人工尿液质控物的配制与应用

经拉米夫定治疗后 ,12 例中 8 例有效 ;对照组的 11 例中 2 例有效 ,用χ2 检验 ,两者相比在治疗后 差异有显著性 (χ2 = 5. 49 , P < 0. 05) 。 讨 论 慢性乙型肝炎患者往往出现血小板数量的减 少 ,既往认为与慢性乙型肝炎患者脾大引起血小 板分布异常和脾功能亢进使血小板破坏增加有 关 ;对于无脾脏明显增大的 ,可能与其自身的免疫 状态和 HBV 对骨髓抑制有关 ,尤其是肝功能反 复异常的慢性乙型肝炎患者 ,反复异常持续时间 越长 ,其血小板计数变化愈明显[1 ,2 ] 。慢性乙型 肝炎患者血小板计数和肝炎纤维化的程度相关 , 在排除其他因素的影响 ,血小板计数的动态观察 可监测肝脏的炎症和纤维化情况 ,进行性肝纤维 化和肝硬化可以通过观察血清转氨酶水平和血小 板的数量而得出[3 ,4 ] 。 拉米夫定是治疗慢性乙型肝炎有效药物之 一 ,通过抑制 HBV 多聚酶的活性达到抑制机体 HBV 的复制 ,调节机体的免疫反应 ,改善患者的 肝炎症状。既往有关拉米夫定报道中没有可升高 血小板数量的作用 ,治疗中发现拉米夫定升高血 小板的作用可能是通过改善肝脏功能所致 ,随着 肝脏的炎症减轻 ,血流动力学紊乱得以改善 ,降低 门脉压 ,改善脾功能亢进 ,减少血小板的破坏 ,从 而升高血循环中的血小板数量。拉米夫定治疗 1 年后 ,慢性乙型肝炎 HBV 阳性患者和治疗前相 比血小板数量有明显改善 ,与对照组相比 ,血小板 改善的患者例数差异也有显著性。 我们发现在治疗过程中肝功能持续稳定的患 者 ,血小板改善显著 ;而肝功能不稳定或血清病毒 量降低不显著患者 (拉米夫定治疗无效患者) ,血 小板计数变化不大。部分患者肝脏病理检查 ,炎 症和纤维化程度轻者 ,治疗前后血小板变化明显 , 而炎症和纤维化程度重者 ,血小板升高较慢。 参 考 文 献 [1 ] 　黄康龄 ,陈 　晓 ,李在村 ,等. 肝炎后肝硬化和重型 肝炎患者血小板 4 项指标的测定意义[J ] . 首都医科 大学学报 ,2000 ,21 :3042306. [2 ] 　叶晓光 ,冯国强. 各型乙肝患者血小板功能的检测 及[J ] . 临床肝胆病杂志 ,1996 ,12 :101. [3 ] 　Annette P , Cynthia B , Deanna O. Serum aminotrans2 ferase levels and platelet counts as predictors of degree of fibrosis in chronic hepaitis C virus infection[J ] . Am J Gastroenterology 2001 , 96 :314223146. [4 ] 　Haber MM , West AB , Haber AD , et al. Relationship of aminotransferase to liver histological status in chron2 ic hepatitis [ J ] . Am J Gastroenterology , 1995 , 90 : 125021257. (收稿日期 :2003204207) (本文编辑 :范基农) 文章编号 :100122087 (2004) 0420361203 　　　中图分类号 :R446. 12 　　　文献标识码 :B 人工尿液质控物的配制与应用 许凯声1 , 　陈小华1 , 　陈红兵1 , 　肖于飞1 , 　泮高辉2 (1. 浙江大学医学院附属第二医院检验科 ,浙江 杭州 310009 ; 2. 江苏大学医学技术学院应届毕业生 ,江苏 镇江 212001) 　　摘要 :目的 　自配人工尿液质控物进行室内质量控制 ( IQC) 。方法 　取 EDTA2K2 抗凝血约 100 ml ,收集白 细胞 ,加入溶血素约 10 ml ,破坏白细胞 ,释放出白细胞酯酶 ,进一步溶解难溶红细胞 ,析出血红蛋白和细胞蛋白 质。加入亚硝酸钠、葡萄糖、胆红素、丙酮等制成甲、乙值多参数人工尿液质控物。结果 　自配人工尿液质控物 的 p H 值、比重、蛋白质、潜血、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐和白细胞结果稳定。胆红素结果有 9. 3 %上下波动。结论 　自配人工尿液质控物进行室内质量控制是可行的。 作者简介 :许凯声 ,男 ,1953 年生 ,副主任检验师 ,主要从事临床血液学及体液学检验和研究工作。 ·163·检验医学 2004 年第 19 卷第 4 期　Laboratory Medicine 2004 , Vol 19. No 4. 关键词 :尿液质控物 ;白细胞液 ;胆红素 　　随着尿液分析的自动化仪器越来越普及 ,质 量管理已是尿液检验的一个重要环节 ,而尿液质 控物是搞好尿液分析质量控制的必要条件。我们 参照卫生部医政司及有关专家所发配制人工尿 液室内质控物有关文献[1 ,2 ]的基础上 ,自配人工 尿液 (特别是白细胞、胆红素) 质控物进行室内质 量控制 ( IQC) ,取得了较满意的效果。 材料和方法 一、材料 1. 仪器 　日本京都 AX24280 全自动尿液分 析仪、国产优利特 200 型尿液自动分析仪及原装 试带。 2. 试剂 　甲、乙值人工尿液质控物各化学试 剂的配制 :甲液 (贮存液) :磷酸氢二钠 3 g ,磷酸二 氢钾 0. 75 g ,氯化钠 10 g ,尿素 10 g ,肌酐 1. 0 g , 葡萄糖 10 g ,硫柳汞 1 g ,白细胞液 250 ml ;乙液 (贮存液) :磷酸氢二钠 3 g ,磷酸二氢钾 0. 75 g ,氯 化钠 10 g ,尿素 10 g ,肌酐 1. 0 g ,葡萄糖 20 g ,硫 柳汞 1 g ,蒸馏水 250 ml。胆红素 (贮存液) :胆红 素 1. 0 g ,二甲亚砜 60 ml ,混合血清 60 ml。 二、方法 1. 白细胞液配制 (含蛋白 ,血红蛋白) 　(1) 取血常规中白细胞数 6 000～10 000 个/μl 的 ED2 TA2K2 抗凝血液标本约 100 ml ,分批倒入大试管 中 ,加入过量的蒸馏水颠倒混均 ,2 000 r/ 5 min (以破坏红细胞 ,沉淀白细胞)后 ,将上清液迅速弃 去。用同法再离心 1 次 ,弃去上清液 ; (2) 加入约 250 ml 的蒸馏水 ,将沉淀物混匀 ,收集 ,成白细胞 悬液 ,将收集到的白细胞悬液 ,加入溶血素约 10 ml ,以溶解白细胞 (中性粒细胞 ,其体积已在洗涤 过程中膨胀) ,析出白细胞酯酶 ,溶解未破坏的红 细胞 ,析出血红蛋白和细胞蛋白质 ; (3) 取新华滤 纸将白细胞悬液过滤 ,将过滤的白细胞原液在尿 液分析仪上测定 ,白细胞、血红蛋白和蛋白质含量 应在 3 + 以上 ( WBC > 500 CEL/μl ,BLD > 200 CEL/μl ,PRO > 3 g/ L ) ; (4) 将此 250 ml 白细胞 液直接加入到甲液化学试剂中 ,混匀。即成甲液 贮存液。将每 10 ml 分装至已灭菌的深棕色安瓿 中 4 ℃冰箱保存。 2. 甲液应用液配制及应用 　用时取甲液贮 存液 20 ml ,亚硝酸钠 20 mg ,氯仿 1 ml ,加水至 200 ml 成甲液应用液 ,仍放 4 ℃冰箱保存。每天 取 5 ml 放至室温 ,做 IQC。使用周期为 1 个月 , 下一周期另配。 3. 乙液应用液配制及应用 　用时取乙液贮 存液 20 ml ,胆红素贮存液 10 ml ,丙酮 2 ml ,加水 至 200 ml 成乙液应用液。用法同甲液。 结 果 每天开机仪器自检后取已预放至室温的甲、 乙质控应用液测定 ,每月统计结果 ,每批次测定 1 个月 ,采用模拟 X2sd 质控图绘制结果 ,并统计每 一项结果的概率 ,以观察仪器及试纸条的重复性 和自配人工尿液的稳定性。全年 291 d IQC 数据 统计见表 1。 表 1 　291 d 甲、乙人工尿液质控物测定结果概率[数值或性质 (概率 %) ] 组别 酸碱度 比重 蛋白质 葡萄糖 酮体 隐血 胆红素 亚硝酸盐 白细胞 甲液 6. 0 (25) 1. 005 (0. 3) + / - (2. 1) + / - (2. 7) - (100) + / - (1. 7) - (100) + (100) 2 + (42) 6. 5 (58) 1. 010～ (20. 0) 1 + (24. 0) 1 + (21. 0) 2 + (42. 3) 3 + (58) 7. 0 (17) 1. 015～ (56. 0) 2 + (73. 9) 2 + (76. 3) 3 + (56. 0) 1. 020 (23. 7) 乙液 7. 5 (45) 1. 010～ (42. 0) 3 + (46. 0) 2 + (1. 0) 1 + (1) 1 + (1. 4) + / - ～1 + (9) - (100) - (100) 8. 0 (55) 1. 015 (58. 0) 4 + (54. 0) 3 + (46. 0) 2 + (39) 2 + (98. 6) 2 + (45) 4 + (53. 0) 3 + (59) 3 + (46) 　　注 : - 阴性 ; + / - 弱阳性 ; + 阳性 ·263· 检验医学 2004 年第 19 卷第 4 期　Laboratory Medicine 2004 , Vol 19. No 4. 讨 论 白细胞检测原理是利用粒细胞浆内中性酯酶 (NAE) 的反应而呈色。我们用蒸馏水溶解红细 胞 ,同时膨胀白细胞 ,再加入溶血剂溶解粒细胞 膜 ,释出中性酯酶 ,取得了满意的效果。在配制此 液的同时还获得了细胞蛋白质和血红蛋白 ,且结 果稳定。 胆红素为非水溶性 ,能溶于苯、氯仿、二硫化 碳、二甲亚砜等有机溶液。根据胆红素可见吸收 光谱特征及溶解度 ,我们选择二甲亚砜溶液将胆 红素溶解 ,并加入等量混合血清使溶解的胆红素 呈稳定状态 ,缓缓加入到 p H 值 7. 5～8. 0 的缓冲 液中 ,充分混匀 ,可保持胆红素在水溶液中充分溶 解且保持相当稳定。 亚硝酸盐反应原理主要为亚硝酸盐在 p H 酸 性时 ,与氨苯砷酸反应形成重氮化合物 ,再与 N2 苯基乙二胺偶联 ,产生粉红色。亚硝酸钠为还原 剂 ,较易氧化 ,所以在临用时加入。我们曾将不同 浓度的亚硝酸钠做过比较 ,浓度为 5～10 mg/ dl 结果较为稳定 , > 50 mg/ dl 的亚硝酸盐浓度反而 会抑制反应。 从表 1 可见 ,每一项结果的统计概率以酸碱 度、比重、蛋白质、潜血、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐和 白细胞结果最为稳定 ,胆红素结果可有9. 3 %的上 下波动 ,引起原因可能为试纸条或质控液放置室 温或暴露空气时间过长 ,一般重复测定或换试纸 条测定即可。 实验证明室内质控物的每天测定 ,对监测仪 器的正常工作起了关键的作用。 参 考 文 献 [1 ] 　叶应妩 ,王毓三. 全国临床检验操作规程[ M ] . 南京 : 东南大学出版社 ,1998. 1222123. [2 ] 　丛玉隆 ,马骏龙. 当代尿液分析与临床[ M ] . 北京 :中 国科学技术出版社 ,1998. 1122113. (收稿日期 :2003203217) (本文编辑 :范基农) 文章编号 :100122087 (2004) 0420363203 　　　中图分类号 :R446. 13 　　　文献标识码 :A Quik 法在下消化道出血检测中的应用 王 　青 , 　张雪萍 , 　刘建敏 , 　张俊杰 (上海市江湾医院检验科 ,上海 200434) 　　摘要 :目的 　探讨粪便隐血 Quik 检测法的临床应用价值。方法 　对 4 种不同方法的检测灵敏度、重复性和 特异性进行检测 ,并对我院 247 例行胃肠镜检查前的胃肠道相关门诊和住院患者的粪便作隐血检测。结果 　 Quik 法、胶体金检测法和乳胶凝集法的灵敏度、重复性和特异性较高 ,dBest 一步法的检测灵敏度、重复性和特异 性较低 ,Quik 法下消化道出血检出阳性率为 94 % ,结、直肠肿瘤的阳性检出率为 100 % ,上消化道出血的阳性检 出率为 9 %。结论 　粪便隐血 Quik 检测法具有较高的检测灵敏度、特异性和重复性 ,在下消化道出血 ,尤其在 结、直肠肿瘤的辅助诊断中具有较高的临床价值。 关键词 :免疫 ;胶体金 ;粪便隐血 作者简介 :王　青 ,男 ,1968 年生 ,学士 ,主管检验师 ,主要从事免疫学检验和检验科管理工作。 　　粪便隐血的检测方法很多 ,主要分为化学法 和免疫法 2 类。化学法原理类似 ,使用方便 ,但灵 敏度较低、特异性也较差 ;免疫法特异性较好也较 敏感 ,国内外报道有近 10 种[1 ] 。我们旨在探讨 Quik 法的检测灵敏度、重复性和特异性及其在下 消化道出血 ,尤其在结、直肠肿瘤辅助诊断中的作 用。 材料和方法 一、材料 1. 仪器与试剂 　Orion Diagnostica Quik Read 101 免疫浊度检测仪 ; Orion Diagnostica 粪 ·363·检验医学 2004 年第 19 卷第 4 期　Laboratory Medicine 2004 , Vol 19. No 4.