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对麻疹疫苗免疫前后抗体测定水平的探讨

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对麻疹疫苗免疫前后抗体测定水平的探讨对麻疹疫苗免疫前后抗体测定水平的探讨 于新生1 杨林2 周岩3 摘要 目的是应用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行人群麻疹疫苗免疫监测。探讨疫苗免疫前后IgG抗体测定水平,以观察疫苗接种效果和人群麻疹抗体的消长情况,利于及时补种,防止麻疹流行。 方法 采用酶联免疫吸附实验,对麻疹疫苗免疫前后的抽样人群进行麻疹IgG抗体水平检测。 结果 麻疹疫苗接种前0 — 8个月组和麻疹疫苗接种后20岁 — 50岁血清IgG抗体滴度阳性率高; 麻疹疫苗接种后3岁 — 14岁年龄组Ig...
对麻疹疫苗免疫前后抗体测定水平的探讨
对麻疹疫苗免疫前后抗体测定水平的探讨 于新生1 杨林2 周岩3 摘要 目的是应用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行人群麻疹疫苗免疫监测。探讨疫苗免疫前后IgG抗体测定水平,以观察疫苗接种效果和人群麻疹抗体的消长情况,利于及时补种,防止麻疹流行。 采用酶联免疫吸附实验,对麻疹疫苗免疫前后的抽样人群进行麻疹IgG抗体水平检测。 结果 麻疹疫苗接种前0 — 8个月组和麻疹疫苗接种后20岁 — 50岁血清IgG抗体滴度阳性率高; 麻疹疫苗接种后3岁 — 14岁年龄组IgG抗体滴度低下;≤1:200者占86.6﹪(104/102),滴度1:800和1:3200,仅有19.17﹪(23/120) 和10﹪(12/120). 结论 0 — 8个月组IgG抗体滴度明显高于3岁 — 14岁年龄组而接近成人组IgG抗体滴度,这是母体对新生儿影响造成的。对于血清IgG抗体滴度低下的人群,应及时补种,防止麻疹流行。 关键词 麻疹;酶联免疫吸附实验;IgG抗体;滴度;检测 1 吉林省长春市南关区卫生局卫生监督所(130041) 【作者简介】 于新生,女,本科,吉林大学生物制药,主管检验技师,1991年参加工作至今,一直从事卫生防疫工作。 2 吉林省长春市儿童医院 (130060) 3 吉林省长春市宽城区卫生局卫生监督所(130051) Before and after vaccination against measles antibody levels of yuxinsheng1 yanglin2 zhouyan3 Abstract The purpose is to apply enzyme-linked immunosorbent assay for population monitoring of measles vaccine. Discussion before and after vaccination IgG antibody levels, Order to observe the effects of vaccination and crowd the waxing and waning of measles antibody, Conducive to replant a timely manner, To prevent measles epidemic. Measures Using enzyme-linked immunosorbent assay for mvaccinbefore and after the sampling population levels of measles IgG antibody detection. Effect in the event, that Measles vaccination before the 0 - 8 months after measles vaccination group and 20 years old - 50 years of age positive rate of serum IgG antibody titer is high; Measles vaccination after 3 years - 14 years age group, low IgG antibody titers; ≤ 1:200 accounted for 86.6% (104/102), titer of 1:800 and 1:3200, and only 19.17% (23/120) and 10% (12/120). Conclusion 0 - 8 month group IgG antibody titers was significantly higher than three years old - 14 years age group and nearly adult group IgG antibody titers, This is a result of maternal effects on the newborn. Serum IgG antibody titers for the low population, it is timely replanting to prevent measles epidemic. Keywords Medicine;Enzyme-linked immunosorbent assay; IgG antibody; Titer; Detection 1, Nan Guan District Changchun City, Jilin Province Health Bureau, Health Authority (130041) 【Author】yuxinsheng,female,, undergraduate,Jilin University, Bio-Pharmaceutical, in charge of inspection and technicians, working since 1991, has been engaged in health and epidemic prevention work. 2 Children's Hospital, Changchun City, Jilin Province (130060) 3 W District, Changchun City, Jilin Province Health Bureau, Health Authority (130051) 引 言 在麻疹减毒活疫苗问世前麻疹传染性极强,在人口密集地区流行广泛,死亡率颇高;60年代国内外使用麻疹减毒活疫苗接种后,麻疹的发病率下降95.0﹪-99.8﹪. [1] 虽然麻疹的免疫覆盖率在儿童中已达85﹪以上,但近年仍有麻疹流行的。[2] 1993年12月,在新疆准葛尔东部油田基地学校的学生发生了麻疹暴发流行,这些学生都曾接受过麻疹疫苗的初免和强化免疫。[3] 1996年4月下旬 - 6月中旬黑龙江省巴彦县天增镇红光乡发生79例病例。1997年10月,高坪区东观镇第一小学发生麻疹爆发,共发生36例。[4] 吉林省长春市近年虽未有麻疹流行的报导,但也引起我省各研究部门的重视。在08年春季和09年春季,吉林省疾控中心病毒研究室分别对长春市部分人群抽样,应用酶联免疫吸附实验检测技术对进行麻疹疫苗免疫前后麻疹IgG抗体水平检测,以观察疫苗的初免效果,了解麻疹抗体消长情况,探讨疫苗免疫前后IgG抗体测定水平,并为再免补种是否成功提供依据。1996年7月美国疾病控制和预防中心、泛美卫生组织、世界卫生组织召开会议讨论全球消灭麻疹的可行性问题,认为根据美洲和英国消除麻疹的经验,使用现有的麻疹疫苗,在今后10年-15年内全球消灭麻疹是可行的。[5]我国卫生部卫疾控发第16号文发出《加速麻疹控制规划指南》的,把消除麻疹列入继消灭脊髓灰质类后的主要目标。 方 法 1 标本来源 采集我市0-50岁健康人血清,划分三个年龄组,分离血清,-20ºC冻存待检。 1.1抗原、麻疹IgG阳性血清购自中国预防医学科学院病毒研究所。 1.2酶标抗体购自卫生部北京生物制品研所。 2 麻疹IgG抗体的检测方法 麻疹IgG抗体的检测采用酶联免疫吸附试验法。 2.1包被将麻疹抗原和细胞对照抗原按1:1000稀释加于96孔聚乙烯板,留空白对照一孔,4℃过夜;洗板3次后,加入用磷酸二氢钠,磷酸氢二钠,氯化钠,明胶,高压后,再加0.15﹪吐温-20配制成的稀释液150ul/孔,置37℃温箱30分钟;洗板3次,扣干。在大孔血凝板上按不同浓度稀释待检血清,由稀至浓加入包被板100ul/孔.,37℃温箱1小时;洗板5次,扣干。加入酶标记物100ul/孔.,除空白孔;洗板5次,扣干。加入新配制的邻苯二胺-H2O2底物液100ul/孔,避光室温放置15分钟,以2M磷酸50ul/孔,终止反应。 2.2测定:按仪器说明调节酶标仪(型号ZL309产地BIO-TEK)。选择490nm的滤光片,逐孔测定OD值,同一稀释度下,麻疹抗原孔吸光度OD值/细胞抗原孔OD值≥2.1倍,判为阳性,阳性的最高稀释度为该血清的抗体效价。 结 果 1 待检血清麻疹IgG抗体的检测结果: 1.1 麻疹流行季节(2008年3月- 6月和2009年3月- 6月),疫苗免疫前后检测3个年龄组抽样人群血清358份,麻疹IgG抗体的检测结果见1,抗体滴度阳性率比较见表2. 表1麻疹流行季节麻疹疫苗免疫前后人群血清麻疹IgG抗体水平 年龄(组) 08年3月-6月被检人数 09年3月-6月被检人数 合计 ≤1:200 1:800 1:3200 1:6400 0-8个月麻疹疫苗接种前 3岁-14岁麻疹疫苗接种后 20岁-50岁麻疹疫苗接种后 合计 48 60 70 178 50 60 70 180 98 120 140 358 08年14 09年12 合计26 08年54 09年50 合计94 08年17 09年15 合计32 162 08年20 09年24 合计44 08年13 09年10 合计23 08年36 09年32 合计68 135 08年12 09年9 合计21 08年6 09年6 合计12 08年20 09年17 合计37 70 08年0 09年2 合计2 08年5 09年0 合计5 7 表2血清IgG抗体滴度阳性率比较 抗体滴度 0-8个月阳性率 3岁-14岁阳性率 20岁-50岁阳性率 合计 ≤1:200 1:800 1:3200 1:6400 26.53﹪ (26/48) 44.90﹪ (44/98) 21.43﹪ (21/98) 2.04﹪ (2/98) 86.67﹪ (104/120) 19.17﹪ (23/120) 10﹪ (12/120) 22.86﹪ (32/140) 48.57﹪ (68/140) 26.42﹪ (37/140) 3.57﹪ (5/140) 45.25﹪ (162/358) 37.71﹪ (135/358) 10.55﹪ (70/358) 1.96﹪ (7/358) 1.2 由表2可以看出,麻疹疫苗接种前(0-8个月组)和麻疹疫苗接种后(20岁-50岁)血清IgG抗体滴度阳性率高;3岁-14岁年龄组IgG抗体滴度低下,≤1:200者占86.67﹪(104/120),滴度 1:800和1:3200,仅有19.17﹪(23/120)和10﹪(12/120). 1.3 0-8个月组IgG抗体滴度明显高于3岁-14岁年龄组而接近成人组IgG抗体滴度,这是母体对新生儿影响造成的。 讨 论 1. 1990年日内瓦召开的麻疹疫苗会议上,有关专家指出,麻疹野毒株即使在高覆盖率的免疫人群中仍具有高度传染性,且在其中成功的传播[6],而初免失败或接种后免疫力消失者在高覆盖率人群再形成易感人群。 2. 我们这次调查发现,麻疹IgG抗体阳性率较低的是学龄前儿童、小学生,在实验过程中,我们也曾将其中一些阳性对象血清稀释度降低进行测定,即从1:50—1:400进行检测,结果≤1:200者占 86.6﹪(104/120),由此可见低年龄组存在着抗体水平低下的问题。 3. 据严有望[7]在麻疹流行时采用酶联免疫吸附方法(ELISA)监测麻疹IgG抗体,发现当抗体滴度低至1:200时毫无保护作用,1:800时仅能避免显性感染,却不能避免隐性感染。本次检测表明,初免产生的抗体逐年下降甚至于转阴,构成麻疹易感人群,麻疹可在血清抗体≤1:200者中造成流行,而抗体1;800者呈亚临床表现,成为传染源,引起麻疹的传播。因此,加强这部分人群的麻苗接种和提高其接种成功率具有很重要的意义。由此提示我们,在今后免疫工作中,不但要抓好基础免疫,提高接种率,消除免疫空白,更要严格执行提高免疫程度,适时接种。同时做好免疫监测,提高免疫质量。 4. 经过多年的努力,我国麻疹的发病率已大大降低,但与执行免疫效果良好的国家比尚有差距,仍有疫情发生的原因各地不尽相同,有学者把这些原因概括为以下几个方面: 4.1疫苗稳定性差; 4.2接种工作不十分落实; 4.3冷链设备不足; 4.4接种技术不合要求; 4.5缺乏必要的人群免疫监测; 4.6疫情报告不及时,切断传播不得力; 4.7免疫失败和大量的人口流动是引起麻疹发病的另一个因素; 4.8另外,不容忽视免疫前小月龄麻疹发病,如何解决需要进一步探讨。 结 论 ELISA测定法是根据抗原、抗体特异性结合形成免疫复合物的原理,并以底物的显色程度,即光密度(OD)值的高低来判断结果。此法具有灵敏度高,特异性强等优点。所以我们通过这次建立麻疹实验室检测方法(ELISA),除辅助诊断不典型麻疹患儿,以便及时隔离患儿外,还应进行人群麻疹免疫监测,了解疫苗接种效果和人群麻疹抗体的消长情况。利于及时补种,防止麻疹流行。 参考文献 1. 刘水渠,麻疹的变迁,国外医学流行病传染病学分册,1990,17:214-217。 2. 胡善联,国外几种主要传染病的疫情及动态,国外医学流行病传染病学分册,1990,17:1-7。 3. 杜文慧,孙荷,杨莉莉等,新疆某油田基地麻疹、风疹同时暴发的调查报告,中华儿科杂志,1995,33:274-276。 4. 汪良吉,主编,中国实用医药学(上),第1版,成都:科技大学出版社,1998,10:21-22。 5. WHO Meeting on advances in mneaalles euvminarion: Conclusions and recomaucendatlons WER,1996,71(41):305。 6. 卢曾考,日内瓦麻疹疫苗会议,中外医学预防诊断治疗生物制品分册,1990,13:220-222。 7. 严有望,尚勇,胡勇等,麻疹ELISA IgG抗体滴度观察,中华实验和临床病毒学杂志,1990,4:294。 2009-11-8 单位名称:吉林省长春市南关区卫生监督所 联系人: 于新生 联系电话:0431—88755097(单位),手机:13944870148 联系地址:吉林省长春市南关区西三道街291号 邮政编码:130041
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