孕妇外周血胎儿有核红细胞数与胎儿及胎盘异常关系

孕妇外周血胎儿有核红细胞数与胎儿及胎盘异常关系 孕妇外周血胎儿有核红细胞数与胎儿及胎盘异常关系 【摘要】 目的 探讨在胎盘和胎儿发生病理性变化时,母血中胎 儿有核红细胞(FNRBC)数量的变化,为母血中FNRBC计数在无创性产 前诊断中的应用提供理论基础和实验依据。方法 对110例8,40孕 周的妇女(60例正常妊娠,30例病理妊娠,20例胎儿异常)外周血进行 单密度梯度离心,瑞氏染色和细胞计数,分析母血中FNRBC数量在病 理妊娠和胎儿异常时的变化及其与孕周的关系。对有胎儿异常可能的 病例，孕早期(8,12周)自然流产者行绒毛细胞核型分析，孕中期 (13,24周)及晚期(25周以上)取流产儿和新生儿血进行染色体分 析。结果 正常妊娠时，母血中FNRBC平均数量为 (10.20?8.11)×103/L，病理妊娠和胎儿异常时母血中FNRBC平均数 量为(23.09?12.42)×103/L和(38.93?14.87)×103/L，病理妊娠 组和胎儿异常组与正常妊娠组相比差异有显著性(F=25.927， q=4.236、10.674，P0.05)。结论 在胎儿和胎盘发生病理性改变时， 母血中FNRBC数量较正常妊娠增加，同时母血中FNRBC数量随孕周增 加而增加，母血中FNRBC计数对产前预测病理妊娠和胎儿异常的发生 有辅助意义。 【关键词】 孕妇;胎儿有核红细胞;产前诊 断 COUNTING OF FETAL NUCLEATED ERYTHROCYTES IN MATERNAL BLOOD AND ITS RELATION WITH ABNORMAL FETUS AND PLACENTA YANG XIAO JU, XU JIN E, ZHAO JIN XIA, et al (Department of Obstetrics, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China); [ABSTRACT] Objective To investigate the changes of the counting of fetal nucleated red blood cells (FNRBC) and their relationship with pathology of fetus and placenta, and provide rationale and experiment evidence for the application of FNRBC in noninvasive prenatal diagnosis. Methods This study consisted of 110 women with 8-40 weeks of pregnancy (60 with normal pregnancy, 30 with patho pregnancy, and 20 with fetal disorder). Counting of FNRBC in the maternal blood and its relationship with gestational weeks, pathological gestation and abnormal fetus were evaluated by single density centrifugation and Wrights staining. For suspected cases, in early pregnancy (8-12 weeks), chorionic villus cell karyotype analysis was done in those with spontaneous natural abortion; in the midtrimester (13-24 weeks) and the late pregnancy (over 25 weeks), the abortus or newborn blood was collected for chromosome analysis. Results Of normal pregnacy, the average quantity of FNRBC in maternal blood was(10.20plusmn;8.11)times;103/L; of patho pregnancy and abnormal fetus, it was (23.09plusmn;12.42)times;103/L and (38.93plusmn;14.87)times;103/L, respectively. The differences of FNRBC count between normal pregnacy and both patho pregnacy and abnormal fetus were significant (F=25.927;q=4.236,10.674;P0.05). Conclusion The quantity of FNRBC in maternal blood increases with the increase of gestational weeks when pathological changes occur, counting FNRBC is of significance as an auxiliary diagnosis in prenatal prediction of patho pregnancy and abnormal fetus. [KEY WORDS] Pregnant women; Fetus nucleated red cell; Prenatal diagnosis 利用母血中胎儿有核红细胞(FNRBC)进行胎儿遗传疾 病的产前筛查是近年来新发展的一项非创伤性产前诊断技术，母血中 FNRBC是目前最适合产前诊断的胎儿细胞，当胎盘解剖结构和功能的 完整性破坏或母儿免疫异常时，其数量会发生异常。本文检测了不同 孕周母血中FNRBC数量的变化，探讨病理妊娠时和胎儿畸形或(和) 染色体异常时母血中FNRBC的变化情况，为母血中FNRBC计数辅助应 用于产前预测病理妊娠和产前筛查胎儿畸形提供理论基础和实验依 据。 1 对象和方法 1.1 研究对象 本院产科门诊及住院孕 妇110例，孕周8,40周，年龄28,40岁。包括正常妊娠60例;病 理妊娠30例，其中子痫前期19例，胎儿宫内发育迟缓3例，妊娠期 糖尿病5例，妊娠心脏病1例，习惯性流产2例;胎儿异常20例，其 中死胎5例，神经管畸形6例，胃肠道畸形4例，肢体畸形3例，18/21 三体2例。病理妊娠诊断按《妇产科学》(第6版)教材标准进行，胎儿异常诊断参照产前B超诊断及染色体检查结果。排除贫血(HGb>100 g/L)及其他血液病。3组孕妇年龄和产次差异无显著性(P>0.05)。见表1。 表1 各组孕妇年龄、孕周、产次比较 1.2 FNRBC检测方法 所有病人均在创伤性检查前采集外周静脉血10 mL，置于EDTA抗凝管，室温保存， 6 h内室温下检测。用密度为1.085、1.075 kg/L的Percoll细胞分离液在离心管中制成密度梯度，然后将外周血10 mL用生理盐水等倍稀释后，缓慢加入。室温下以3 000 r/min离心30 min，分别收集上、中层分离界面细胞，以生理盐水洗涤后，制成涂片，瑞氏染色。在光学显微镜下观察FNRBC并计数。 1.3 胎盘绒毛细胞核型及胎血染色体分析 对有胎儿异常可能的病例，孕早期(8,12周)自然流产者行绒毛细胞核型分析，于孕中期(13,24周)及晚期(25周以上)取流产儿和新生儿血进行染色体分析。另取脐血1份、正常未育未孕妇女外周血标本2份分别作为阳性和阴性对照。 1.4 统计方法 应用SAS 10.0统计学软件进行数据处理[1]，结果以plusmn;s表示，数据间比较采用方差分析，相关性检验采用Pearson相关分析。 2 结 果 2.1 正常妊娠、病理妊娠和胎儿异常时母血中的FNRBC计数比较 正常妊娠时，母血中FNRBC平均数量为(10.20plusmn;8.11)times;103/L，病理妊娠和胎儿异常时母血中FNRBC平均数量分别为 (23.09plusmn;12.42)times;103/L和 (38.93plusmn;14.87)times;103/L，病理妊娠组、胎儿异常组与正常妊娠组相比较，差异均有显著意义(F=25.927，q=4.236、10.674，P0.05)。病理妊娠组孕中期和孕早期相比FNRBC数量差异无显著意义(F=17.325，q=2.112，P>0.05)，但与孕晚期比较差异有显著性(q=9.827，P0.05)。 2.4 胎儿异常组胎盘绒毛细胞核型及胎血染色体异常与母体外周血中FNRBC数量的关系 子痫前期病人的胎盘绒毛切片中可见明显的滋养细胞脱落现象，而此类病人母血中FNRBC数量则较正常妊娠时明显升高。此外，光学显微镜下可见胎儿生长受限(FGR)病人胎盘绒毛滋养细胞数量减少，且细胞外基质沉积增多，说明其增殖活性明显降低。正常核型胎儿母血中FNRBC的数量 相对较少，大约每毫升有1,3个。在核型异常胎儿母血中FNRBC数量则明显增多。胎儿异常时，母血中平均FNRBC的数量约为正常胎儿组的2,3倍，2例孕18/21 三体胎儿病人达正常妊娠的6,9倍。 3 讨 论 3.1 母血中FNRBC的进入方式及数量 正常成人外周血中不存在FNRBC,妊娠后由于母体与胎儿之间有母 胎输血，FNRBC有可能通过胎盘进入母体循环。胎盘在母体 胎儿间作为机械屏障和免疫屏障起着重要作用。由于FNRBC需通过胎盘屏障进入母体循环，所以它在母体循环中的数量与胎盘解剖结构和功能的[1][2]下一页