMa 压力下灭菌30分钟。由于液体石蜡在灭菌过程渗入少量水分，会影响保藏质量，所以灭菌后 曲液体石蜡应先置于45℃温箱中三天，让水分蒸发掉，再经无菌试验后，确认无菌，就可使用。 (2)干热灭菌：将液体石蜡置于锥形瓶中，以160'(2烘箱中灭菌一小时，冷却后，即可使 用。 (三)制好石蜡菌种：挑选好的斜面菌种是很重要一环，食用菌斜面菌种培育好后，应是 菌丝浓密、洁白、粗壮且刚培养到菌丝覆满培养基表面时为最台适制作石蜡菌种，酵母菌培 育到菌苔有丰满感时为最合适制作石蜡菌种，制作应在无菌条件下进行，制作时咀无菌吸管 吸取石蜡灌滴于斜面试管中，灌滴时菌种试管要竖直，液体石蜡清位要高出斜面一厘米，灌 滴后随即塞上灭菌的橡皮塞 (橡皮塞灭菌可甩2％甲醛浸泡24小时)，然后甩固体石蜡封口， 直立保存于 0～ 4℃的冰箱中。 四、液体石蜡菌种的使用 (一 )食用菌：液体石蜡菌种的使用，首先注意活化菌种，其操作方法是在无 菌 条 件 下，用接种耙和接种刀，伸入到竖立的菌种中。挑用一小方块 (约0 ．4×0．4公分 )带培养基 的菌丝 。先存斌管壁接触下， 沥干牯附在上面的液体石蜡，随后接于准备好的PpA斜面 培养基上 置于2 5℃条件培养，约一周后，待菌丝布满斜面，即可转管再 (下转32页 ) 43 维普资讯 http://www.cqvip.com 杭州食品科技19蚰年第2期总第25期 枣 酱 的 制 作 方 法 山西运城 农校 贾生平 枣酱 是选用优质干红枣，经 软 化 、打 浆、浓缩而制成，具有浓郁的枣香昧。 一 、 原料：取一级干红枣，剔除霉烂、 破裂、虫害、变色枣及杂质，用流动清水洗 去枣表面泥砂及杂质，用清水浸泡12小时． 再用流动清水洗净，沥干。 =、软化、打浆：红 枣1C r公斤，加水 50公斤，在夹层锅中加盖焖煮1～2小 时，中 间翻动几次，至枣软烂，手搓时皮肉很容易 分离为止。然后用孔径O．2或O．5毫米打浆机 打浆，再用尼龙网溶去枣皮。 三、配料：枣泥浆100kg、砂糖75kg、 琼脂0．2kg．淀粉 6公斤 桂花或玫瑰4．5kg、 猪油或花生油3kg。 将砂糖配成75 的糖浆，用纱布滤去杂 质备用{琼脂兑水1O倍 ，加热溶解并过滤 备 用，淀粉加水 9 kg，搅拌均匀，过滤备用I 桂花香精加水2倍，搅拌溶化，过滤备用。 四、浓豫I 将糖浆、枣泥浆及淀粉水入夹层锅中混 匀 在2． 一3kg／cm 蒸汽压下，加热浓缩 。 防止糊锅，要不停地搅拌。加热浓缩至可溶性 固形物为5O％刚，再加入琼脂液。当可溶性 固 形物达53—5 时，加入桂花或玫瑰香精及 油脂，继续浓缩10分钟，停汽出锅，快速装罐。 五、装罐； 776型罐装340g，9l 16型罐装1000g，270 mg轻瓶装300g，13×17cm两层蒸煮袋装2 o0 g。用装罐机装入罐、瓶、袋中，轻瓶 和蒸 煮袋也可用手工装入。装罐 时，严防罐口粘 附果酱，封 口要牢固，整齐。用真空封 口机 封口。如果是手工封口要预先排气 六、杀菌； 净重200g、30Cg、340g的升温 5分钟， 在沸水中保持15分钟}净重1000g的升温 5 分钟，在沸水中保持25分钟，杀菌后迅速冷 却至&8℃ 下。轻瓶装罐时要分段冷却，先 用5c～6c℃的热水淋洗，再 用 冷 水冷却到 38℃以下即成 (上接4 3页 ) 接一次，约五天左右，菌丝即会布满斜面，这即是母种，可置冰箱备用。 ‘二)群母菌t也摹 注意先活化菌种，因酵母生育周期较短，故可增加活化次数，一 般要活化二次，其方法亦是在无菌条件下，用接种环伸入菌种中，挑一环菌苔，也于试管壁 触一下，沥去液体石蜡，就可在准备好的麦汁固体斜面培养基上划直线接种，四天左右，待 菌苔略显饱满状，日 可转管接于备好的l2。 x毒汁固体斜面培养基上，如此重复二次，菌 种 已得话化，优良种性氧原，即可应用，或者可将第一次在麦汁斜面培养上发好的菌苔挑取一 环，扬于12。肛的麦汁揞养基中，如此重复--0：，种性亦可复麒，随后应用于生产。 五 、小结 (一 )实践证明，液体石蜡保藏菌种省时、省成率，利多弊少，在生产实践中具有较大 价值，值得推广 (二 )澈体石蜡俅藏的菌种 在一定年限内(三年 内)能保持食用菌、酵母菌的利l性。 但不是 劳水逸，按照 蜘是不断发展的观点，对于菌种应该不断加以选育，才能更好适应 教育实验和生产的需要。 32 维普资讯 http://www.cqvip.com